Liquid chromatographic enantiomer separation of ${\alpha}$-amino acid esters as nitrobenzoxadiazole (NBD) derivatives was performed using several chiral stationary phases (CSPs) based on polysaccharide derivatives under fluorescence detection. For enantiomer separation by normal HPLC, the non-aqueous derivatization method of ${\alpha}$-amino acid esters for NBD analytes was introduced. Among the six CSPs used in this study, the performance of Chiralpak IA was superior for enantiomer resolution of NBD derivatives of several ${\alpha}$-amino acid methyl esters. Also the convenient analytical method using polysaccharide-derived CSPs developed in this study was applied to determine the optical purity of ${\alpha}$-amino acids esters. It was investigated that the enantiomeric impurity levels of 0.02-1.73% were found after determination of enantiomeric purities of several commercially available L-amino acid methyl esters. It is expected to be quite useful for enantiomer separation of other ${\alpha}$-amino acid esters as NBD derivatives by normal HPLC.
This study was carried out to Investigate the effects of Panax ginseng, Ganoderma lucidum extract and crude polysaccharide of G. lucidum on the growth of lactic acid bacteria. p. ginseng extract contained 60.7% carbohydrate and 27.5% protein, whereas G. lucidum contained 35.9% carbohydrate and 46.3% protein. The total sugar and protein content of crude polysaccharide of G. lucidum were 47.2% and 15.2%, respectively. Two amino acids(hg, Trp) were detected in p. ginseng extract and 11 amino acids (hg, Trp, Ua, Lys, Ser, etc.) in C. lucidum extract. By the addition of p. ginseng, 5. lucidum extract and crude polysaccharide, the cia. p. ginseng was more effective on the growth of 1. casei an: G. lucidum was more effective on that of S. thermophilus. The effect of free amino acids on the growth of tactic acid bacteria was also examined. Arginine and lysine stimulated the growth of L. casei, whereas Lysine, serine, arginine, and glutamic acid stimulated the growth of 5. thermophilus.
Free amino acids and polysaccharide content of submerged mycelial culture of Fomitopsis pinicola using $2\%$ citrus peel water extracts(CP), $2\%$ green tea water extracts(GT) and yeast-malt broth(YM) were investigated. Cultivations were conducted at $30^{\circ}C$ and 150 rpm for 10 days. Yields of the mycelium as fresh weight basis in GT-, CP- and YM-broth were $42.3\%,\;34.2\%\;and\;9.89\%$, and their turbidity(OD at 660 nm) of the broth without mycelium were 0.14, 0.16 and 0.22, respectively. Total free amino acid content in the mycelium were 928.19 $mg\%$ in YM, 1060.53 $mg\%$ in CP, 764.83 $mg\%$ in GT, and the major free amino acid was lysine in YM, glutamic acid in CP and GT. Total free exo-amino acid contents were 659.75 $mg\%$ in YM, 954.55 $mg\%$ in CP, 838.69 $mg\%$ in GT, and the major in the all broths was glutamic acid Total amino acid derivatives content of the mycelium were in order of CP>GT>YM, and the major was cystathionine in YM, hydroxy proline in CP and GT. The major among exo-amino derivatives was hydroxy proline in the all broth. Exo-AIS content was in order of CP>GT>YM. Acid soluble polysaccharide content of the mycelium was GT($0.69\%$)>YM($0.39\%$)>CP($0.18\%$). The exo-polysaccharide content was in order of GT($0.87\%$)>CP($0.69\%$)>YM($0.09\%$). Alkali soluble polysaccharide content of the mycelium was in order of CP($5.21\%$)>GT($5.18\%$)>YM($4.56\%$), and exo-polysaccharide was in order of GT($6.79\%$)>YM($3.57\%$)>CP($3.01\%$). The alkali soluble polysaccharide eluted from mycelium cultivated in CP broth was supposed to polysaccharide(about 500,000 daltons) composed of hexose and uronic acid bounded with protein(below 10,000 daltons).
The convenient derivatization method of chiral amino alcohols as 9-anthraldimine Schiff base derivatives for chiral resolution was developed and the liquid chromatographic enantiomer separation of chiral amino alcohols as 9-anthraldimine derivatives was investigated on several coated and covalently bonded polysaccharide-derived chiral stationary phases (CSPs). In general, the performance of Chiralcel OD-H (or Chiralcel OD) (${\alpha}$ = 1.24-2.89), the coated CSP derived from cellulose derivative was superior to the other CSPs for resolution of 9-anthraldimine derivatives of several amino alcohols. The results of enantioseparation depending on the structure of 9-anthraldimine analytes like the steric bulky group and the polar moiety etc were discussed. The analytical method was applied to measure the enantiomeric purity of commercially available chiral amino alcohols. It is expected that the convenient analytical method will be very efficient for determination of enantiomeric purity of amino alcohols as 9-anthraldimine Schiff base derivatives with strong UV absorption.
