한국환경성돌연변이발암원학회 2002년도 Molecular and Cellular Response to Toxic Substances
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pp.80-88
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2002
Recent studies demonstrate that collagen IV selectively pro-motes the repair of physiological processes in sublethally injured renal proximal tubular ceils (RPTC). We sought to further define the mechanisms of cell repair by measuring the effects of toxicant injury and stimulation of repair by L-ascorbic acid-2-phosphate (AscP), exogenous collagen IV, or function-stimulating integrin antibodies on the expression and subcellular localization of collagen-binding integrins (CBI) in RPTC. Expression of CBI subunits ${\alpha}_1$, ${\alpha}_2$, and ${\beta}_1$ in RPTC was not altered on day 1 after sublethal injury by S-(1,2-dichlorovinyl)-L-cysteine (DCVC). On day 6, expression of ${\alpha}_1$ and ${\beta}_1$ subunits remained unchanged, whereas a 2.2-fold increase in ${\alpha}_2$ expression was evident in injured RPTC. CBI localization in control RPTC was limited exclusively to the basal membrane. On day 1 after injury, RPTC exhibited a marked inhibition of active $Na^+$ transport and a loss of cell polarity characterized by a decrease in basal CBI localization and the appearance of CBI on the apical membrane. On day 6 after injury, RPTC still exhibited marked inhibition of active $Na^+$ transport and localization of CBI to the apical membrane. However, DCVC-injured RPTC cultured in pharmacological concentrations of AscP (500 ${\mu}$M)or exogenous collagen IV (50 ${\mu}$g/ml) exhibited an increase inactive $Na^+$ transport, relocalization of CBI to the basal membrane, and the disappearance of CBI from the apical membrane on day 6. Function-stimulating antibodies to CBI ${\beta}_1$ did not promote basal relocalization of CBI despite stimulating the repair of $Na^+$/$K^+$-ATPase activity on day 6 after injury. These data demonstrate that DCVC disrupts integrin localization and that physiological repair stimulated by AscP or collagen IV is associated with the basal relocalization of CBI in DCVC-injured RPTC. These data also suggest that CBI-mediated repair of physiological functions may occur independently of integrin relocalization.
피조개의 외투막은 바깥 상피층, 결합조직층 그리고 안쪽 상피층으로 구성되어 있다. 상피층은 단층으로 지지세포, 섬모세포 및 분비세포들로 구성되며, 결합조직층은 주로 교원섬유와 근섬유로 이루어져 있다. 안쪽 상피층의 지지세포들은 원주형으로 자유면은 미세융모로 덮여있다. 섬모세포들은 자유면에 섬모와 미세융모를 가지며, 이들 세포의 세포질 상부에서는 다수의 관상 미토콘드리아들이 관찰된다. 분비세포들은 주로 바깥 상피층에서 관찰되며, 분비과립의 형태학적 특징에 따라 A, B, C, D 네 종류로 구분할 수 있다. A형 분비세포들은 점액세포들로서 가장자리와 중앙부의 외투막에서 주로 관찰되며, 이들 세포의 분비과립은 전자밀도가 낮고 막을 가지지 않는다. B형 분비세포들은 발달된 다수의 조면소포체와 골지체 그리고 전자밀도가 높고 막을 가진 분비과립들을 함유한다. C형 분비세포들의 분비과립은 섬유성분의 중심부와 균질성의 주변부로 구분된다. D형 분비세포들은 주로 중앙부와 각정부 외투막의 바깥 상피층에서 관찰되며, 이들 세포의 분비과립은 균질성의 중심부와 과립상의 주변부로 구분된다. 이와 같은 결과들은 피조개 외투막의 바깥 상피층은 패각형성에 관여하며, 안쪽 상피층은 외투강 정화에 관여함을 의미한다.
