Purpose: The purpose of this study is to investigate antimicrobial activity of ally derivative of garlic against eye diseases, and to get basic data for an application development of the derivative, as a natural preservative, to multi-purpose solution (MPS). Methods: Antimicrobial activity of allyl derivative of garlic, diallyl sulfide (DAS), against Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) and Staphyloccus aereus (S. aereus) was determined. After DAS treatment in MPS of no microbial activity, its growth inhibition effect to bacteria was also determined. Results: DAS concentrations of $IC_{50}$ against P. aeruginosa and S. aereus were found when both bacteria were treated with DAS concentration of 0.25% and 0.64%, respectively. At MPS test, a product from Company A did not show any effects against both bacteria, but one from Company B showed antimicrobial activity against both bacteria. Antimicrobial activity test of the product from Company B in MPS did not showed any significant difference on both gram-negative and gram-positive bacteria. For a trial application of antimicrobial activity of DAS as a natural preservative, DAS was added to MPS of Company A which did not show any antimicrobial activity at treated concentration. Addition of DAS into MPS of Company A resulted in antimicrobial activity of DAS, which suggested a possible application of DAS as a germicide for contact lenses. Conclusions: This study showed allyl derivative of garlic has antimicrobial activity against both P. aeruginosa and against S. aereus, but more effects on P. aeruginosa. The result suggests that allyl derivative derived from garlic can be developed to a preservative of MPS as a natural substance.
We isolated microorganism secreting antimicrobial substance from tomato and identified as Enterococcus faecium. This substance was completely inactivated by pretense treatment and retained activity after catalase treatment. This result indicated that the antimicrobial activity of this substance was due to proteinaceous substance known as bacteriocin. The bacteriocin inhibited growth of Gram positive bacteria, such as Listeria monocytogenes, Leuconostoc mesenteroides, Lactobacillus plantarum, Streptococcus agalactiae, Streptococcus pyrogenes, and Gram negative bacteria, such as Pseudomonas aeruginosa. Purification of the bacteriocin was achieved by ethanol precipitation, ion exchange chromatography on CM Sepharose CL-6B, and gel filtration on Sephacryl S-100 HR. After these purification steps, the specific activity of the bacteriocin was increased 35.8 fold compared with culture broth. Purified bacteriocin was shown single band on SDS-PAGE and molecular weight was estimated 51 kDa. The residual activity of this bacteriocin was 3.3% at 10$0^{\circ}C$ for 60 min, and this bacteriocin was stable at pH 2~7.
The antimicrobial substance produced by Pseudomonas aeruginosa KLP-2 strain was purified and identified. The substance was identified as a pyocyanine by the fast atom bombardment mass(FAB-MS). In physic-chemical properties, the pyocyanine was dark blue needles, and was soluble in various organic solvents such as chlorogorm, methanol, ethanol and ethyl acetae. The pyocyanine possessed a ultraviolet absorbance spectrum in methanol, 0.1 M HCl, and chlorogorm. The maximum absorption peak of the pyocyanine showed at 318 mm in methanol. The molecular formula of the pyocyanine was determined to the $C_{13}$ H$_{10}$ N$_{2}$O and protonate molecular ion species (M+H)$^{+}$ was observed at m/z 211 by FAB-MS. The pyocyanine showed antimicrobial against Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Micrococcus luteus, Rodococcus equi, Staphylococcus aureus, Streptococcus faecalis, E. col, Legionella pneumophila, Shigella flexneri Shigella boydii, shgella sonnei, NAG Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus, Vibro vulnificus, Yersinia enterocolitica, and Saccharomyces cerevisiae. However, Salmonella spp. Shigela dysenteriae, 3 strains of Pseudomonas aeruginosa, Klebsiela pneumoniae, and Aspergillus niger were resistant to the pyocyanine. The pyocyanine showed the highest antimicrobial activity aganist Legionella pneumophila based on the size of inhibition zone by the disk contained 0.5 $\mu\textrm{g}$ of the pyocyanine.e.
