Alloxan에 의한 Amino acids의 spot test에 있어서, alloxan수용액에 lactose를 가해주면, alloxan 자신의 착색을 막을 수 있다. lactose를 포함하는 alloxan수용액은 매우 안정하여서, 실온에서 수 개월 동안 두어도 착색되지 않으며, lactose의 존재로 말미암아, alloxan과 amino acids와의 색반응은 조금도 영향을 받지 않았다. 이시약에 의한 amino acids의 spot test법은 ninhydrin에 의한 spot test보다 예민하고, 또 alloxan 또는 dimethylalloxan을 발색약으로 사용하는 paper chromatography법에 비해, proline (1 ${\gamma}$), hydroxyprolin (5 ${\gamma}$)를 확인할 수 있다는 장점을 가지고 있다.
당뇨병의 합병증 중 지질대사성 질환으로 유도되는 대사경로를 규명하고자 6주령의 흰쥐(Sprague-Dawley) 24마리를 3군으로 나누어 4주간 chemical pure diet로 사육하였다. 당뇨병을 유발하고자 alloxan을 20 mg/kg BW 또는 40 mg BW를 매주 1회 투여하였다. 혈당치를 측정하여 당뇨증상을 확인하였으며 혈청 및 간의 지질수준과 각 조직의 지방산 조성을 측정하여 당뇨병에 의한 지질대사의 변화를 비교 검토하였다. Alloxan 40 mg 투여군에서 심한 당뇨병 유발로 체중감소가 크게 나타났으며, 식이섭취량과 간중량/100 g BW도 다른 군에 비하여 유의적으로 높았다. 혈당의 변화는 alloxan 40 mg/kg BW 투여한 군이 다른 군에 비해 약 2배정도로 높게 나타나 당뇨병이 유발되었음을 확실하게 알 수 있었다. 혈청지질에서 cholesterol 함량은 alloxan 40 mg/kg BW 투여한 군에서 다른 군보다 다소 증가된 경향을 보였다. Triglyceride도 역시 alloxan 투여군에서 높은 경향으로 나타났다. 혈청 HDL-cholesterol은 군간의 유의적인 차이가 없었으며 HDL-/total cholesterol 비율도 군간에 유의적인 차이는 없었으나, 다른 군보다 alloxan 40 mg/kg BW을 투여한 군이 다소 높은 경향이었다. 간 지질에서 cholesterol 함량은 alloxan 40 mg/kg BW 투여군이 다른 군에 비해 유의적으로 낮았다. Triglyceride 함량은 군간에 유의적인 차이가 없었다. 각 조직의 인지질 지방산 조성을 보면 alloxan 40 mg/kg BW 투여군에서 lionleic acid는 증가하고 반면 arachidonic acid는 감소되어 그 결과 arachidonic/linoleic acid의 비율이 낮은 경향을 보였으며 특히 혈청과 비장에서는 그 경향이 뚜렷하여 유의적인 차이를 나타냈다. 이상의 결과를 종합하면, 당뇨병이 유도된 흰쥐에서 간의 중량 및 혈청의 지질이 증가되었고, 조직의 인지질에서 desaturation이 억제되었으므로 그로 인하여 지질대사에 관련된 합병증이 유도되는 것으로 판단되었다.
다시마의 열수출물이 당뇨병의 치료에 효과가 있는지를 알아보기 위하여 alloxan으로 처리하여 실험적으로 당뇨병을 유발한 후 glucose의 초기 인산화에 관여하는 glu-cokinase와 hexokinase의 활성을 살펴본 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. Alloxan 주사에 의해 체중과 공복시의 glucose 및 insulin 분비가 증가되었으나, 다시마 투여에 의해 공복시의 insulin 분비가 유의성있게 감소하였으며 체중과 공복시의 glucose의 유의성은 없었으나 대조군에 비하여 감소하였다. 2. Alloxan 주사에 의해 혈청중 glucosecl가 정상군에 비하여 현저하게 증가되었으나 다시마 투여에 의해 현저히 감소되었다. Insulin 치의 상승과 분비 지연도 다시마 투여군에서는 정상군과 유사한 경향을 보였다. 3. Glucokinase와 hexokinase의 활성은 alloxan 주사에 의해 현저히 감소되었으나, 다시마 투여에 의해 유의성있게 상승되었다. 이상의 결과로 다시마는 alloxan으로 유발된 당뇨병에서 glcuose 인산화 glucokinase와 hexokinase의 활성을 증가시키는 것으로 나타나 당뇨병의 치료에 효과가 있는 것으로 여겨진다.
