Kim, Kyong-Ho;Kim, Hag-Sin;Oh, Young-Jin;Suh, Sug-Kee;Kim, Tae-Soo;Park, Ho-Kee;Park, Moon-Soo;Kim, Seok-Dong;Yeo, Up-Dong
Journal of Plant Biotechnology
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제2권3호
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pp.123-128
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2000
To enhance in vitro plantlet regeneration efficiency of soybean through embryogenesis, the culture conditions such as material part and size of immature seed, 2,4-D, pH and solidifying agents for somatic embryogenesis were investigated. Somatic embryogenesis was induced from the immature embryo, immature cotyledon and embryonic axis explants of the immature seed on MS medium supplemented with 2.0 mg/L 2,4-D. The highest rate (up to 22.9%) of somatic embryogenesis was obtained from the immature cotyledon, following embryonic axis and the immature embryo. The rate varied with the developmental stages of seed. The maximum rate (25.4%) of embryogenesis was obtained from 3-4 mm length of the seed (after 25 days of flowering). The optimum concentration of 2,4-D for embryogenesis was 10 mg/L. The optimum pH was at 5.8 and solidifying agent for medium was better with 0.4% gelrite than with agar. For rapid multiplication of shoot tips from the germinating somatic embryos, they were cultured on MS medium containing 2 mg/L indole-3-butyyic acid (IBA) and 1 mg/L 6-benzyladenine (BA). After then somatic embryos with one and three cotyledons were transferred to the growth regulator free medium. The medium exhibited the higher rate (ca. 50%) of development than the multiplication medium.
Kim, Min-Jeong;Lee, Sang-Hyun;Cho, Jang-Hee;Kim, Moo-Key;Lee, Hoi-Seon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제13권4호
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pp.522-528
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2003
The growth responses of Phellodendron amurense root-derived materials against seven intestinal bacteria were examined, using an impregnated paper disk agar diffusion method and spectrometric method under $O_2$-free condition. The biologically active constituent of the P. amurense root extract was characterized as berberine chloride ($C_{20}H_{18}NO_{41}Cl$) using various spectroscopic analyses. The growth responses varied depending on the bacterial strain, chemicals, and dose tested. At 1 mg/disk, berberine chloride strongly inhibited the growth of Clostridium perfringens, and moderately inhibited the growth of Escherichia coli and Streptococcus mutans without any adverse effects on the growth of three lactic acid-bacteria (Bifidobacterium bifidum, B. longum, and Lactobacillus acidophilus). The structure-activity relationship revealed that berberine chloride exhibited more growth-inhibiting activity against C. perfringens, E. coli, and S. mutans than berberine iodide and berberine sulfate. These results, therefore, indicate that the growth-inhibiting activity of the three berberines was much more pronounced as chloridated analogue than iodided and sulphated analogues. As for the morphological effect caused by 1 mg/disk of berberine chloride, most strains of C. perfringens were damaged and killed, indicating that berberine chloride showed a strong inhibition against C. perfringens. As naturally occurring growth-inhibiting agents, the P. amurense root-derived materials described could be useful as a preventive agent against diseases caused by harmful intestinal bacteria such as clostridia.
The aim of this research was to identify candidate probiotic lactic bacteria among indigenous dadih lactic isolates. Dadih is an Indonesian traditional fermented milk of West Sumatra which is fermented naturally. Viability of the strain is critical in determining the capacity of lactic bacteria to induce immune stimulation as well as to colonize in the intestinal tract. Therefore, LAB are proposed to exert health promoting or probiotic effects in human, such as inhibition of pathogenic microflora, antimutagenic, and the reduction of cholesterol levels. This manuscript reports in vitro probiotic properties of indigenous dadih lactic bacteria, especially some important colonization factors in GI tract, such as lysozyme, acid and bile tolerance. Bile Salt Hydrolase (BSH) activity, spectrum of bacteriocin, and antimutagenic activity of bacterial cells were also assessed. Twenty dadih lactic isolates were screened further for their tolerance to low pH, at pH 2 and 3 as well as their bile tolerance. There were ten isolates classified as acid and bile acid tolerant, and further screened for lysozyme tolerance, BSH activity. The spectrum of bacteriocin activity of isolates was assayed using cell-free neutralized supernatants by agar spot test against variety of pathogens. Lc. lactis subsp. lactis IS-10285, IS-7386, IS-16183, IS-11857 and IS-29862, L. brevis IS-27560, IS-26958 and IS-23427, Leu.mesen.mesenteroides IS-27526, and L. casei IS-7257 each has good survival rate at low pH values and in the presence of lysozyme, and short lag time in the presence of 0.3 % oxgall. Lc. lactis subsp. lactis IS-11857 and IS-29862 each has high BHS activity, Lc. lactis subsp. lactis IS-10285 and IS-16183 each had a positive spectrum of bacteriocin activity against E. coli 3301 and Lysteria monocytogenes ATCC 19112, while L. brevis IS-26958 has high BHS activity as well as positive spectrum of bacteriocin against E. coli 3301, Lysteria monocytogenes ATCC 19112, and S. aureus IFO 3060. All of the ten dadih lactic strains performed in vitro acid and bile tolerance, indicating a possibility to reach the intestine alive, and display probiotic activities.