A new convenient derivatization method of ${\alpha}$-amino acid esters as nitrobenzoxadiazole (NBD) derivatives for chiral resolution was introduced and the enantiomer separation of ${\alpha}$-amino acid esters as NBD derivatives was performed by normal HPLC using chiral columns based on polysaccharide derivatives. The NBD derivatives were readily prepared by stirring NBD-Cl and ${\alpha}$-amino acid methyl ester HCl with $NaHCO_3$ in ethanol. The performance of Chiralpak IA was superior to the other chiral stationary phases for enantiomer resolution of NBD derivatives of several ${\alpha}$-amino acid methyl esters. Owing to fluorescence detection as well as strong UV absorption, it is expected that the convenient analytical method developed in this study will be very useful for enantiomer separation of ${\alpha}$-amino acid esters as NBD derivatives on polysaccharide-derived chiral columns.
The chromatographic enantiomer separation of 9-anthraldimine derivatives of ${\alpha}$-amino acid methyl and ethyl esters on four polysaccharide based chiral columns was performed. The 9-anthraldehyde Schiff base derivatives of ${\alpha}$- amino acid esters were readily synthesized by stirring the ${\alpha}$- amino acid ester hydrochloride salts with 9-anthraldehyde in the presence of 1,8-diazabicyclo [5.4.0]undec-7-ene as a base and anhydrous $MgSO_4$. Chiralcel OD or Chiralcel OD-H showed the greatest enantiomer resolution of 9-anthraldimine derivatives of ${\alpha}$-amino acid methyl and ethyl esters. The L-enantiomers of all the analytes were preferentially retained on Chiralcel OD or Chiralcel OD-H. This analytical method was applied in the determination of optical purities of several commercially available D- or L-${\alpha}$-amino acid methyl esters.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.24
no.1
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pp.147-153
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1995
The cultured mycelial cells of Ganoderma lucidum was extracted by alkali, and then neutralized by acid. The extract was passed through the column of DEAE cellulose for more purification. The neutral fraction was concentrated and precipitated with 95% ethanol. The precipitate was lyophilized and then PSG(polysaccharides) was obtained. PSG was composed of 82.2% polysaccharide, 0.7% protein and 17.1% uronic acid. Sugar conjugates of its hydrolysates were produced using with fluorescent compound(7-amino-1,3-naphthalene disulfonic aicd : 7-AGA), and then fluorescent labeled sugar conjugates were separated by reverse phase high perfomance liquid chromatography. Hydrolysates of PSG were composed of sixteen amino acids and 95.7% glucose, 2.7% xylose, 1.6% fucose and tract amount of galactose and mannose. The immunomodulating effects of PSG on macrophage were perfomed using murine macrophage cell line ATCC TIB 71 cells. PSG augumented the phagocytic activity of TIB 71 cells against fluorescent latex beads.
Organic substances are released from phytoplankton cells during all phases of growth. The type and amounts of organic substance excreted and the effects of nutrient limitation are often highly species-specific. Dinoflagellate, Cochlodinium polykrikoides grown in batch culture produced an exopolysaccharide. Exopolysaccharide and intracellular polysaccharide concentrations increased as C. polykrikoides cultures progressed from exponential phase, through stationary phase, to declining phase. In the exponential phase, the concentration of exopolysaccharide was relatively low, but in the stationary phase, it showed a rapid increase which seemed to coincide with the depletion of nitrate from the medium. Of the 20 amino acids analyzed, proline dominated in the organic matter of all cultures ranging from 48.2 to 79.9 nmol L–1, and constituting the 20-90% of total amino acids, and followed by histamine varying from 0.7 to 47.5 nmol L–1. Leucine and cysteine were also abundant in the stationary phase. The release rates of exopolysaccharide and intracellualr polysaccharide were higher the end of stationary phase than in the exponential phase. Exopolysaccharide concentration per cell was more than two times higher during the end of stationary phase than that in exponential phase. C. polykrikoides produced extracellular polysaccharide at a rate of 47.04 pg cell–1 day–1.
The carpophores of three Korean mushrooms, Coriolus versicolor, Pleurotus ostreatus, and Lentinus edodes were respectively extracted with hot water and the extract were dialyzed through Visking tube. They were found to contain an antinumor activity against sarcoma 180 implanted in mice. The components of these aqueous extracts were found to be polysaccharide and protein by color reactions including anthrone and Lowry-Folin tests. The hydrolysis of the polysaccharide with 3% HCI-MeOH and trimethylsilylation yielded four monosaccharides : glucose, mannose, galactose and xylose which were identified by G. L. C. After hydrolysis of protein with 6N HCL, fourteen to seventeen amino acids including aspartic and glutamic acids were detected by an amino acid analyzer.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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