Alloxan is a well known diabetogenic agent which destroys the beta-cell of the Langerhan's islet. The authors investigated the influence of the repeated infusion of glucose solution upon the toxicity of alloxan in the mice. The effects of glucose on the blood sugar content and the serum transaminase (S-GOT and S-GPT) activities in the rabbits treated with alloxan were also observed. The results were as follows: 1. The $LD_{50}$ of alloxan in mice showed a slight decrease by pretreatment with glucose for one or two weeks. 2. The elevated blood sugar level in rabbits induced by alloxan shelved a significant fall for the first 3 days by pretreatment with glucose. 3. The increased serum transaminase activities in rabbits induced by alloxan decreased for the first 3 days by pretreatment with glucose.
Alloxan is a diabetogenic agent which destroys the beta-cell of the Langerhan's islet of pancreas and it disturbs the secretion of insulin. It is known that alloxan interfers with the hepatic enzyme activity and some aspect of the other metabolism. The author attempted to investigate the influence of reserpine upon the serum transaminase activity, blood sugar and serum total cholesterol contents of rabbit treated alloxan. The results obtained were summarized as follows; 1. The serum GOT and GPT activity of alloxanized rabbit pretreated with reserpine showed marked decrease compared with alloxan control group. 2. The blood sugar level of alloxanized rabbit pretreated with reserpine showed lower than the alloxan control group. 3. The total cholesterol level of alloxanized rabbit pretreated with reserpine was lower than that of alloxan control group.
가시까치밥나무(Ribes diacanthum Pall.) 투여가 alloxan으로 유도된 당뇨 모델 마우스에서 혈당 저하 효과 및 혈청 지질에 미치는 영향을 관찰하였다. 마우스는 Normal 군, Alloxan 투여 대조군(Control 군), alloxan+가시까치밥나무 추출물(1 mg /kg B.W/day)(RDP-1), alloxan+가시까치밥나무 추출물(3 mg /kg B.W/day)(RDP-2) 군으로 나누어 실험하였다. 가시까치밥나무 투여군들은 14일 동안 RDP 추출물을 두 가지 농도로 경구 투여한 후 꼬리정맥으로 alloxan을 주입하여 당뇨를 유도하였다. RDP 추출물의 항산화 실험 결과, 총 폴리페놀 함량은 0.5 mg/g으로 분석되었다. 또한 식이 섭취량과 수분섭취량은 alloxan 투여군이 Normal 군에 비하여 유의적으로 증가하였고, 간과 신장의 무게 또한 Normal 군에 비하여 유의적으로 증가하였다. 혈당 개선 실험 결과, alloxan의 정맥주사에 의해 유도된 제1형 당뇨 마우스 모델에 있어서, RDP 추출물의 투여가 Control 군에 비하여 혈당의 상승을 크게 억제하였으며, RDP 추출물 농도 간에는 혈당 개선에 크게 차이가 나지 않았다. 혈액 분석 결과, 중성 지질 함량과 총 콜레스테롤 함량은 Normal 군에 비해 Control 군에서 다소 높아 유의적인 차이를 보였으며, RDP 추출물의 투여군들은 유의적으로 감소하는 경향을 보였다. HDL-cholesterol은 그룹 간의 유의적인 차이를 나타내지 않았지만, 혈청 AST 활성도와 BUN은 RDP 추출물 투여군에서 Control 군에 비하여 유의적으로 감소하였다. 본 실험에서는 insulin 함량과 인슐린을 분비하는 췌장 ${\beta}$-cell의 기능을 알 수 있는 C-peptide 함량은 측정되지 않아 보다 더 많은 연구가 필요하나, 이러한 결과로 보아 RDP 추출물은 혈당 개선을 위한 기능성 식품소재 혹은 산업적 응용가능성이 높은 유용한 소재인 것으로 사료된다.
