• 제목/요약/키워드: antibody formation

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고정화법을 달리하여 제조한 압전류적 항체 센서에 의한 Salmonella spp.의 신속 검출 (Rapid Detection of Salmonella spp. by Antibody-Immobilized Piezoelectric Crystal Biosensor)

  • 박인선;김우연;김남수
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제13권3호
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    • pp.206-212
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    • 1998
  • Salmonella spp.의 신속한 검출을 위하여 엷은 박막형태의 수정결정을 사용하는 압전류적(piesoelectric) 항체센서 시스템을 개발하고 증류수, 완충용액, 식염용액 등의 여러 매질 중에서 보여주는 진동 특성을 검토하였다. Salmonella spp. 균 구조항원(Common structural antigen)에 대한 항체를 수정결정에 PEI pre-coating, BSA 가교화, 3-APTES silanizaition, protein A와 DTBP thiolation의 5가지 방법에 의해 고정화한 후 항체 센서의 안정성을 살펴보았다. Salmonella 균을 주입하였을 때 Salmonella 균과 수정 결정에 고정화한 항체와의 결함반응에 의해 수정결정의 질량증가와 이에 따른 진동수 감소가 나타났다. 고정화방법 중 protein A와 DTBP를 이용하여 고정화하는 방법이 센서반응을 가장 안정적이고 재현성 있게 나타내줌을 알 수 있었다. $7.45{\times}10^{7}\;CFU/ml$의 Salmonella 균을 반응 cell 내에 주입하였을 때 protein A를 이용한 고정화의 경우 80Hz, DTBP를 이용한 고정화의 경우 283 Hz의 진동수 감소가 나타났으며, 압전류적 항체센서를 이용할 경우 40분 이내에 Salmonella spp.의 검출이 가능하였다.

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Antibody Layer Fabrication for Protein Chip to Detect E. coli O157:H7, Using Microcontact Printing Technique

  • KIM HUN-SOO;BAE YOUNG-MIN;KIM YOUNG-KEE;OH BYUNG-KEUN;CHOI JEONG-WOO
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제16권1호
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    • pp.141-144
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    • 2006
  • An antibody layer was fabricated to detect Escherichia coli O157:H7. The micropattern of 16-mercaptohexadecanoic acid (16-MHDA) as alkylthiolate was formed on the gold surface by using the PDMS stamp with microcontact printing $({\mu}CP)$ techniques. In order to form antibody patterns on the template, protein G was chemically bound to the 16-MHDA patterns, and antibody was adsorbed on a self-assembled protein G layer. The formation of the 16-MHDA micropattern, self-assembled protein G layer and antibody pattern on Au substrate was confirmed by surface plasmon resonance (SPR) spectroscopy. Finally, the micropatterning method was applied to fabricate the antibody probe for detection of E. coli O157:H7, and monitoring of antigen by using this probe was successfully achieved.

H-Y항체활성의 최적조건과 종간교차반응 (Optimal Condition and Interspecific Cross-Reaction of H-Y Antibody Activity)

  • 고정재
    • 한국가축번식학회지
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    • 제10권2호
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    • pp.168-174
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    • 1986
  • These experiments were carried out to clarify the optimalconditions and interspecific cross reaction of H-Y antibody activity. H-Y antiserum was prepared in inbred SD female rats and Balb/c female mice by repeated immunization of rat newborn testis homogemate, rat and mouse spleen cells obtained from males of same strain. The activity of H-Y antibody in antiserum was tested by ELISA and biological tests. The cross reactivity of H-Y antibody was confirmed by culturing mouse and rabbit embryos in medium containing H-Y antibody and complement obtained from rat and guinea pig, respectively. The optimal condition for the activity of H-Y antibody was also investigated by culturing embryos in medium with different pH and complement concentration. The results obtained in these experiments were summarized as follows: 1. The formation rates of H-Y antibody in rats immunized with newborn testis and spleen cell were 40.0 and 50.0% respectively, and that in mouse immunized with spleen cell was 48.4%. 2. The activity of H-Y antibody was not affected by pH in range of 6.5 to 8.0, and the same was true for the relative concentration of complement to the H-Y antibody. 3. Minimum time needed for the activity of H-Y antibody was confirmed to be 0.5 to 1 hour and 24 to 48 hours respectively for the zona free embryos and intact embryos. 4. When mouse and rabbit embryos were treated with H-Y antibody obtained from rat, 46.4 and 54.8% of embryos were retarded or destroyed. From these results it could be said that H-Y antibody had strong interspecific cross reactivity.

