산화적인 스트레스(Oxidative stress)는 신경염증의 발병요인 중의 하나로 알려져 있다. 이에 본 연구는 약용곤충추출물을 이용하여 항산화 물질을 찾고자 초고속 적용가능한 스크리닝 방법을 적용하였다. 우선, 분자염증은 활성산소 관련의 물질과 밀접한 관련이 있으므로 이들의 억제를 동반하는 추출물을 먼저 선별하였다. 항산화 실험과 관련하여 DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl), FRAP(Ferric ion reducing antioxidant power), HO (Hydroxyl radical) 소거, linoleic acid에 대한 항산화 활성 등을 assay하였고 hydrogen peroxide(H2O2)에 의한 세포사멸 억제 활성을 보기 위해 MTT assay를 실시하였다. 실험 결과, 사마귀, 늦반딧불이, 무당벌레에서 다른 library에 비교하여 항산화 활성이 높게 나타났다.
최근 곤충자원은 약용 및 식용으로 활용하려고 많은 연구가 되고 있으며 미래의 자원으로 발전할 수 있는 가능성은 충분하다. 본 연구는 곤충자원 중 칠성무당벌레와 무당벌레를 이용하여 생물학적 활성과 함께 약용 및 식용으로의 활용가능성을 알아보고자 하였다. 생물학적 활성을 알아보기 위하여 이들 추출물을 이용하여 항산화관련 실험인 DPPH, FRAP, linoleic acid 산화 억제실험을 하였으며, 분자 염증에 관련된 유전자인 Cyclooxygenase-2(Cox-2)의 promoter의 유전자 발현의 억제 유무를 알아보았다. 항산화 효과에 있어서는 무당벌레의 DW추출물에서 높은 활성을 나타내었으며, Cox-2의 promoter 활성을 조사한 결과 DW 추출물에서 Cox-2의 promoter 활성을 약 25% 정도 억제하는 무당벌레의 DW추출물을 발견하였는데 추출물의 산업적인 활용가능성을 확인하기 위하여 보다 많은 연구가 필요하다.
This study aimed to investigate the characteristics of 3 pre-treatment of mealworm(Tenebrio molitor), and offer basic research data through appropriate pre-treatment method based on the component analysis result. This study was preparing the control group sample No.0(not contain mealworm), and the other sample (Sample No.1,2,3) was using the mealworm prepared in each of the three methods. By using the sample, this study conducted an inspection for component analysis, mineral contents, pH, color value, total amount polyphenols, DPPH radical scavenging activity, reducing power, acceptance test. Each experiments are three times repeated and validated following the one-way ANOVA analysis to verify a significant difference. Acceptance test conducted by 50 consumers indicate consumption decision for sunsik. using the seven point scale, assessment for appearance, flavor, taste, texture, overall acceptance. The research findings showed that sample containing sauted mealworm(SE2) is higher preference and significant in antioxidant activity(total amount polyphenols, DPPH radical scavenging activity, reducing power). Therefore, it is better to use sauted. The result of this study suggest that sauted mealworm is good ingredient for consumer acceptability and functionality of sunsik. According to results of the study, it is suggested to make better use of food, and provide food developer with meaningful date for market targeting. In addition, this study also provides the information for improving awareness of edible insect.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제28권2호
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pp.25-31
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2014
Protaetia brevitarsis seulensis (Kolbe) is widely used in Korea, as a protein-rich, alternate, functional food with pharmacological benefits. In addition to anti-oxidant properties, the larvae of P. b. seulensis also show positive effects against hepatic disorder and diabetes; therefore, P. b. seulensis larvae are being reared on a large scale in Korea. We evaluated reared larvae of P. b. seulensis from Gyeong-gi in Korea. Using 16SrRNA PCR, electro-microscopy, and bioassay techniques, we found that the larvae harbored Spo-1, a bacterium identified as the insect pathogen Serratia marcescens. Therefore, we highlight the use of this insect as an alternate food and the need for its sanitary rearing conditions, as contamination may affect public health.