In order to develop antimicrobial substances, many kinds of medicinal herbs were extracted with absolute ethanol and then antimicrobial activities against various microorganisms were investigated. Ethanol extract from cinnamon bark showed the strongest antimicrobial activity on the growth of almost all submitted microorganisms. Specially, molds such as Aspergillus sp. and Pencillium sp. were inhibited strongly. Therefore, the crude antimicrobial substance from the ethanol extract was fractionated with various solvents such as n-hexane, chloroform, ethyl acetate, and n-butyl alcohol and then their antimicrobial activities were tested. Among the various solvent fractions from the ethanol extract, n-hexane fraction was the best in antimicrobial activity especially against molds. There were no significant changes in antimicrobial activity of the n-hexane fraction by heat treatment at $100^{\circ}C$ for 60 min or $121^{\circ}C$ for 15 min and by the change of pH 4.0~10.0. We could get the results that the n-hexane fraction of cinnamon bark extract showed not only antimutagenicity but also no mutagenicity by Ames test with Salmonella typhimurium TA 98 and TA 100.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.20
no.5
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pp.102-108
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2019
Melaleuca alternifolia contains terpineol-4, cineol, sesquiterpenes etc., and has a germicidal effect and skin moisturizing effect. It also has the characteristics of relieving acne inflammation, treating dandruff, relieving pain, and relieving depression. In this study, an antimicrobial substance extracted from tea tree using an organic solvent (methanol, dichloromethane, ethyl acetate) and hydrothermal extraction method. And confirmed the antimicrobial activity of each extract. In order to verify the antimicrobial activity, nine pathogenic bacteria (Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Listeria monocytogenes, Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Pseudomonas aeruginosa and Vibrio parahaemolyticus) were used. The antimicrobial activity of each extracts were confirmed by the commonly used disc diffusion method. The results showed that the fraction extracts of ethyl acetate and methanol had antimicrobial effects against V. parahaemolyticus and S. aureus. Using these results, we confirmed the antimicrobial activity of each fraction extracts and hot water extracts against V. parahaemolyticus. After the treat of samples, we confirmed at over 99.9 % of antimicrobial activity. In case of antifungal activities, we confirmed of preservation effect during over 45 hours. Based on the results of this research, further studies will be conducted to confirm the possibility of development as a new antimicrobial agent.
To develop a lactic starter to produce antimicrobial substance for inhibiting the growth of a variety of foodborne spoilage bacteria in fermented foods, we investigated the anti-bacterial effect of the antibacterial substance, produced by Lactobacillus amylovorus IMC-1, against foodborne spoilage strains, and its sensitivity on the treatment of proteolytic enzymes. L. amylovorus IMC-1, which was isolated from a traditional cheese in Inner Mongolia, produced a maximum amount of antibacterial substance in the skim milk medium after 72 h incubation at 37$^{\circ}C$, and further incubation resulted in the same activity. The substance obtained from gel filtration inhibited all strains used such as Bacillus subtilis IFO 3025, Staphylococcus aureus IAM 1011, Listeria monocytogenes VTU 206, Escherichia coli RB, and Pseudomonas fragi IFO 3458 at the concentration of 20 units/ml. This substance was found to show bactericidal action against B. subtilis, E. coli, and Ps. fragi, and bacteriostatic activity against both Staph. aureus and L. monocytogenes. The bactericidal action was due to cellular Iysis. The substance is not organic acid, hydrogen peroxide and proteinaceous compound.
In this study, a LCH1227 bacterial strain that possesses anti-listerial activity was isolated from fermented food and identified as Lactobacillus salivarius LCH1227 based on its morphological and biochemical properties, as well as its 16S rRNA gene sequences. Anti-listerial substance also inhibited the growth of various Gram-positive bacteria, such as vancomycinresistant Enterococcus faecalis, Streptococcus agalactiae, Bacillus cereus, Lactobacillus fermentum. The highest level of production of antimicrobial substances from L. salivarius LCH1227 occurred during the early stationary phase. The antilisterial activity was found to be stable over a broad range of pH values (2.0-12.0) and after heat treatment. However, it was inactivated by proteolytic enzymes, indicating its proteinaceous nature. The apparent molecular mass of the partially purified anti-listerial substance, as measured by Tricine-SDS-PAGE, was approximately 5 kDa.