두꺼비 등 피부손상 후 과립선의 재생과정을 주사전자현미경과 투과전자현미경으로 관찰하였다. 절개에 의하여 피부손상을 가한 후 실험을 위하여 특수히 제작된 cage 내에서 최대 20일간 사육하였다. 투과전자현미경 관찰에서 손상 4일 후 미성숙 형태의 신생 과립선이 관찰되었으며, 상피세포는 신생 과립선의 첨단부로 이동하여 있었다. 상피세포의 표면은 편평하였으며 desmosome 에 의해 서로 연결되어 있지 않았다. 미토콘드리아를 많이 함유한 세포돌기 (MRC)들이 선의 내강을 형성하고 있었고, 이들 돌기에서는 hemidesmosome이 관찰되었다. 신생선의 기저강은 MRC, 과립형성전세포 및 과립형성 세포 등으로 이루어져 있었다. 특히, 손상 후 10일에 xanthophore가 상피세포의 기저부로 이동하여 있음이 관찰되었다. 이들 세포는 다수의 크기가 큰 pterinosome 과 중등도의 전자밀도를 가진 carotenoid vesicle을 포함하고 있었다. 손상 후 13일에, xanthophore는 많은 carotinoid vesicle과 lammelated pterinosomes을 포함하고 있었다. Iridophore는 손상 16일에 분화중인 xanthophore 주변에서 관찰되었다. 이러한 소견은 손상으로부터의 회복 과정에 선조세포(glandular precursor cell)로부터 과립선이 재생되며, 선세포의 팽대는 이들 신생 세포의 성숙 및 증식에 의한 것을 의미한다.
Surface epithelial cells isolated from hamster tracheas and grown on a thick collagen gel become a highly enriched population of mucus-secreting cells. Epithelial cells from tracheas of hamsters were collected using enzymatic procedures and cultured under various conditions. The medium used consisted of a 1:1 mixture of medium 199 and Dulbecco's modified Eagle's (DME) medium which was conditioned before use. Insulin, transferrin, hydrocortisone, epidermal growth factor, and extract from bovine hypothalamus were used as supplement. Due to relatively low basal rates of min secretion from in vitro cultures, cultures are generally radiolabeled using $^3$H-glucosamine as a metabolic precursor. The radiolabeled mucinsreleased are quantitated by precipitation with TCA/PTA. Using this cell culture system, we investigated mucin release of goblet cells by altering the media bathing the apical surface of hamster tracheal surface epithelial(HTSE) cells. Acidic media added sulfuric acid caused sigcificant increases in mucin relesse (155${\pm}$20% at pH 4 and 146${\pm}$16% at, pH 5). Ammonium hydroxide also increased mucin release at pH 9.0(156${\pm}$17%) and pH 10(295${\pm}$9%) respectively. This additional mucin release seems to be associated with cell membrane damage as indicated by release of cellular LDH. SP stimulates secretion of mucin in cultured HTSE cells(154${\pm}$16% at 1${\times}$10$\^$-6/M and 165${\pm}$25% at 1${\times}$10$\^$-5/M. PAF at 5${\times}$10$\^$-6/M and 5${\times}$10$\^$-5/M enhanced by HTSE cells in vitro 168${\pm}$34% and 259${\pm}$30% of mucin secretion, respectively. The increase in mucin release by PAF and SP was not secondary to cell damage or necrosis. SP and PAF may be in mediating mucous secretion induced by inflammation irritantion and infection.