본 연구는 췌장베타세포인 HIT-T15 세포를 이용하여 매실주정추출물(PME)의 alloxan에 의한 산화스트레스로부터의 세포보호, 인슐린 분비능 및 항산화 효소 활성을 평가하였다. PME는 alloxan에 의해 유발된 산화스트레스로부터 세포를 보호하여 세포생존율을 증가시켰다. PME는 세포막 손상지표인 LDH 방출을 억제하였고 $NAD^+$/NADH ratio를 유의적으로 증가시켜 세포사멸이 억제되어짐을 확인하였다. 또한 alloxan 단독처리군에 비해 250 ${\mu}g$/ml PME 처리군에서 인슐린 분비량이 유의성 있게 증가하였다. Alloxan과 PME를 동시에 처리하여 HIT-T15세포의 항산화효소 활성을 측정했을 때 산화스트레스에 의해 감소되었던 항산화효소 활성이 PME에 의해 보호되는 효과를 확인하였다. 이상의 연구결과로부터 PME는 세포괴사 및 DNA fragmentation을 억제하고 세포내 항산화효소 활성을 증가시켜 alloxan에 의해 유발된 산화스트레스로부터 췌장베타세포를 보호하고 이에 따른 인슐린 분비능 조절 효과가 있는 것으로 생각된다.
In this study, we assessed the effects of Se-methylselenocysteine (MSC) pretreatment on the antioxidant system in the pancreas and the development of alloxan-induced diabetes in rats. The rats were treated with MSC at a dose of 0.75 mg/rat/day for 2 weeks. The MSC-treated rats evidenced significantly increased glutathione content, GSH/GSSG ratio, and glutathione peroxidase (GPx) and glutathione reductase (GRd) activities in the pancreas. Diabetes was induced via alloxan injection. The alloxan-diabetic rats evidenced significantly reduced glutathione content and glucose 6-phosphate dehydrogenase (G6PD) activity and increased catalase activity in the pancreas, when measured 3 days after the alloxan injection. 2-week MSC pretreatment was shown to prevent the alloxan-induced hyperglycemia as well as changes in glutathione content, G6PD activity, and catalase activity. The results of this study indicate that the prevention of alloxan-diabetes by MSC pretreatment is associated with its effects on antioxidants in the pancreas, namely, the increase in cellular content and the reduction of glutathione by the facilitation of glutathione recycling induced via increased GPx, GRd, and G6PD activities.
In order to evaluate the mode of action of ginseng saponin. metabolic changes in the plasma of normal and aloxan-intoxicated rats were compared Normal groups were administered only ginseng saponin 0, 5, 50mg/kg for 16 days, but alloxan-intoxicated groups were administered alloxan 25mg/kg for 3 days in addition to ginseng saponin. (1) No significant change in the concentration of glucose, cholesterol, and triglyceride (TG) was observed in normal rats but great inhibitory effect, except elevation of TG, was observed in alloxan-intoxicated rats. However, blood urea nitrogen was elevated in both normal and alloxan- intoxicated rats by administration of ginseng saponin 50mg/kg, and it was considered to be due to the impaired kidney function caused by overdose toxicity. (2) In normal rats, COT and ALP actIn,its were not changed by administration of ginseng saponin but GPT activity was decreased significantly. In alloxan-intoxicated rats, ginseng saponin exerted inhibitory action on the elevation of COT, CPT and ALP activity. But administration of ginseng saponin Smghg was much more effective than administration of 50mg/kg. (3) There fore, we concluded that ginseng saponin has the adaptogenic activity showing little effect on normal metabolism but great preventive action on alloxan-intoxicated rats.
The antidiabetic effect of Amomum xanthioides(A. xanthioides) extract was investigated. Alloxan caused the hyperglycemia and hypoinsulinemia by a selective destruction of pancreatic ${\beta}$-cell. Pretreatment of mouse with A. xanthiodies extract for 2 days prior to alloxan administration completely protected hyperglycemia induced by alloxan. In addition, administration of A. xanthioides extract to alloxan-induced diabetic mouse significantly abolished hyperglycemia, hypoinsulinemia, and, the reduction of size and number of insulin-secreting cells induced by alloxan. Administration of A. xanthioides extract to alloxan-induced diabetic mouse rapidly increased pancreatic Reg gene expression to 7 days, and then decreased. In alloxan-diabetic mouse. Reg gene expression was increased at 3 days after alloxan injection, and sustained until 24 days. The present results indicate that A. xanthioides extract contains potentially effective components exhibiting both protection and treatment of alloxan-induced diabetes. These results suggested that the antidiabetic effect of A. xanthoides extract may be mediated through the regeneration of pancreatic ${\beta}$-cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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