We previously isolated cordycepin, guanosine and tryptophan from Cordyceps militaris as antiadipogenic constituents. For the quality control of C. militaris for anti-adipogenic activity, simultaneous analytical method using high-performance liquid chromatography (HPLC)-diode array detection (DAD) was developed and validated. Quantitation of these compounds in various Cordyceps samples from different sources and various extraction methods were conducted using developed method. Our study shows that natural Cordyceps and host insect possess higher content than cultured ones and fruiting bodies, respectively. The content of cordycepin showed great difference in different C. militaris samples whereas trytophan content was similar in tested samples. Addition of water to extraction solvent greatly increased the yield of guanosine and tryptophan. High temperature and longer extraction time increased yield of guanosine, whereas the content of trytophan was decreased in high temperature during extraction with water. Extraction using ultrasonic apparatus slightly increased extraction efficiency. Cordycepin, however, has little variation in different extraction method tested. Strong anti-adipogenic activity was observed in the samples that contain all the three constituents. Taken together, quantitation of these compounds using developed analytical method might provide basic requirement for the anti-adipogenic activity of C. militaris.
Lee, Jun Beom;Bae, Sung Min;Shin, Tae Young;Woo, Soo Dong
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제30권2호
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pp.50-57
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2015
Porcine circovirus type 2 (PCV2) is an important infectious swine virus causing postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS). PCV2 capsid protein, encoded by ORF2 has type-specific epitopes, is very immunogenic, and is associated with the induction of neutralizing antibodies. For the efficient production of capsid protein, recombinant Autographa californica nucleopolyhedroviruses were generated to express ORF2 fused with two forms of a partial polyhedrin. Recombinant capsid protein was produced successfully with the partial polyhedrin fusion form and the yield was high, as was shown by SDS-PAGE. Production of recombinant capsid proteins in insect cells was confirmed by Western blot analysis using anti-His monoclonal antibody, anti-ORF2 monoclonal antibody, and anti-PCV2 porcine serum. Fusion expression with amino acids 19 to 110 of the polyhedrin increased the production of recombinant capsid protein, but fusion with amino acids 32 to 85 did not. Additionally, PCV2 capsid protein is a glycoprotein; however, the glycosylation of recombinant protein was not observed. The results of an Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) showed that recombinant capsid proteins could be utilized as antigens for fast, large-scale diagnosis of PCV2-infected pigs. Our results suggest that the fusion expression of partial polyhedrin is able to increase the production of recombinant PCV2 capsid protein in insect cells.
In the present study, whispovirus immediate early 1 promoter (ie-1) was used to initiate surface expression of the hemagglutinin (HA) protein of Egyptian H5N1 avian influenza virus (AIV) by using the baculovirus expression vector system. The HA gene and whispovirus ie-1 promoter sequence were synthesized as a fused expression cassette (ie1-HA) and successfully cloned into the pFastBac-1 transfer vector. The recombinant vector was transformed into DH10Bac competent cells, and the recombinant bacmid was generated via site-specific transposition. The recombinant bacmid was used for transfection of Spodoptera frugiperda (Sf-9) insect cells to construct the recombinant baculovirus and to induce expression of the HA protein of H5N1 AIV. The recombinant glycoprotein expressed in Sf-9 cells showed hemadsorption activity. Hemagglutination activity was also detected in both extra- and intracellular recombinant HAs. Both the HA and hemadsorption activities were inhibited by reference polyclonal anti-H5 sera. Significant expression of the recombinant protein was observed on the surface of infected insect cells by using immunofluorescence. SDS-PAGE analysis of the expressed protein revealed the presence of a visually distinguishable band of ~63 kDa in size, which was absent in the non-infected cell control. Western blot analysis confirmed that the distinct 63 kDa band corresponded to the recombinant HA glycoprotein of H5N1 AIV. This study reports the successful expression of the HA protein of H5N1 AIV. The expressed protein was displayed on the plasma membrane of infected insect cells under the control of whispovirus ie-1 promoter by using the baculovirus expression vector system.