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유전자 재조합 대장균의 세포성장과 Pyruvate Dehydrogenase Complex-E2 특이성 인간 모노클론 항체 생산에 대한 포도당과 초산의 영향 (Effects of Glucose and Acetic Acid on the Growth of Recombinant E.coli and the Production of Pyruvate Dehydrogenase Complex-E2 Specific Human Monoclonal Antibody)

  • 이미숙;전주미;차상훈;정연호
    • KSBB Journal
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    • 제15권5호
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    • pp.482-488
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    • 2000
  • 유전자 재조합 대장균을 이용하여 pyruvate dehydrogenase complex-E2 특이성 인간 모노클론 항체의 Fab부분이 생산되 었다. 재조합 대장균의 고밀도 배양과 이를 통한 재조합 인 간 항체의 고생산성을 확보하기 위한 최적 전략을 개발하기 위해 포도당과 초산의 영향에 대해 조사하였다. 포도당의 농 도가 높을수록 세포의 성장속도는 빨라지고 포도당의 소모속 도도 빨라짐을 알 수 있었다, 이때 포도당의 소모속도가 빨 라질수록 초산의 대사 부산물로서의 생성속도도 빨라졌다. 그러나 포도당이 고갈되면 일단 축적된 초산은 에너지원으로 소모되기 시작하고 이때의 소모속도는 배지내의 포도당의 농 도에 의존함을 알 수 있었다. 즉 초기 포도당의 농도가 어느 정도 높아 잔존 포도당의 농도가 높은 경우, 초산의 생성 속 도는 높고 에너지원으로 소모되는 속도는 느려져서 초산의 축적현상이 기하급수적으로 증가한다. 이렇게 높은 포도당 농도에 따라 축적된 초산은 항체 생산을 저해하였고, 저해를 위한 임계 초산 농도는$0.6g/\ell$이었다. 발현에 의해 항체를 생산하는 시기에서는, 포도당 농도가 높을수록 세포성장이 증대되나 초산에 의 한 저해 현상 및 catabolic repression의 영 향으로 항체 생산이 감소하였다. 따라서 발현 후 항체의 생산을 증진시키기 위해서는 포도당과 초산의 농도를 가능한 한 낮게 유지하는 것이 중요하다. 그러므로 고말도 배양과 재조합 인간 항체의 높은 생산성을 확보하기 위해서는 배양 액내의 포도당과 초산의 농도를 정밀하게 조절하는 것이 절실히 요구된다.

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Ultrastructural Localization of Cryptosporidium parvum Antigen Using Human Patients Sera

  • Lee, Jong-Gyu;Han, Eun-Taek;Park, Woo-Yoon;Yu, Jae-Ran
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제47권2호
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    • pp.171-174
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    • 2009
  • The antigen location of Cryptosporidium parvum, which stimulates antibody formation in humans and animals, was investigated using infected human sera. Immuno-electron microscopy revealed that antigenicity-inducing humoral immunity was located at various developmental stages of parasites, including asexual, sexual stages, and oocysts. The amount of antigen-stimulating IgG antibodies was particularly high on the oocyst wall. The sporozoite surface was shown to give stimulation on IgG and IgM antibody formation. Trophozoites implicated the lowest antigenicity to humoral immunity, both IgG and IgM, by showing the least amount of gold labeling. Immunogold labeling also provided clues that antigens were presented to the host-cell cytoplasm via feeder organelles and host-parasite junctions.

Monoclonal antibody K312-based depletion of pluripotent cells from differentiated stem cell progeny prevents teratoma formation

  • Park, Jongjin;Lee, Dong Gwang;Lee, Na Geum;Kwon, Min-Gi;Son, Yeon Sung;Son, Mi-Young;Bae, Kwang-Hee;Lee, Jangwook;Park, Jong-Gil;Lee, Nam-Kyung;Min, Jeong-Ki
    • BMB Reports
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    • 제55권3호
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    • pp.142-147
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    • 2022
  • Human pluripotent stem cells (PSCs) have been utilized as a promising source in regenerative medicine. However, the risk of teratoma formation that comes with residual undifferentiated PSCs in differentiated cell populations is most concerning in the clinical use of PSC derivatives. Here, we report that a monoclonal antibody (mAb) targeting PSCs could distinguish undifferentiated PSCs, with potential teratoma-forming activity, from differentiated PSC progeny. A panel of hybridomas generated from mouse immunization with H9 human embryonic stem cells (hESCs) was screened for ESC-specific binding using flow cytometry. A novel mAb, K312, was selected considering its high stem cell-binding activity, and this mAb could bind to several human induced pluripotent stem cells and PSC lines. Cell-binding activity of K312 was markedly decreased as hESCs were differentiated into embryoid bodies or by retinoic acid treatment. In addition, a cell population negatively isolated from undifferentiated or differentiated H9 hESCs via K312 targeting showed a significantly reduced expression of pluripotency markers, including Oct4 and Nanog. Furthermore, K312-based depletion of pluripotent cells from differentiated PSC progeny completely prevented teratoma formation. Therefore, our findings suggest that K312 is utilizable in improving stem cell transplantation safety by specifically distinguishing residual undifferentiated PSCs.

가잠의 휴면성에 관한 면역학적 연구 (Immunological Study on the Diapause of Silkworm (Bombyx mori L..))

