To develope the scientific preparation method of Dorean traditional rice drink 'Sikhye', effect of malt and commercial amylolytic enzymes in preparation of malt-Sikhye were studied. amylase activity of malt used in this study was 9,725unit/g. In malt-Sikhye preparation effective saccharifying conditions were 4% of malt 20% of rice at 6$0^{\circ}C$ for 5hour. Commercial amylolytic enzymes such as $\beta$-amylase(Bio-zyme ML Himaltosin GL) $\alpha$-amylase(Bokhabhyoso 5000, Teramyl and Fungamyl) and pulluanase(en-zyme CK-20) were not effective in saccharification for Sikhye preperation.
To isolate novel and useful microbial enzymes from uncultured gastrointestinal microorganisms, a fecal microbial metagenomic library of the pygmy loris was constructed. The library was screened for amylolytic activity, and 8 of 50,000 recombinant clones showed amylolytic activity. Subcloning and sequence analysis of a positive clone led to the identification a novel gene (amyPL) coding for ${\alpha}$-amylase. AmyPL was expressed in Escherichia coli BL21 (DE3) and the purified AmyPL was enzymatically characterized. This study is the first to report the molecular and biochemical characterization of a novel ${\alpha}$-amylase from a gastrointestinal metagenomic library.
The effects of pH values, temperature and some elements on the amylolytic activity and stability of the purified S. aureofacienc 77 amylase were studied in this investigation. The purified enzyme showed its maximum activity at pH 6 within 8 min incubation at $40^{\circ}C$. None of the tested 6 metals showed on stimulatory effect on the enzymatic activity, $Fe^{+++}$, $Cu^{++}$ and $Hg^{++}$ at high dose inhibited the enzyme activity to great extent as compared with $Zn^{++}$, $Mn^{++}$ and $Fe^{++}$ whih gave less effect in this respect. The enzyme liquor was found to be thermolabile, since it lost completely its activity after 4 days incubation under room temperature and showed maximum activity during this period as a result of additions of $Ca^{++}$and NaCl, Gradual reduction was however recorded until activity reached 30% after 60 days of incubation.
Trichoderma spp. are the aggressive causal agents for green mold disease on oyster mushroom (Pleurotus spp.) cultivation. Antifungal bacteria (KATB 99121, KATB 99122 and KATB 99123 strains) were isolated from the compost for Pleurotus ostreatus. Among these bacterial strains, KATB 99121 strain showed an excellent inhibitory activity to the pathogens for green molds such as T. harzianum, T. viride and T. hamatum and an animal pathogen, Candida albicans, but did not affect on the culture of Pleurotus ostreatus (2209, Chunchu 2 and Wonhyung strains). KATB 99121 strain secreted amylolytic, proteolytic and cellulolytic exoenzymes. KATB 99122 and KATB 99123 strains excreted amylolytic, proteolytic, cellulolytic, lipolytic exoenzymes and showed ${\beta}$-glucosidase activity. Further studies will be conducted on the development of microbial fungicides using the antagonistic bacteria for the control of green mold disease on Pleurotus spp.
As an improved preparation method of Shikhae, a tea-bag system containing malt and amylolytic enzymes was developed in which extraction of malt enzymes and saccharification occured efficiently. The amylolytic activity of the malt was increased by adding the mixture of ${\alpha}-amylase$, glucoamylase and glucoisomerase. Malt and the mixture of enzymes were placed in tea-bag $(16{\times}20cm)$, extracted in water at $30-40^{\circ}C$ for 1-2 hours and followed by saccharification of the cooked rice at $60-70^{\circ}C$ for 3-4 hours. In the conventional Shikhae, content of maltose was about 50% and that of oligosaccharides larger than trisaccharides was about 40% of total sugar. The content of monosaccharides such as glucose and fructose was about 95% and this improved method would be effective for increasing the sweetness and the monosaccharide contents in the product.
Through the study of identification of filamentous molds isolated from 12 traditional Nuruk, collected from several regions in Korea, 78 strains of Absidia spp., including Absidia corymbifera, Absidia ramosa, and Absidia sp. of which specific names were not identified, 19 strains of Rhizopus spp. including Rhizopus cohnii, Rhizopus arrhizus, and Rhizopus oryzae, 8 strains of Circinella spp., 1 strain of Actinomucor sp., 49 strains of Aspergillus spp., including Aspergillus oryzae, Aspergillus flavus, Aspergillus flavus var. columnaris, Aspergillus wentii, Aspergillus candidus, Aspergillus fumigatus, Aspergillus niger, and Aspergillus foetidus, 2 strains of Cladospoyium spp. and 2 strains Botryotrichum spp., etc. total 159 kinds of filamentous molds were isolated and identified. There were many differences in numbers and distributions of filamentous molds from each Nuruk according to their collected region. Absidia spp. were most frequently isolated from every Nuruk sample. Aspergillus oryzae, Aspergillus candidus, and Rhizopus cohnii showed even distribution. Penicillium sp. and Mucor sp. were not detected. Actinomucor sp., Aspergillus foetidus, Botryotrichum sp., and Cladosporium spp., which have not been reported by far, were found. Amylase activities, pH stability of amylase, and acid productivity of isolated strains were compared.
