Histology and ultrastructure of the gill in the granular ark, Tegillarca granosa are described using light and transmission electron microscopy. The gill of the clam have typical structure of the filibranch type. The gill filament have several band of lateral and apical cilia. The epithelial layer surrounding the hemolymph sinus is simple and consists of epithelial cells, ciliated cells and secretory cells. The epithelial cells are usually squamous and covered with microvilli. The ciliated cells are usually columnar and can be divided into two types (A and B). Type A cells are more abundance and have lower electron density than B cells. Ultrastructure of the cilia showed that '9+2' microtubular structure of the axial filament and '$2{\times}9$' proximal centriole structure in the cross section. Secretory cells are mainly observed in the apical region of the filament and can be divided into three types of A, B and C with morphological features of the secretory granules. Type A cells of oval shaped are more abundance than other secretory cells and contains numerous secretory granules of low electron dense. Type B cells contains secretory granules of membrane-bounded and high electron dense. Secretory granules of type C cells are elliptical and fine granules surrounding the homogeneous core materials.
Kang Won, Park;Hyeon, Yang;Min Gook, Lee;Sun A, Ock;Hayeon, Wi;Poongyeon, Lee;In-Sul, Hwang;Jae Gyu, Yoo;Choon-Keun, Park;Bo Ram, Lee
Journal of Animal Science and Technology
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v.64
no.6
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pp.1105-1116
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2022
Recently, we reported the robust in vitro three-dimensional (3D) expansion of intestinal organoids derived from adult bovine (> 24 months) samples. The present study aimed to establish an in vitro 3D system for the cultivation of intestinal organoids derived from growing cattle (12 months old) for practical use as a potential alternative to in vivo systems for various purposes. However, very few studies on the functional characterization and 3D expansion of adult stem cells from livestock species compared to those from other species are available. In this study, intestinal crypts, including intestinal stem cells, from the small intestines (ileum and jejunum) of growing cattle were isolated and long-term 3D cultures were successfully established using a scaffold-based method. Furthermore, we generated an apical-out intestinal organoid derived from growing cattle. Interestingly, intestinal organoids derived from the ileum, but not the jejunum, could be expanded without losing the ability to recapitulate crypts, and these organoids specifically expressed several specific markers of intestinal stem cells and the intestinal epithelium. Furthermore, these organoids exhibited key functionality with regard to high permeability for compounds up to 4 kDa in size (e.g., fluorescein isothiocyanate [FITC]-dextran), indicating that apical-out intestinal organoids are better than other models. Collectively, these results indicate the establishment of growing cattle-derived intestinal organoids and subsequent generation of apical-out intestinal organoids. These organoids may be valuable tools and potential alternatives to in vivo systems for examining host-pathogen interactions involving epithelial cells, such as enteric virus infection and nutrient absorption, and may be used for various purposes.
The morphological effects of intranasal zinc sulfate(5% solution) irrigation on the mouse olfactory epithelium and the regeneration process of olfactory receptor cells following nasal irrigation were studied with scanning and transmission electron microscope. The results were as follows: 1. The septal epithelium except some basal cells was wholly detached from the basement membrane, during the first 6 to 24 hours after 5% zinc sulfate irrigation. 2. 3 days after $ZnSO_4$ treatment, two layered septal epithelium was formed from basal cells. And microvilli were observed in the apical epithelium of newly formed olfactory epithelial cells. 3. 5 days after treatment, a lot of centrosomes and basal bodies were observed in the olfactory receptor cells, and cilia were lined up between microvilli on the apical membrane of olfactory receptor cells. And immature olfactory knob was first observed in the newly formed olfactory receptor cells. Mature olfactory knob was observed 1 week after treatment. 4. There are very many mature olfactory knobs in the olfactory receptor cells 2 weeks after intranasal zinc sulfate irrigation. These results support that treatment with 5% zinc sulfate is a good experimental model for the regeneration of mammalian nervous tissues because this method could thoroughly detach the septal epithelium. During the regeneration of olfactory receptor cells, the surface membrane of the olfactory receptor cells widen the surface with the microvilli. Then cilia, which arranged in a line, substituted for the microvilli. The part of the surface membrane with cilia protruded and finally formed the olfactory vesicle.