  • 마영일;박광의
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제15권2호
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    • pp.1-7
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    • 1973
  • 잠란 난령별 추출액을 항원으로 토끼의 항혈청을 만들고 이들 항원과 항체와의 사이에 생기는 반응에 의하여 항원성을 비교하였다. 그 결과는 아래와 같다. 1) 잠란내 난령별 조성물질은 토끼의 이정맥에 주입하였을 경우에 대부분의 잠란항원 A.B.D.G.H.J는 항체를 형성하였으나 그 일부의 항원 C.E.F.I에서는 항체 형성이 식별되지 않았다. 2) 잠란 잠령별 잠란내 조성물질은 생종인 대조 A구, B구와 대조 B구와 AKT 흑종 48시간구 D, 흑확잠 103과 잠 104에 있어서 G.H와 J는 서로 공통항원을 가지고 있었으나 그 일부 즉 AKT의 E.F 잠 104의 20시간구 I에서는 특이적인 항원항체반응을 인정할 수 없었으며 타 항체, D.E.F와의 사이에서는 비특이적인 항원항체반응을 인정할 수 있었다. 3) 각 난령별 잠란내에는 공통항원성 물질이 존재하는 것으로 사려되며 각 난령에 따른 특수항원성을 보기 위해서 흡습법에 의한 시험을 한 결과 B.D.G.J의 4개의 특이적인 항원을 인정할 수 있었다.

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當歸飮子 水抽出液이 抗ALLERGY 反應과 MOUSE의 免疫細胞機能에 미치는 影響 (Effcts of Dangkiyeumja(當歸飮子) Water Extract of anti-allergic responses and on the Functions of Murine Immunocytes)

  • 노석선;이기남
    • 한방안이비인후피부과학회지
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    • 제4권1호
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    • pp.23-42
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    • 1991
  • This study were done to know the effects of Dangkiyeumja on the in vivo and in vitro immune responses of mice. The recipes of Dangkiyeumja used in this study enhanced such, cellular functions of immunocytes as phagocytic capacity of macrophages, rossett-eforming abilities of splenocytes and metabolic activities of lymphocytes, However, the same recipes decreased the formation of such reactive oxygen intermediates(ROI) as superoxide and hydrogenperoxide from the macrophages. The effects of the same recipes on the in vim immune responses was suppressive on the cellular immune response(CIR)measured by delayed-type hypersensitivity against dinitrofluorobenzene and mildly enhancing for the humoral immune response measured by antibody production against sheep red blood cells. The results of this study could be summarized as follow: 1. Administration of Dangkiyeumja enhanced the phagocytic activity of the murine macrophage. 2. Administration of Dangkiyeumja decreased the formation of ROI in the murine macrophage 3. Administration of Dangkiyeumja increased the number of the splenic rotte forming cells in the mouse. 4. Administration of DangKiyeumja did not effect the antibody production against sheep red blood cells. 5. Administration of Dangkiyeumja depressed the delayed-type hypersenitivity against dinitrofluoro benzene in the mouse. The result of this study suggest that Dangkiyeumja could ameliorate the hypersensitivity reactions by reducing the formation of ROI and decreasing the CIR without affecting the other functions of immunocytes.

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Helicobacter pylori 항원을 이용한 면역우유 생산에 관한 연구 (Study on Production of Antibody in Milk Immunized Cows with Some Helicobacter pylori Antigen)

  • 박창호;김수정;예은주;배만종
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제34권4호
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    • pp.484-488
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    • 2005
  • 본 연구는 위염, 위궤양, 위림프종 및 위암과 같은 소화기 질환의 원인균으로 알려진 Helicobacter pylori균을 항원으로 하여 젖소에 면역시킨 후 생산된 우유의 anti-H. pylori 항체 생성능을 검토하고, 백신 투여량과 항체 생성과의 관계, 비유시기에 따른 항체생성과의 관계 그리고 백신투여가 젖소에 미치는 영향을 알아보았다. 백신 투여량에 따른 혈청과 유청내의 anti-H. pylori항체의 함량은 10 mL, 20 mL, 30 mL 백신투여 모든 군에서 대조구에 비해서 높은 항체 생성량을 확인하였으며, 그 중 20 mL 투여가 항체 생성에 가장 큰 영향을 미친 것으로 조사되었다. 백신 투여량에 따른 유청내의 antl-H. pylori항체 생성량은 혈청에서 나타난 결과와 유사한 결과를 나타내었다. 백신투여에 따른 비유시기별 항체함량은 혈액내에서는 $2\~4$주까지 증가하는 경향을 보이다가 $6\~12$주 사이에는 대조구와 유의성 있는 차이를 보였고, 처리구간 항체생성량은 비유초기>비유중기>비유 후기 순으로 유의성있는 차이를 나타내었다(p<0.05). 그리고 유청내 항체 함량은 혈액과 유사한 경향을 나타내며 항체함량이 증가하였으나, 처리구간의 유의적인 차이는 나타나지 않았다. 백신투여로 인하여 백신투여 1일째의 산유량은 $12\%$ 감소하는 경향을 나타냈고, 최장 1주일 정도 지나면서 회복되었다. 백신투여 후 젖소의 체온을 측정한 결과 정상적인 범위 내에서 체온이 상승하여 백신투여가 젖소의 생리적 변화에 큰 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다.