31과 50종 인도산 식물체 84 시료와 12파 20종 아프리카산 식물체 27 시료의 메탄을 조추출물의 5종 장내세균(Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Lactobacillus acidophilus, Clostridium perfringens, Escherichia coli)에 대한 생육억제활성을 in vitro 혐기조건하에서 여지확산법으로 검정한 결과 억제활성은 공시세균과 식물체의 종류 및 부위에 따라 달리 나타났다. 인도산 식물체 시료중, Cymbopogon citratus 전부위, Ocimum basilicum 전부위, Madhuca indica 꽃 및 Aegle marmelos 잎 추출물이 Cl. perfringens에 대하여 강한 생육저해활성을 나타낸 반면, O. basilicum 전부위 추출물은 E. coli에 대하여 중간정도의 생육저해활성을 보였다. 그러나, 이들 식물체들은 공시 유산균의 생육에는 영향을 미치지 않았다. 이러한 결과로 부터 이들 열대식물들의 약리학적인 작용을 일부 설명할 수 있을 것으로 사료된다.
The biochemical and microbiological changes of the hard clam shikhae were studied during fermentation at $4-18^{\circ}C$ for 45 days. For preparation of the shikhae, the shucked hard clams were blanched into 2% saline solution and were soaked in seasoning solution before mixing with salt, cooked grain and spices. During fermentation, the initial pH steadily decreased from 5.0 to 4.6, but $NH_2-N$ and VBN concentrations increased to 127 mg/100 g and 27.0 mg/100 g, respectively. Alanine, taurine, glutamic acid, and aspartic acid concentrations increased, but arginine concentration decreased by fermentation. The major organic acids of the fermented shikhae were lactic acid, succinic acid and acetic acid. The major free sugar were maltose, glucose and fructose. The concentration of total viable cell ($2.1\times10^5$ CFU/g) and proteolytic bacteria ($1.2\times10^5$ CFU/g) increased to $4.4\times10^8$ CFU/g and $9.8\times10^7$ CFU/g, respectively until day 15 and then slightly decreased. The concentration of yeast ($2.4\times10^3$ CFU/g) increased to $1.6\times10^7$ CFU/g until day 25, but lactic acid bacteria ($5.0\times10^8$ CFU/g) increased to $5.0\times10^8$ CFU/g until day 9. Vibrio species was not detected on the TCBS agar during fermentation.
늙은 호박을 이용하여 기능성 있는 양갱을 제조하기 위하여 호박 페이스트의 양을 $87\%$(A제품), $90\%$(B제품), $93\%$(C제품)로 비율을 달리하여 한천, 설탕, 물엿, 소금을 이용한 3가지 호박양갱 제품을 제조하여 영양성분을 분석한 결과는 다음과 같다. 아미노산은 glutamic acid와 aspartic acid가 가장 높게 나타났고, 비타민 E는 C 제품이 A와 B제품에 비하여 유의적으로 높게 나타났다. 또한 구성 당 함량에서는 glucose와 galactose는 C제품이, fructose와 lactose는 A제품이 다른 제품에 비하여 유의적으로 높게 나타나 대조를 이루었다. 무기질 중 다량원소인 칼슘, 마그네슘, 칼륨과 나트륨은 C제품이, 미량원소인 아연과 망간은 A제품이 가장 높게 나타났다. 특히 칼륨의 함량이 다른 무기질에 비하여 가장 높게 나타났다.
인삼 (Panax ginseng C. A. Meyer) 캘러스 조직으로부터 분리한 원형질체를 DMSO가 O%에서 8%까지 여러 가지 농도로 첨가된 원형질체 배양배지 (1 mg/L 2,4-D, 4 mg/L NAA, 1 mg/L BAP, 0.4 M mannitol 및 0.8% agar가 첨가된 MS배지)에서 배양하였다. DMSO가 첨가되지 않은 배지에서 배양된 원형질체의 세포벽 재생률은 약 62%이고 세포분열빈도는 약 7%이었다. 반면에, 1% DMSO가 첨가된 배지에서 배양된 원형질체의 세포벽 재생률과 세포분열빈도는 각각 약 83%와 약 27%로 높게 나타났다. 그러나 배양된 원형질체의 세포활성은 배지에 첨가된 DMSO의 유무나 농도와는 관계없이 모든 배지에서 83∼88%로 차이를 보이지 않았다. 1% DMSO가 첨가된 배지에서 3일 동안 배양된 원형질체를 투과전자현미경으로 관찰하면 원형질막 근처에 평행으로 배열하고 있는 미소관들이 관찰되었다. 또한 원형질막 표면에는 세포벽 성분인 cellulose fibril들이 연결되어 다발을 형성하고 있는 것이 주사전자현미경으로 관찰되었다. DMSO가 첨가되지 않은 배지에서 배양된 원형질체에서는 이러한 전자현미경적 구조들이 관찰되지 않았다. 원형질체 배양배지에 첨가된 DMSO는 미소관편제센타 (MTOC)의 형성에 의하여 세포벽 재생과 세포분열을 유도하는 것으로 생각된다.
