우렁쉥이 껍질 색소추출물을 astaxanthin 함량으로 환산하여 100ppm, 200ppm 및 400ppm 첨가 한 후 보리새우를 8주간 사육하여 성장도, 착색정도, 지질 및 총 콜레스테롤 함량 그리고 육과 머리의 지방산조성을 조사하였다. 성장율은 대조구(Diet 1)가 가장 낮아 0.610이었고, carophyll pink 첨가구(Diet 2)가 1.065, 껍질 색소추출물 첨가구인 Diet 3(100ppm), Diet 4(200ppm), Diets (400ppm)는 각각 1.227, 1.292, 1.264로 Diet 4 첨가구가 가장 양호하였다. 총카로테노이드 함량은 대조구가 8주 후 육 및 껍질 중 0.176mg, 1.429mg으로 감소하였으나, 색소추출물구인 Diet 4와 5는 각각 2.337mg, 6.331mg으로 가장 우수하였다. Astaxanthin monoester가 free형보다 착색에 더 영향을 미치는 것으로 나타났다. 육 및 머리 중 지질함량도 Diet 4, 5가 8주 후 각각 1632.7mg, 1691.4mg, 1973.5mg, 2071.1mg으로 가장좋았고, 육 및 머리의 콜레스테롤 축적량은 Diet 2가 8주 후 각각 481.5mg, 199.5mg이었으나, Diet 4는 각각 978.2mg, 563.8mg으로 성장에 직접 영향을 미치는 것으로 나타났다. 머리 지질 중 총지질(TL) 및 중성지질(NL)의 지방산조성은 모노엔산의 함량이 높고 고도불포화지방산(PUFA) 함량은 낮았으나, 이와는 반대로 국성지질(PL)은 모노엔산 함량은 낮고 PUFA 함량은 높아 인지질 중 n-3계 고도불포화지방산의 비율이 높게 나타나 색소추출물이 필수지방산 공급원의 역활을 하는 것으로 나타났다.
우렁쉥이 껍질에서 분리한 황산다당을 부분정제하여 몇 가지 화학조성과 전기영동을 하였다. 추출된 황산다당의 화학적 조성은 sulfate, uronic acid, protein, chondroitin sulfate, amino sugar, hexosamine 등으로 이루어져 있었다. 전기영동결과 autoclave 처리에 의해 추출된 조다당류는 폭넓은 단일 band를 나타내었으나, neutrase 처리구는 세 개의 band로 구분되었다. Autocalve 처리구의 분자량은 약 40,000 정도로 추정되며, neutrase 처리구의 경우 고분자 band는 100,000 이상, 두 개의 저분자 band 중 하나는 약 22,000 정도, 또 하나의 band는 약 5,000 정도인 것으로 추정되었다. 이온교환수지 및 겔 여과하여 얻은 전당획분의 화학적 조성은 부분정제 전과 거의 유사하였다. Sephadex G-25로 gel 여과한 시료의 조성당은 arabinose, xylose 및 glucose는 흔적량 정도이었으나 galactose는 $71.4\%$로 대부분을 차지하였고, N-acetylgalactosamine 함량이 $14.5\%$ 정도이었고, D-glucuronic acid가 $6.3\%$ 정도 검출되었다. Sephadex G-100과 G-100-25로 정제한 당의 전기영 동 패턴은 거의 유사하게 단일 band의 양상이나 G-25 처리구가 다소 좁은 band를 나타내었다. 부분정제한 황산다당과 표준품인 chondroitin sulfates의 FT-IR spectrometer 분석 결과, 거의 유사한 결과를 나타내었다. 황산기나 에스테르 등 몇몇 중요한 원자단의 신축 진동수가 IR spectrum의 지문영역 ($500\sim700cm^{-1}$$)에서 나타났다. 황산기 중의 S=O 신축진동이 $1,240cm^{-1}$에서, C-O-S신축진동의 경우 수평향배는 $820cm^{-1}$에서 나타났다.