The epithelium of the hindgut in the german cockroach, Blattella germanica Linne, was observed with electron microscope. The epithelium of the ileum, which is located at the anterior hindgut, is composed of a single layer of squamous and cuboidal cells. The liminal surface of the epithelium is lined with the cuticular intima. The epithelial cells contain cell organelles expected to be found in absorptive cells, and some epithelial cells have numerous lamelated crystals, the "spherites". The rectal epithelium of posterior hindgut is composed of rectal pads which are covered with cuticular intima on the luminal side. The rectal pads are composed of columnar absorptive cells and basal cells. The apical plasma membrane of columnar cell is made of microvilli, where mitochondria associated with some of the microvilli. The lateral plasma membrane is highly infolded and space is an uniform width of approximately 200$\\AA$. Well developed mitochondria are found closely associated with the infoldings and this is referred to as the "mitochondrial-scalariform complex". A septate junction is found near the apical zone between the columnar absorptive cells, whereas many desmosomes and intercellular spaces are formed between the columnar cells. Basal cells are bowl-shaped where the convex surface is inlaid into the basal surface of the columnar cells while the concave surface faces the basal lamina. The cytoplasm of the basal cell is electron dense and contains well developed cell organelles. The basal sheath is located between the basal membrane and basal lamina, providing barrier between the epithelium and the hemolymph. The epithelium is surrounded by the subepithelial space and muscles. The subepithelial space, which is composed of fibrous connective tissue, is innervated by many tracheoles and axons.
The vegetative and male reproductive anatomy of a marine alga, Laurencia intercalaris sp. nov. (Rhodomelaceae, Rhodophyta), is described from subtidal habitats of eastern and southern Korea. This species has terete thalli with entangled fibrous holdfasts and regularly alternate branching of ultimate branchlets, and is inseparable from L. okamurae Yamada on the basis of habit. Vegetative axial cells produce a trichoblast and four pericentral cells in an alternating sequence. Spermatangia are produced intercalary or subterminally from one of two laterals on suprabasal cells of trichoblasts arising from axial cells in apical pits of branchlets. The other lateral remains sterile. In this sterile lateral, budding-like regeneration occurs on older segments that are oabscised. Comparison is made with other related Laurencia species, particularly those with terete thalli. The vegetative anatomy and the regeneration in sterile laterals of male trichoblasts, with the mode of spermatangial formation, distinguish the new species from previously described species of Laurencia including L. okamurae.
In this study, we intended to get a preliminary data for establishing rat tracheal surface epithelial(RTSE) cell culture system as an experimental model for physiology and pharmacology of tracheal epithelial cells. Primary culture on the membrane support and application of the air-liquid interface system at the level of cell layer were performed. The cell growth rate and mucin production rate were measured according to the days in culture. The results were as follows: this culture system was found to manifest mucocilliary differentiation of rat tracheal epithelial cells, the cells were confluent and the quantity of produced and released mucin was highest on culture day 9, the mucin was mainly released to the apical side and tbe free $^3{H}$-glucosamine which was not incorporated to process of synthesis of mucin was left on the basolateral side. Taken together, we suggest that air-liquid interface culture system can be used as a substitute for immersion culture system and as an experimental model for in vivo mucus-hypersecretory diseases.
The portion of Cuscuta japonica haustorium which lies internal to the host tissues, the endophyte, was examined at the ultrastructural level. The endophyte consisted of mainly small parenchymatous cells and large, slightly elongate cells at the tip. The tip cells were characterized by the presence of large and lobed nucleus, several small vacuoles, dense cytoplasm, abundant rough endoplasmic reticulum, dictyosomes, and mitochondria, and thus suggested to have a high metabolic activity. The shape, arrangement, and cytological characteristics of the parenchymatous and tip cells consisting the endophyte were very similar to those of the dividing cells and idioblasts, respectively, which appeared in the endophyte primordium of the upper haustorium. The tip cells with the thickened-apical wall were observed to grow intrusively through the host cell walls and to engulf the remnants of the degenerated host cells. In the former case intrusive growing cell was regarded to develop into the filamentous cell, the hypha. Plasmodesmata through the cell wall were not observed between host and parasite cells. Some host cells that in contact with the penetrating tip cells of the endophyte, showed the degenerating features such as a loss of cytoplasm, a beaded fashion of small vesicles, and deformation of chloroplasts.