본 연구에서는 시험물질인 수벌번데기추출물의 in vitro 주름개선, 미백 및 보습 효능 평가를 검정하였다. 수벌번데기추출물의 미백효과 시험을 위하여 in vitro tyrosinase inhibition 시험을 하였다. 이를 위하여 기질로 L-Tyrosine 및 L-DOPA를 사용하였을 때 모두 농도의존적으로 tyrosinase 억제 효능을 보여서 미배효과를 가지고 있는 것을 확인하였다. 그리고 수벌번데기 추출물의 주름개선 효과 및 보습효과를 구명하기 위하여 HDF, B16F10 cell을 사용하였다. 추출물의 이들 세포에 미치는 세포독성시험을 실시한 후 시험물질의 투여 용량을 설정하였다. 그 결과 두 세포 모두 독성을 나타내지 않는 100 ㎍/ml를 최고 농도로 설정하고, 공비 1/5로 20 및 4 ㎍/ml를 시험농도로 설정하였다. HDF cell을 이용하여 collagen type I 및 MMP1의 발현량을 측정한 결과 UVB 조사로 감소된 collagen type I의 양은 시험물질 처리로 인하여 농도 의존적으로 증가되었다. UVB 조사로 증가된 collagen 분해효소인 MMP1의 발현은 시험물질 처리로 인하여 농도 의존적으로 감소하였다. B16F12 cell을 이용한 melanin 생성 억제 시험 결과, 시험물질 처리군에서 감소하는 경향을 나타내었다. 결론적으로 시험물질인 수벌번데기추출물은 collagen 생성을 증가시키고 collagen 분해 효소인 MMP1의 발현을 억제함으로써 주름 개선에 효과가 있으며, melanin 생성을 억제하여 피부미백에도 효과가 있을 것으로 판단된다.
The larva of Protaetia brevitarsis Lewis (P. brevitarsis), edible insect, is traditionally consumed as alternative source of nutrients and has various health benefits. However, the exact pharmaceutical effects of P. brevitarsis on inflammatory response are still not well understood. Thus, we investigated the anti-inflammatory effects and mechanisms of P. brevitarsis in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW264.7 cells. We investigated the effects of P. brevitarsis on the expression levels of inflammatory-related genes, including inflammatory cytokines, prostaglandin E2 (PGE2), cyclooxygenase (COX)-2 and inducible nitric oxide synthase (iNOS) in LPS-stimulated RAW264.7 cells. To understand the anti-inflammatory mechanism of P. brevitarsis, we explored the regulatory effect of P. brevitarsis on nuclear factor (NF)-κB and caspase-1 activation. The findings of this study demonstrated that P. brevitarsis inhibits the LPS-induced inflammatory cytokine and PGE2 levels, as well as COX-2 and iNOS expression. Moreover, we confirmed that the anti-inflammatory effect of P. brevitarsis occurs via suppression of the activation of NF-κB and caspase-1. Conclusively, these findings provide experimental evidence that P. brevitarsis may be useful candidate for the treatment of inflammatory-related diseases.
곤충의 난황형성에는 각종호르몬들이 먹이 등과 함께 매우 중요하게 작용하고 있으며, 이러한 호르몬들 중에서는 신경분비호르몬, 유약호르몬 및 엑디스테로이드 등이 주작용을 한다. 본 총설에서는 곤충호르몬을 포함한 곤충성장조절제가 곤충의 난황형성에 작용하여 어떤 영향을 주는지에 대하여 살펴보고 종합적 해충관리 인자로서 이용 가능성을 조사하였다. 곤충의 난황형성은 일반적으로 뇌에서 분비하는 신경분비호르몬의 작용과 난소에서 분비되는 엑디스테로이드 및 알라타체에서 분비되는 유약호르몬이 지방체를 자극하여 난황소전구물질을 합성하게 하며, 혈림프로 분비된 난황소 전구물질은 난모세포로 흡수되어 난발육이 이루어진다. 곤충호르몬을 포함한 곤충성장조절제는 이러한 난황형성과정 중에 각종 호르몬분비 기관(알라타체와 난소 등) 및 여러 가지 생리기관(지방체, 중장상피 그리고 침샘 등)에 작용하여 용해, 파괴 및 세포독성을 나타내 정상적인 생식작용을 하지 못하도록 한다. 따라서 곤충의 종류에 따라서는 포유동물에 독성이 낮은 곤충호르몬을 포함한 곤충성장조절제를 종합적 해충관리의 일환으로 사용함으로서 효과적인 해충방제가 가능할 것으로 보인다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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