The anterior brain vesicle of ascidian larvae contains two distinct pigment cells. Ultrastructure of these pigment cells has been shown that the anterior pigment cell is an otolith for perception of gravity and the posterior pigment cell is an ocellus for light reception. The larva has remarkably simple central nervous system (CNS) composed of about 330 cells. We focused to study neural networks of visual systems. In the present paper, we report the whole structure of the photoreceptors of the ascidian larva visualized by an antibody against arrestin. Visual arrestin is the key protein for the termination of phototransduction and one of the abundant proteins in photoreceptors. Recently, we cloned an arrestin homologue gene, Ci-arr and the expression of Ci-arr was found to be restricted to the photoreceptors in the ocellus. To study the whole structure of the photoreceptors in the larva, we prepared an antibody against Ci-Arr. It is found that anti Ci-Arr antibody specifically stains the photoreceptors, including the cell bodies, the axons, and the nerve terminals. The photoreceptor cell bodies lies in row outside the pigment cup which penetrate the pigment cell and is continuous with the outer segments of the photoreceptor cell, inside the concavity of the pigments. The axons form bundle into a single tract. The tract extends toward the midline, where the nerve terminals diverge and seem to form synapses
본 연구는 멍게 껍질을 100.0 % 에탄올 용매로 추출한 후 DMSO로 희석하여 색소안정성을 평가하였다. pH에 따른 흡광도와 색차계 값을 측정한 결과 pH 7.0에서 흡광도와 색도의 ${\pm}a$값이 가장 안정하게 나타났다. pH 3.0에서 흡광도의 감소가 나타났고 색도의 ${\pm}a$값이 감소하여 멍게 껍질 색소는 pH가 중성에 가까울수록 변색방지의 효과가 있을 것으로 판단된다. 항산화제 첨가시 색소의 흡광도가 증가하였으며 ${\alpha}-tocopherol$과 Glutathione이 가장 우수한 효과를 나타내었다.
Early development and metamorphosis of the ascidian (Halocynthia hilgendorfi ritteri) were investigated from fertilized egg. The samples were collected in the coastal waters of Yongdam, northwest of Jeju Island in November 2002. H. hilgendorfi ritteri was solitary ascidian and produced spheral eggs with egg size ranging from $0.33\pm0.01\;mm.$ On the outer surface of the vitelline coat are attached many follicle cells. At $21.0\pm0.5^{\circ}C$ of water temperature, first cleavage took place in about 1.5 hrs after fertilization, and gastrulation followed in about 12.5 hrs. The formation of tailbud embryos and free swimming larvae were observed 13.3 hrs and 20.5 hrs after fertilization, respectively. The size of newly hatched tadpole larva was 1.30-1.45 mm, the larva swam for 2 hrs to 14 hrs. At 4 hrs after hatching, the palpi were lost and tail absorption began with an abrupt rupture of the anterior end of the notochord. At 17-18 hrs after hatching, tail completely absorption and remained trunk. The coniform adhesive papilla began protrusion at 30 hrs after hatching. The oral and atrial siphon formed at 6-7 days after settlement. At 17-18 days after settlement, metamorphosed the larvae developed into protoascidian of which the external morphology was similar to their adult.
우렁쉥이 껍질 및 색소 추출물의 열에 대한 안정성 및 저장 안정성을 조사한 결과는 다음과 같다. 1. 가열시간에 다른 함량변화는 적었으며, $100^{\circ}C$에서 4시간 가열하였을 때 약$10\%$가 분해되는 것으로 나타났다. 2. 용매에 대한 안정성은 함량이 많은 alloxanthin, halocynthiaxathin 등이 가장 높았고, astaxanthin은 hexane에 저장할 때도 저장 안정성이 낮았다. 3. $-20^{\circ}C$ 저장시 가장 안정하여 용매에 의한 영향보다는 온도에 따른 영향이 더 크게 나타나 색소 추출물을 이용할 때는 저온저장이 필수적인 것으로 나타났다.