Insects constitute the largest and most diverse group of animals in the world. They also serve as the hosts or nutrient sources for an immense assemblage of pathogens, parasites, and predators. More than 700 fungal species from 100 genera have adopted an entomopathogenic lifestyle. Although entomopathogenic fungi were studied as only biocontrol agents against a variety of pests in various countries, it has been recently focused their additional roles in nature. They are antagonists to/against plant pathogens, endophytes, and possibly even plant growth promoting agents. The potential antimicrobial effect against fungal plant pathogens by an isolate of entomopathogenic fungi including Beauveria bassiana, Lecanicillium spp., and Isaria fumosorosea have been reported since late 1990s, but wasn't reported pathogenicity of the isolate against pests. Later, a Canadian Lecanicillium sp. isolate and L. longisporium isolated from Vertalec$^{(R)}$ showed simultaneous control effect against both aphid and cucumber powder mildew. Therefore, the antimicrobial activities of 342 fungi isolates collected from various regions and conditions in Korea were evaluated against plant pathogenic fungus Botrytis cinerea using dual culture technique on agar plate. As a result, 186 isolates (54.4%) shown the antifungal activity against B. cinerea. The culture filtrates of selected fungi completely suppressed the growth of the microorganisms, indicating that suppression was due to the presence of antimicrobial substances in the culture filtrate. Mode of action of these fungi against insect involves the attachment of conidia to the insect cuticle, followed by germination, cuticle penetration, and internal dissemination throughout the insect. During infection process, secreted enzymes, proteinous toxins, and/or secondary metabolites secreted by entomopathogenic fungi can be used to overcome the host immune system, modify host behavior, and defend host resources. Recently, secondary metabolites isolated from entomopathogenic fungi have been reported as potential bioactive substances. Generally, most of bioactive substances produced by entomopathogenic fungi have reported low molecular weight (lower than 1,000 g/mol) as peptide and, in contrast the high molecular weight fungal bioactive substances are rare. Most substances based on entomopathogenic fungi were shown antimicrobial activity with narrow control ranges. In our study we analyzed the antimicrobial substances having antagonistic effects to B. cinerea. Antimicrobial substances in our fungal culture filtrates showed high thermostability, high stability to proteolytic enzymes, and hydrophilicity and their molecular weights were differed from substance. In conclusion, entomopathogenic fungi showed pathogenicity against insect pests and culture filtrate of the fungi also shown to antimicrobial activity. In the future, we can use the entomopathogenic fungi and its secondary metabolites to control both insect pest control and plant pathogenic fungi simultaneously.
In this study, L. plantarum, when reacting with the culture media of potential pathogenic bacteria, exhibited an increase in growth rate and antimicrobial activity. In order to examine the characteristics and the nature of the reaction with the bacteria, this study carried out experiments involving culturing the test bacteria in M9 minimal media. Subsequently, the supernatant was incrassated by the decompression-drying method. Through colony forming unit assay, it was confirmed that L. plantarum had the function of growth inhibition to various bacteria. After culturing L. plantarum with bacterial media, the growth rate of L. plantarum was measured by absorbance (OD600), the results showed that the growth rate (E. coli treatment group: OD600 = 0.848, S. typhimurium treatment group: OD600 = 0.848) increased, as compared with the non-treated control group (OD600 = 0.48). In contrast, the concentrate itself did not induce the growth of L. plantarum. These results were observed as a universal phenomenon of the Lactobacillus species. Moreover, the increase in antimicrobial activity was observed in L. plantarum, which reacted with the culture media of E. coli and S. typhimurium, through a disc diffusion assay, and the result of growth inhibition against various bacteria was induced. Finally, based on the analysis results of the characteristics of bacteria culture media, which increased the growth rate of L. plantarum and antibacterial activity, the bacterial media had a tolerance for catabolic enzymes, pH 2−8 and heat. Therefore, this substance can be said to be a small molecule which is highly stable under various conditions.
To evaluate antimicrobial activities of chongkukjang slime fermented by different strains, growth characteristics were compared using various standard microorganisms with addition of chongkykjang slime. Chonghkjang slime was prepared by fermenting cooked soybean after inoculating with Bacillus circulans K-1, Baciilus spp N-1 and Bacillus subtilis CH-1, respectively. Significant antimicrobial activity was observed by chongkukjang slime on gram positive bacteria (Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Micrococcus luteus), gram negative bacteria(Escherichia coli O157:H7, Salmonella Typhimurium, Pseudomonas fluorescens), and yeast (Pichia membranaefaciens, Saccharomyces cerevisiae, Candida albicans). In case of B. cereus growth inhibition of 80% was achieved by the addition of chongkukjang slime; on the contrary, to Escherichia coli O157:H7 only 20% inhibition was observed. Slime from Bacillus subtilis CH-1, in particular, inhibition of 40% toward bacteria and yeast, whereas slime from Bacillus circulans K-1, Bacillus spp N-1 showed only 20% inhibition.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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