Various conditions of cultures were performed to investigate the role of tight junctions formed between adjacent MDCK cells on the entry of Toxoplasma. When MDCK cells were cocultured with excess number of Toxoplasma at the seeding density of 1×105, 3×105, and 5×105 cells/ml for 4 days, the number of intracellular parasites decreased rapidly as the host cells reached saturation density, i.e., the formation of tight junctions. When the concentration of calcium in the media (1.8 mM in general) was shifted to $5{\mu}M$ that resulted in the elimination of tight junction, the penetration of Toxoplasma increased about 2-fold(p<0.05) in the saturated culture, while that of non-saturated culture decreased by half. Trypsin-EDTA which was treated to conquer the tight junctions of saturated culture favored the entry of Toxoplasma about 2.5-fold(P<0.05) compared to the non-treated, while that of non- saturated culture decreased to about one fifth. It was suggested that the tight junctions of epithelial cells play a role as a barrier for the entry of Toxoplasma and Toxoplasma penetrate into hoot cells through membrane structure-specific, i.e., certain kind of receptors present on the basolateral rather than apical surface of MDCK cells.
In order to observe the anticellulolytic localization in the epithelia of the digestive tract such as esophagus, crop, and intestine of a Korean land snail N. samarangae, a cytochemical method and a immunogold labelling method were applied. For the cytochemical study on the cellulase activity, Benedict reaction method applied. And for the immunocytochemical study, the rabbit serum immunoglobuins (IgG) was obtained from the rabbits injected with cellulase which was extracted from body fluid of the snail. The digestive tract tissues of N. samarangae were fixed with 4% paraformaldehyde and 2% OsO4 and embedded in Lowicryl K4M at -40$^{\circ}C$ under UV light (360 nm). The thin sections were loaded on the nickel grids and stained with the serum IgG and protein A-gold complex (particle size: 10 nm). Observations were undertaken with transmission electron microscope (Jeol, JEM-1010). The epithelium of the digestive tract was consisted of five types of cells. In the cytochemical study, the reaction products were found along the periphery of the vacuoles derived from the Bebedict reaction. In the immunocytochemical study, the protein-A gold particles were selectively labelled in Type 1, Type 3 and Type 4 cells in intestinal tissue. membranes of rER, in the surrounding cytoplasm of the rER and secretory granules, and in the apical cytoplasm of the cells. On the material being secreted from the apical cytoplasm was also labelled with the immunogold particles. The all results obtained throughtout present study suggest that the intestinal epithelium of the snail N. samarangae seretes cellulase as one of digestive enzymes.
Enterococcus faecalis, a gram-positive bacterium, has been implicated in endodontic infections, particularly in chronic apical periodontitis. Proinflammatory cytokines, including tumor necrosis factor-$\alpha$ (TNF-$\alpha$), are involved in the pathogenesis of these apical lesions. E. faecalis has been reported to stimulate macrophages to produce TNF-$\alpha$. The present study investigated the mechanisms involved in TNF-$\alpha$ production by a murine macrophage cell line, RAW 264.7 in response to exposure to E. faecalis. Both live and heat-killed E. faecalis induced high levels of gene expression and protein release of TNF-$\alpha$. Treatment of RAW 264.7 cells with cytochalasin D, an inhibitor of endocytosis, prevented the mRNA up-regulation of TNF-$\alpha$ by E. faecalis. In addition, antioxidant treatment reduced TNF-$\alpha$ production to baseline levels. Inhibition of extracellular signal-regulated kinase (ERK) and p38 mitogen-activated protein (MAP) kinase also significantly attenuated E. faecalis-induced TNF-$\alpha$ expression by RAW 264.7 cells. Furthermore, activation of NF-${\kappa}B$ and AP-1 in RAW 264.7 cells was also stimulated by E. faecalis. These results suggest that the phagocytic uptake of bacteria is necessary for the induction of TNF-$\alpha$ in E. faecalis-stimulated macrophages, and that the underlying intracellular signaling pathways involve reactive oxygen species, ERK, p38 MAP kinase, NF-${\kappa}B$, and AP-1.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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