The barrier membranes for GTR procedure could be affected bY bacterial contamination after exposure to oral environment. This study was done to evaluate whether the tetracycline impregnated barrier membranes could inhibit bacterial attachment and penetration into membranes. The resorbable membrane(polylactic and polyglycolide copolymer, $Resolute^{(R)}$, W.L Gore and Associates, Inc..USA) and the non-resorbable membrane(e-PTFE; Gore-TexTM, W.L. Gore & Associates, Inc.,USA) were cut into 4mm discs and trated with 5% tridodecylmethylammonium chloride solution in ethanol and dried in air. The membranes were immersed in tetracycline(TC) solution (100mg/ml, pH 8.0) and dried. To the maxillary canine-premolar region in six periodontally healthy volunteers, removable acrylic devices were inserted, on which 8 cylindrical chambers were glued with TC impregnated and non-impregnated discs, the membrane discs were examined for bacterial attachment and penetration, and structural changes under SEM and LM. From the 1st day to the 7th day, membranes showed bacterial plaque formation composed of cocci and rods. Thereafter, filamentous bacteria appeared and the plaque thickness increased. The TC impregnated e-PTFE membranes showed less bacterial attachment and delayed in bacterial plaque maturation than non-treated membranes. As for bacterial penetration, the TC impregnated e-PTFE membranes showed superficial invasion and infrequent presence of bacteria in unexposed inner surface at the 4th week. while the non-treated e-PTFE membranes showed deep bacterial invasion at the 2nd week and frequent presence of internal bacteria at the 4th week. The resorbable membranes started to be resorbed at the 2nd week and were perforated at the 4th week, regardless of TC treatment. In conclusion, bacterial plaque formation and penetration was efficiently delayed in TC impregnated e-PTFE membranes, whereas resorbable membranes were similar in bacterial invasion due to membrane degradation and perforation, regardless of TC treatment.
Sung, Ha Guyn;Kobayashi, Yasuo;Chang, Jongsoo;Ha, Ahnul;Hwang, Il Hwan;Ha, J.K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제20권2호
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pp.200-207
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2007
In vitro rumen incubation studies were conducted to determine effects of initial pH on bacterial attachment and fiber digestion. Ruminal fluid pH was adjusted to 5.7, 6.2 and 6.7, and three major fibrolytic bacteria attached to rice straw in the mixed culture were quantified with real-time PCR. The numbers of attached and unattached Fibrobacter succinogenes, Ruminococcus flavefaciens and Ruminocococcus albus were lower (p<0.05) at initial pH of 5.7 without significant difference between those at higher initial pH. Lowering incubation media pH to 5.7 also increased bacterial numbers detached from substrate regardless of bacterial species. Dry matter digestibility, gas accumulation and total VFA production were pH-dependent. Unlike bacterial attachment, maintaining an initial pH of 6.7 increased digestion over initial pH of 6.2. After 48 h in vitro rumen fermentation, average increases in DM digestion, gas accumulation, and total VFA production at initial pH of 6.2 and 6.7 were 2.8 and 4.4, 2.0 and 3.0, and 1.2 and 1.6 times those at initial pH of 5.7, respectively. The lag time to reach above 2% DM digestibility at low initial pH was taken more times (8 h) than at high and middle initial pH (4 h). Current data clearly indicate that ruminal pH is one of the important determinants of fiber digestion, which is modulated via the effect on bacterial attachment to fiber substrates.
Kim, Min Ji;Sung, Ha Guyn;Upadhaya, Santi Devi;Ha, Jong K.;Lee, Sung Sill
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제26권10호
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pp.1459-1465
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2013
Two in vitro experiments were conducted to evaluate the effect of methylcellulose (MC) on i) bacterial detachment from rice straw as well as ii) inhibition of bacterial attachment and fiber digestibility. To evaluate the effect of MC on fibrolytic bacterial detachment (Exp 1), in vitro bacterial cultures with 0.1% (w/v) MC solution were compared with cultures without MC after 8 h incubation. The effect of MC on inhibition of bacterial attachment was determined by comparing with real-time PCR the populations of F. succinogenes, R. flavefaciens and R. albus established on rice straw pre-treated with 0.1% MC with those on untreated straw after incubation for 0, 6 and 12 h (Exp 2). The major fibrolytic bacterial attachment on rice straw showed significantly lower populations with either the addition of MC to the culture or pre-treated rice straw compared to controls (p<0.05). Also, the digestibility of rice straw with MC was significantly lower compared with control (p<0.05). The F. succinogenes population did not show detachment from rice straw, but showed an inhibition of attachment and proliferation on rice straw in accordance with a decrease of fiber digestion. The detachments of Ruminococcus species co-existed preventing the proliferations with subsequent reduction of fiber degradation by MC during the incubation. Their detachments were induced from stable colonization as well as the initial adhesion on rice straw by MC in in vitro ruminal fermentation. Furthermore, the detachment of R. albus was more sensitive to MC than was R. flavefaciens. These results showed the certain evidence that attachment of major fibrolytic bacteria had an effect on fiber digestion in the rumen, and each of fibrolytic bacteria, F. succinogenes, R. flavefaciens and R. albus had a specific mechanism of attachment and detachment to fiber.