It is necessry to develop and strengthen the activity of enzymic source which in low applied for maggerley brewing as an amylolytic and proteolytic starter, recently in this country the active and strong enzymic starter is required for the better brewing and to substitute another starch material for the present wheat flour. In this study, manufacturing method the strong enzymic source have been developed and established with use of raw wheat bran plus fungal strains of Rhizopus sp. and Aspergillus usamii the culture of starter. The results on experimental the activities of enzymic sources (stater) are as following ; 1. Method of making the enzymic source (starter) is to cultivate the strains of Asperguillus orzyae, Asp. kawachii, Asp usamii and Rhizopus sp. in the acid treated raw or heatboiled wheat bran. 2. The saccharogenic pwoer (S.P.) of enzymic source which consisted of raw bran plus fungi and cultured in it is generally stronger than those of heat-boiled bran plus fungi, the strongest power was shown in the culture of Rhizopus plus raw bran, and the next other is in mixture of Asp.usamii and Rhizopus on raw wheat bran. 3. The most strong alpha amylase activity was expressed in the plot of Asp.oryzae on heat-boiled wheat bran, the next was in the culture of Rhizopus nad Aspergillus usamii on raw wheatbran. 4. The most vigourous acidic proteinase activity was expressed in the micture of raw bran plus Asp. usamii and Rhizopus those were independentlu cu;tured before mixing for neutral proteinase activity, it was shown in the mixed culture of Asp. usamii and Rhizopus on raw wheat bran, the msot active alkaline proteinase activity of enzymic source was found in the plot of raw bran material. 5. For poly-preptidase activity in pH 6.5 it is found that the culture of Rhizopus and Asp.usamii on raw bran was most active among them of enzymic sources. 6. Generally, it is concluded that culture of fungi on acid treated raw wheat bran is stronger in its activity than those of heat boiled wheat bran, especially the culture of Rhizopus nad Asp.usamii on raw bran exhibited the most vigorous and non-polarized activity for all aspects, so it is considered to be most desirable enzymic stater in Korean Maggerley brewing and this would be able to substitute brewing material for the present wheat flour because of its strong and wide hand activity of amylolytic and proteolytic action.
Kim, Sang-Jong;Hong, Soon-Woo;Rhie, Youn;Choi, Sung-Chan
Korean Journal of Microbiology
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v.23
no.3
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pp.215-222
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1985
Distribution pattern and activity of heterotrophec bacteria were measured in the mudflat of Nakdong river estuary. In March and June, 1985, community sizes of amylolytic, lipolytic and proteolytic bacteria as well as total viable counts were measured. Vertical distribution of bacterial community size increased a few orders of magnitude from Narch to June. Heterotrophic activity was estimated in turnover time with $U-[^{14}C]-glucose$. Turnover time reduced considerably in June compared to that of March. To sxamine correlations for measured bacterial groups, turnover time and environmental factors, correlation coefficient matrix was obtained. These measured characteristics did not consistently correlate well with one another.
In beer, glutathione works as the main antioxidant compound, which also correlates with the stability of the beer flavor. In addition, high residual sugars in beer contribute to major nonvolatile components, which are reflected in a high caloric content. Therefore, in this study, the Saccharomyces cerevisiae GSH1 gene encoding glutamylcysteine synthetase and the Saccharomycopsis fibuligera ALP1 gene encoding ${\alpha}$-amylase were coexpressed in industrial brewing yeast strain Y31 targeting the ${\alpha}$-acetolactate synthase (AHAS) gene (ILV2) and alcohol dehydrogenase gene (ADH2), resulting in the new recombinant strain TY3. The glutathione content in the fermentation broth of TY3 increased to 43.83 mg/l as compared with 33.34 mg/l in the fermentation broth of Y31. The recombinant strain showed a high ${\alpha}$-amylase activity and utilized more than 46% of the starch as the sole carbon source after 5 days. European Brewery Convention tube fermentation tests comparing the fermentation broths of TY3 and Y31 showed that the flavor stability index for TY3 was 1.3-fold higher, whereas its residual sugar concentration was 76.8% lower. Owing to the interruption of the ILV2 gene and ADH2 gene, the contents of diacetyl and acetaldehyde as off-flavor compounds were reduced by 56.93% and 31.25%, respectively, when compared with the contents in the Y31 fermentation broth. In addition, since no drug-resistant genes were introduced to the new recombinant strain, it should be more suitable for use in the beer industry, owing to its better flavor stability and other beneficial characteristics.
The amlyolytic enzymes $({\alpha}-amlyase,\;{\beta}-amlyase,\;glucoamlyase)$ and protease activities were studied during Kimchi fermentation. The optimum pH of Kimchi was 4.1 within 2 days at $20^{\circ}C$. The optimum acidity calculated as lactic acid was 0.44% within 2 days at $20^{\circ}C$. On the first day of fermentation, ${\alpha}-amlyase$ activity was reduced from 0.49 unit/mg protein to 0.20 unit/mg protein but increased in the later stage of fermentation. In case of ${\beta}-amlyase,\;glucoamlyase$ and protease showed the highest activity of 505.73, 13.43 and 1.72 unit/mg protein at the 2nd day of fermentation at $20^{\circ}C$. In the sensory evaluation of Kimchi were estimated taste, color, texture and overall acceptability. Overall acceptability of kimchi showed the highest score value on the 2nd day of fermentation, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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