폐자원인 우렁쉥이 껍질을 이용한 환경친화형 유기농 액비의 개발을 위하여 유용미생물(EM)을 이용한 우렁쉥이 껍질의 최적 발효조건과 액비의 특성을 조사한 결과 다음과 같다. EM발효 우렁쉥이 껍질 액비 제조 시 당밀의 투입량이 증가할수록 pH는 낮아지며, EC는 높아지는 것으로 나타났으며, pH는 당밀이 10% 이상 투입된 시험구에서 일정하게 유지되었다. EM발효 우렁쉥이 액비의 총 질소 함량은 발효가 경과할수록 현저히 증가하였으며, 특히 당밀이 15% 이상 투입된 시험구에서 약 220% 증가율을 나타내었다. 인의 함량은 발효 21일차에서 최고치를 나타내었으며, 칼륨의 함량은 발효가 경과할수록 증가하였다. 칼슘, 마그네슘, 나트륨의 함량 역시 발효가 경과할수록 증가하였고 당밀이 15% 이상 투입된 시험구에서 증가율이 우수한 것으로 나타났으며, 칼슘의 함량이 상대적으로 높은 것으로 나타났다. 유해성분(As, Cd, Cu, Cr, Hg, Ni, pb 및 Zn)의 함량은 시험구 모두에서 비료공정규격 기준치에 적합하였다. 우렁쉥이 껍질 액비의 유리아미노산은 총 29종이 검출되었으며 총량은 7,080.94 mg/L를 나타내었고 알라닌이 656.32 mg/L로 가장 높은 함량을 나타내었다. 이상의 결과를 미루어 볼 때 우렁쉥이 껍질을 이용한 액비화에는 당밀이 15% 이상 투입된 조건이 최적인 것으로 판단된다.
Polyphenol oxidase(PPO) isolated from the crude extract of ascidian, Halocynthia roretzi, showed higher affinity for catechol than tyrosine or DL-DOPA. Successful enzyme assay could be performed at $25^{\circ}C$, 10min. by mixing 0.2ml of crude enzyme extract with 2.8ml of 0.13M catechol in 0.1M sodium phosphate buffer(pH 6.4). The specific activity of PPO which had been purified with a combination of ammonium sulfate treatment, ion exchange chromatography on DEAE-cellulose, and gel filtration on Sepharose 6B was 13-fold disc gel electrophoresis. The activity of PPO was stable from pH 5.0 to 8.0 and showed the peak activity at pH 6.4 .The optimum reaction temperature for PPO oxidation on catechol was 35$^{\circ}C$ and those enzyme were heat stable up to 4$0^{\circ}C$. Molecular weigth of the enzyme was estimated about 170kDa. One molecule was found to be composed of gour subunits. Two of them had molecular weigh of 55kDa and the others 30kDa. The {TEX}$K_{m}${/TEX} values, {TEX}$V_{max}${/TEX} and catalytic efficiency({TEX}$V_{max}${/TEX}/{TEX}$K_{m}${/TEX}) for catechol were 0.12mM, 2.5mM/liter/min. and {TEX}$0.18min^{-1}${/TEX} respectively. The substrate affinity and electrophorectic pattern suggested that the enzyme of ascidian was considered to be not tyosine but catechol oxidase.
Effects of muscle fluid concentrates from Styela clava on fish diets were investigated in rainbow trout(Oncorhynchus mykiss). Fish were fed on one of the isonitrogenous(48%) and isolipic(20%) feed containing 5 to 20% of muscle fluid concentrates for 8 weeks. Hematological parameters such as hemoglobin, hematocrit, albumin, glucose, total bililubin, triglyceride and glutamic pyruvate transaminase of the rainbow trout which were fed on the diets varied, but no specific trend became apparent. However, glutamic oxaloacetic transaminase value was significantly higher than that of normal fishes. Therefore, concentrated ascidian fluid which is normally discarded, can be combined with commercial diets for the normal growth of rainbow trout.
Astaxanthin is a valuable pigment source for many aquacultured species, including salmonoids, shrimp, sea bream, and ornamental species. Conjugated linoleic acid (CLA) and ascidian tunic extracts were mixed with the basal diet of rainbow trout to investigate their pigmentation effects. Synthetic Carophyll Pink and natural carotenoids that came from the tunic extracts were incorporated into muscle and skin tissues. The main carotenoids found in muscle after 8 weeks were canthaxanthin in CP12 (13.4%), and CP52 (17.2%), and astaxanthin in CP12 (58.5%), and CP52 (59.2%) in the Carophyll Pink group, while those in skin were canthaxanthin in CP14 (34.5%), and CP54 (29.2%), and astaxanthin in CP14 (32.0%), and CP54 (36.5%) in the ascidian tunic extract group. The total carotenoid content in skin (53.0-69.3 mg/kg) was greater than that in muscle (9.5-13.8 mg/kg).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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