Microorganisms are implicated the endodontic treatment failures. Persistent endodontic infection may be the result of retention of microorganisms in the dentin of the root canal walls. Dentinal tubules of the root canal walls have been shown to harbor microorganisms. The purpose of this study was to investigate the invasion of microorganism into the root dentin and dentinal tubules. The effects of irrigation solutions and smear layer on bacterial colonization of root canal were evaluated using a scanning electron microscopy. Canals of extracted human teeth with single and straight canals were stepback prepared using normal saline. Tooth samples were divided into four groups according to the irrigation solutions -5 % sodium hypochlorite and normal saline-and smear layer treatment. The smear layer was removed by 5% NaOCl and 20% EDTA for 10 min respectively. After sterilization, they were incubated with each strains of Streptococcus sanguis, Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus and Escherichia coli. Sodium hypochlorite solution reduced the adhesion of microorganisms effectively compared to normal saline. The smear layer inhibited colonization of E. faecalis, S. aureus and E. coli in the root canals due to their blocking of dentianl tubules. But S. sanguis invaded dentinal tubules in the root canals without smear layer. It was suggested that bacterial attachment might be different according to the strains. Sodium hypochlorite inhibited bacterial attachment in the dentinal tubules dramatically. The absence or presence of smear layer affected bacterial invasion of the dentinal tubules.
본 연구에서는 칼럼실험을 이용하여 알루미늄 철 산화물 동시피복모래에서 박테리아(Bacillus subtilis)의 부착에 산화음 이온(질산염, 탄산염, 인산염)이 미치는 영향을 조사하였다. 실험결과, 질산염의 경우 피복모래에서의 박테리아 부착은 질산염 이온의 농도변화와 무관하였다. 질산염의 농도가 변화함에 따라(0.1, 1, 10 mM) 질량회수율은 10.9${\pm}$0.2 %로 일정하였다. 탄산염의 경우 농도가 0.1 mM에서 1 mM로 증가함에 따라 질량회수율이 25.6%에서 39.0%로 증가하였고, 인산염의 경우에도 동일한 농도조건에서 50.9%에서 78.9%로 증가하였다. 이러한 현상은 박테리아 부착에 대한 탄산염과 인산염 이온의 방해효과 때문이었다. 반면, 탄산염/인산염의 농도가 1 mM에서 10 mM로 증가함에 따라 질량회수율이 각각 39.0%에서 23.8%로 78.9%에서 52.6%로 감소하였다. 이러한 현상은 탄산염/인산염의 농도증가에 따라 피복모래표면에 흡착되지 않고 수용액상에 존재하는 탄산염이나 인산염 이온이 이온강도를 증가시킴으로써 일어나는 박테리아 부착에 대한 증진효과 때문이었다. 본 실험조건에서 피복모래에서의 박테리아 부착에 미치는 영향은 인산염, 탄산염, 그리고 질산염 중, 인산염이 가장 큰 것으로 나타났다.
Transport of Escherichia coli ATCC 11105 through porous media was investigated in this study using two sets of column experiments to quantify the attachment-related parameters (sticking efficiency, attachment rate coefficient and filter factor). The first set of experiments was performed in quartz sand under different ionic strength conditions (1, 20, 100, 200 mM) while the second experiments were carried out in quartz sand mixed with metal oxyhydroxide-coated sand (0, 5, 10, 25%). The breakthrough curves of bacteria were obtained by monitoring effluent, and then bacterial mass recovery and attachment-related parameters were quantified from these curves. The first experiments showed that the mass recoveries were in the range of 13.3 to 64.7%, decreasing with increasing ionic strength. In the second experiments, the mass recoveries were in the range of 15.0 to 43.4%, decreasing with increasing coated sand content. The analysis indicated that the sticking efficiency, attachment rate coefficient and filter factor increased with increasing ionic strength and coated sand content. The value of filter factor in the first experiments ranged from 1.45 e-2 to 6.72 e-2 1/cm while in the second experiments it ranged from 2.78 e-2 to 6.32 e-2 1/cm. Our filter factor values are one order of magnitude lower than those from other studies. This discrepancy can be attributed to the size of sand used in the experiment. The analysis demonstrated that the travel distance of bacteria estimated using the filter factor can be varied greatly depending on the solution chemistry and charge heterogeneity of porous media.