Background and Objectives : Sulfur dioxide gas is one of the major airborne Pollutants noxious to human in industrialized countries. The most vulnerable areas in the human respiratory system were the trachea and main bronchi and a gradient of decreasing damage was observed in the peripheral tracheobronchial tree. Induced functional alteration was increased mucosal permeability, and morphological changes were epithelial sloughing, intracellular edema, mitochondrial swelling, widened intercellular spaces, and ciliary cytoplamic extrusions. The laminins are a family of extracellular matrix glycoproteins localized in the basement membrane. Their primary role is cell-matrix attachment, but many additional biologic activities, including Promoting cell growth and migration, tumor growth and metastasis, wound repair, and graft survival, have been demonstrated. Materials and Methods : Histologic changes and expression of laminin in tracheal mucosa sacrificed at 1 day, 2 day, 3 day, 1 week, 2 weeks, and 3 weeks after continued SO2 exposure of 250 ppm for 30 minutes a day(to 7week) were studied in rats. In this study, mild immune reaction for laminin was noted at the apical cytoplasm of epithelial cells and basement membrane one day after a 7 week $SO_2$ exposure. The cilia and nucleoi of epithelial cells were normal and no immune reaction was noted in Goblet cells. The lamina propria of the tracheal tissue was infiltrated by monocytes and lymphocytes. Results : At 24 hours after exposure, all tracheal cells except Goblet cells revealed a mild immune reaction for laminin. No immune reactions were noted in the basement membrane. At 72 hours after exposure, mild or moderate immune reactions for laminin was seen in the tracheal cell cytoplasm. Irregular faint immune reaction for laminin was noted in the basement membrane. At 1 week after exposure, strong immune reaction for laminin was detected over all tracheal cells, and the basement membrane was seen clearly. At 2~3 weeks after exposure, strong immune reaction for laminin was seen in all tracheal epithelial cells except Goblet cells and a mild immune reaction was partly revealed in the basement membrane. Conclusion : Our study suggests that 502 produces histologic damage on the tracheal mucosa. Longer duration after exposure of $SO_2$ makes more progressive healing on the tracheal mucosa and increased immunoreactivity for laminin.
Intercellular interactions are important for the proper development and regulation of tissue function. This is especially necessary in the epididymis, a part of male reproductive tract where sperm become mature and acquire their fertilizing capacity. The caput region of the epididymis consists of several types of cells, including principal, basal, and apical cells. Direct intercellular communication is thus required to precisely regulate the functions of the caput epididymis. In this regard, connexin (Cx) is a molecule that forms channels, which allow the direct exchange of small molecules between cells, enabling intercellular communication. In this study, the expression of Cx isoforms in the caput epididymis at different postnatal ages was determined by using quantitative real-time polymerase chain reaction analysis. Nine of 13 Cx isoforms were detected. The transcript levels of Cx30.3, 31, 31.1, 32, and 40 were highest at 45 days of age, while the expression of Cx43 and 45 gradually decreased with age. A substantial fluctuation of Cx26 expression was detected, with significant decreases before and during puberty, followed by a transient increase at adult-hood and rapid decreases at an old age. A significant increase in Cx37 transcript was observed at 25 days of age, followed by gradual decreases at adult and old ages. These results indicate the significant differential expression of various Cx isoforms in the caput epididymis during postnatal development. It further suggests that the functional regulation and developmental maturation of the caput epididymis are highly related to the postnatal age-related differential expression of Cx isoforms.
In order to investigate the morphological characteristics of epididymal duct of the squirrel, the histological and histochemical studies were carried out. The results obtained were summarized as follows: The epididymal duct can be divided into 9 segments by histological and histochemical features. Segments 1 to 5 were located in the head, segments 6 and 7 in the body, and segments 8 and 9 in the tail of the epididymis. The apical cells were numerous in the segment 1. Clear cells which has a compact, deeply staining nucleus and a characteristically clear cytoplasm were scattered in the epithelium throughout the duct. Interepithelial clear cells which had PAS-positive granules tended to increase in number caudally. Strong PAS-positive reaction was detected at the intralumen of the segments 3,8 and 9. Acid phosphatase activity was relatively high in the basal cytoplasm of the segment 7, and then in the supranuclear region of the segments 8 and 9. Alkaline phosphatase activity was weakly positive or negative except the segments 3 and 4. ATPase activity was strong in the free surface of the epithelium in the head and the entire cytoplasm in the body and tail, a,nd SDH activity was generally weak except for the body where it was more intense.
The cell permeability and cytotoxic effects of different-sized zinc oxide (ZnO) particles were investigated using a human colorectal adenocarcinoma cell line called Caco-2. Morphological observation by scanning electron microscopy revealed that three zinc oxides with different mean particle sizes (ZnO-1, 20 nm; ZnO-2, 90~200 nm; ZnO-3, $1\sim5\;{\mu}m$) tended to aggregate, particularly in the case of ZnO-1. When cytotoxicities of all three sizes of zinc oxide particles were measured at concentration ranges of $1\sim1000\;{\mu}g$/mL, significant decreases in cell viability were observed at concentrations of $50\;{\mu}g$/mL and higher. Among the three zinc oxides, ZnO-1 showed the lowest viability at $50\;{\mu}g$/mL in Caco-2 cells, followed by ZnO-2 and ZnO-3. The permeate concentration of ZnO-1 from the apical to the basolateral side in the Caco-2 model system after four hours was about three-fold higher than that of either ZnO-2 or ZnO-3. These results demonstrated that ZnO-1, with a 20 nm mean particle size, had poorer viability and better permeability in Caco-2 cells than ZnO-2 and ZnO-3.
Yoo Jong Su;Fukuyo Yasuwo;Cheun Byeungsoo;Lee Sam Geun;Kim Hak Gyoon
Fisheries and Aquatic Sciences
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제3권1호
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pp.26-32
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2000
Monospecific red tide by a toxic dinoflagellate belonging to the genus Alexandrium occurred at Chindong Bay in the southern coast of Korea and continued from April 6th to 15th in 1997. The ratio of its cell number to total phytoplankton cell number was much higher than $95\%$. This organism was identified as Alexandrium tamarense, although slight morphological differences were found comparing to the original and successive descriptions of the species. We found neither anterior nor posterior attachment pores in these cells of the bloom population. The occurrence of red tide caused by A. tamarense was first reported in Korea. Its plate formula is Po, Pc, 4', 6"c, 8s, 5"' and 2"". Thecal plates are thin with pore-like ornamentation. In those plates, the anterior part of the first apical plate (1') is narrower and its posterior end has sometimes a block-like accessory, but this variation was considered within the range of the morphological variability of this taxon. The cell density during the red tide exhibited a wide range of variation by the depth of water column, ranging from $2\times10^6$ cells$l^{-1}$ to $5\times10^6$ cells·$l^{-1}$. Water temperature varied from 11.8 to $12.3^{\circ}C$. Toxicity of A. tamarense during red tide was measured as $8.8\times10^5$. $MU\;\cdot\;cell^{-1}$ by mouse bioassay.
Purpose: Sudoriferous cyst usually occurs on the face, and especially on the ear and scalp as a solitary cystic mass. It is derived from the sweat glands of Moll and results from the obstruction of excretory ducts with the retention of fluid. In the eyelid, it is usually seen as small and firm vesicle arising at the eyelid margin. If it rarely occurs on the orbit, it develops from orbital ectopic epithelial cells predetermined to form glands of Moll. We experienced a case of sudoriferous cyst on eyelid which was adhered to levator aponeurosis and it disappeared when patient closed eyes. Methods: A 55-year-old women suffered palpable mass on left upper eyelid without pain that had been present for 25 years. Orbital computed tomographic finding showed a oval mass($2.1{\times}0.6{\times}0.6cm$ size) inside upper eyelid and it invaded the orbit. The mass was completely excised under general anesthesia and histopathological examination was followed. Results: Cystic mass was purple color and it was located in superiorly to tarsal plate. The mass was adhered to levator aponeurosis and levator palpabrae superioris muscle between the fat layer of post-orbital septum and the Whitnall ligament. The mass was completely excised without injury of aponeurosis and muscle. Microscopically, the lesion was a solitary cyst lined by two layers of cuboidal epithelial cells and innermost cells displaying eosinophilic cytoplasm with apical expansions. Conclusion: Sudoriferous cyst usually occurs on eyelid margin. But in this case, cystic mass occurred on upper eyelid and disappeared when patient closed the eyes because it was partially adhered to levator aponeurosis and levator palpebrae superioris muscle. Therefore, if sudoriferous cyst occurs on eyelid, it is necessary to excised the mass carefully.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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