본 연구의 목적은 입상활성탄에서 이온강도와 철첨착이 Enterococcus faecalis의 부착에 미치는 영향을 분석하는 것이다. 야자계 입상활성탄(c-GAC), 철첨착된 야자계 입상활성탄(fc-GAC), 산세척된 야자계 입상활성탄(a-GAC), 그리고 철첨착된 산세척 야자계 입상활성탄(fa-GAC)에서 박테리아 부착을 관찰하기 위하여 두 가지 용액조건(NaCl 1, 10 mM)에서 칼럼실험을 수행하였다. 실험결과, c-GAC에서 이온강도가 1에서 10 mM로 증가함에 따라 박테리아의 질량회수율은 77.3에서 61.6%로 감소하였고, a-GAC에서는 질량회수율이 71.6에서 32.3%로 감소하였다. 이는 이온강도가 증가함에 따라 입상활성탄에서 박테리아의 부착이 증진될 수 있음을 나타낸다. 한편, fc-GAC에서 질량회수율은 62.6% (1 mM)과 53.3% (10 mM)이었고, fa-GAC에서는 50.8% (1 mM)과 16.9% (10 mM)이었는데, 이들 질량회수율이 c-GAC와 a-GAC에서의 질량회수율보다 낮았다. 이는 철첨착에 의하여 입상활성탄에서 박테리아의 부착이 증진될 수 있음을 나타낸다. 본 연구는 입상활성탄에서 박테리아의 부착과 관련하여 이온강도와 철수산화물 첨착의 영향에 대한 정보를 제공하고, 나아가 표면이 변형된 입상여재를 이용한 미생물의 제거에 관한 지식을 증진시킬 것이다.
당근 진탕배양세포로부터 분리한 원형질체에 A.rhi-zogenes를 처리하여 bacteriad의 부착과 부착과정에 영향을 주는 여러 요인들을 조사하였다. 또한 당근뿌리 절편에 strain이 다른 bacteria와 heat-inactivated bacteria를 전처리한 후 A.rhizogenes strain A4를 접종하여 식물세포 표면에 있어서 bacterial specific receptor sites존재 유무를 살펴보았다. Bacteria의 부착은 pH 6.0, 24-35$^{\circ}C$ 조건하에서 120분동안 원형질체막에 유의적인 증가를 나타내었으며, 또한 세포벽합성에 따르는 bacteriaqnckr의 영향은 볼 수 없었다. Strain이 다른 bacteria나 heat-inactivated bacteria의 전처리에 의한 A..rhizogenes의 당근조직에서 hairy root형성 억제 현상은 식물세포 표면에 specific receptor sites가 존재 한다기보다는 부착에 있어서 전처리한 bacteria의 경쟁적 저해작용으로 형질전환이 다소 억제되는 것으로 사료되어졌다.
본 연구는 배양초기 pH 조건이 F. succino- genes의 섬유소 부착과 섬유소 소화에 미치는 영향을 보고자 실시하였다. 선정된 specific primer를 이용하여 F. succinogenes의 genomic DNA로부터 445bp의 16S rDNA 절편을 증폭하여 205bp의 internal control을 제작하였고, cPCR 결과로부터 박테리아 수를 계산할 수 있는 표준곡선의 회귀식($r^2$>0.99)을 얻을 수 있었다. In vitro 배양초기 pH에 따른 F. succ- inogenes의 cellulose 부착을 cPCR로 모니터링한 결과, 발효과정 전 기간동안 초기 pH가 6.8과 6.2일 때 cellulose 건물 g당 부착 균주의 수가 pH 5.6일 때 보다 높았으나, pH 6.8과 6.2 사이에서는 큰 차이는 없었다(p>0.05). Cellulose 분해는 배양시간이 진행됨에 따라 증가 되었으며, 분해 정도는 pH가 증가함에 따라 더 높았다. 배양초기 pH가 6.8, 6.2 그리고 5.8일 때 48시간동안 감소한 pH는 각각 0.24, 0.58 그리고 0.16 이었다. 가스 생산량은 발효 시간이 경과함에 따라 pH가 높을수록 더 많았다. 결론적으로 발효 초기 pH는 F. succinogenes에 의한 cellulose 소화, 가스 생산, pH 변화 및 cellulose 부착에 큰 영향을 주었으며, 특히, 낮은 pH(5.8)에서는 섬유소 소화 및 박테리아 부착을 현저한 감소 시켰다.
This study was performed to observe the bacterial adhesion and penetration to e-PTFE membrane following guided tissue regeneration(GTR) procedure and to evaluate the association of the membrane exposure and bacterial contamination with the clinical outcome. For the study, ten infrabony defects in 9 patient were treated by mucoperiosteal flap operation including placement of the e-PTFE membrane. The treated teeth were monitored weekly for the membrane exposure, gingival recession and gingival inflammation. The membranes were retrieved after 4 to 6 weeks, examined by SEM for bacterial contamination and adherent connective tisue elements, and observed under LM for the bacterial penetration into membrane. Three months postsurgery, the defect sites were clinically reexamined for the changes in attachment level and probing depth. Comparison of the ultrastuctural findings and clinical outcome revealed that extent of membrane exposure and bacterial contamination of the membrane was inversely associated with clinical attachment gain. From this finding, the extent of membrane exposure and the bacterial contamination on the apical portion of the e-PTFE membrane at the time of removal seemed to be a critical determinant on the clinical outcome of GTR and the membrane exposure needs to be controlled for optimal results.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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