A total of 141 strains of Streptococcus mutans were isolated from dental plaques of 153 subjects. Eighty-two children with caries-experience, 18 caries-free children and their mothers were participated. All isolates were examined for their serotypes by immunodiffusion method with 7 reference sera and their antibiotic susceptibilities to 7 antibiotics by agar dilution method using 7 kinds of antibiotics, and were compared their results by caries experience (DMFT ratio) and by intrafamilial levels. 1. Isolation rate of Streptococcus mutans were greater in samples of carious teeth than those of sound teeth, and in mothers than in children. 2. Multiple serotypes of Streptococcus mutans were occasionally found in a single samples. 3. Of the total 141 isolates (83 isolates from children, and 58 from their mothers), type c isolates were most prevalent (63.8%). Type d,e and f were found, comprizing 14.9%, 10.6% and 6.4% respectively. Serotype g, a and untypable strain were also found but far lower frequencies (2.8-0.7%), and type b was detected. 4. These results suggest that there are no significant correlation among the distribution of serotypes, antibiotic susceptibilities, caries experience and intrafamilial relationships. 5. Most of isolates were susceptible to chloramphenicol (100%), penicillin (95.7%), ampicillin (94.3%), and gentamicin (92.2%), but about one-third isolates were resistant to cephaloridine (27%), streptomycin (33.3%) and kanamycin (47.6%), resulting that 91 strains (64.5%) among 141 isolates were resistant to one or more drugs used. 6. Of the 91 resistant strains, 20 different resistant patterns were observed, and the most frequently encountered patterns were KM, SM and CE.
A total of 59 lactic acid bacteria (LAB) strains were isolated from corn stover silage. According to phenotypic and chemotaxonomic characteristics, 16S ribosomal DNA (rDNA) sequences and recA gene polymerase chain reaction amplification, these LAB isolates were identified as five species: Lactobacillus (L.) plantarum subsp. plantarum, Pediococcus pentosaceus, Enterococcus mundtii, Weissella cibaria and Leuconostoc pseudomesenteroides, respectively. Those strains were also screened for antimicrobial activity using a dual-culture agar plate assay. Based on excluding the effects of organic acids and hydrogen peroxide, two L. plantarum subsp. plantarum strains ZZU 203 and 204, which strongly inhibited Salmonella enterica ATCC $43971^T$, Micrococcus luteus ATCC $4698^T$ and Escherichia coli ATCC $11775^T$ were selected for further research on sensitivity of the antimicrobial substance to heat, pH and protease. Cell-free culture supernatants of the two strains exhibited strong heat stability (60 min at $100^{\circ}C$), but the antimicrobial activity was eliminated after treatment at $121^{\circ}C$ for 15 min. The antimicrobial substance remained active under acidic condition (pH 2.0 to 6.0), but became inactive under neutral and alkaline condition (pH 7.0 to 9.0). In addition, the antimicrobial activities of these two strains decreased remarkably after digestion by protease K. These results preliminarily suggest that the desirable antimicrobial activity of strains ZZU 203 and 204 is the result of the production of a bacteriocin-like substance, and these two strains with antimicrobial activity could be used as silage additives to inhibit proliferation of unwanted microorganism during ensiling and preserve nutrients of silage. The nature of the antimicrobial substances is being investigated in our laboratory.
Objective: To find biological functions such as antibacterial and antioxidant activities in several tropical plants and to investigate the possibility of antibiotic substitute agents to prevent and treat diseases caused by pathogenic bacteria. Methods: Plants such as Poncirus trifoliata fruit (Makrut), Zingiber officinale Rosc (Khing), Areca catechu L. (Mak), Solanum melongena L. I (Makkhuayao), and Solanum melongena L. II (Makhurapro) were extracted by methanol, n-hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol and water. The free radical scavenging activities were measured using 2-diphenyl-2-picryl hydrazyl photometric assay. Antibacterial activities with a minimum inhibitory concentration (MIC) were observed by agar diffusion assay against pathogenic strains of Escherichia coli, Burkholderia sp., Haemopilus somnus, Haemopilus parasuis, Clostridium perfringens, and Pantoea agglomerans. Results: Poncirus trifoliata fruit methanol extract showed antibacterial activities against gram-negative and gram-positive pathogens. Additionally, this showed the strongest antibacterial activity against Burkholderia sp. and Haemopilus somnus with MIC $131{\mu}g/mL$, respectively. Areca catechu L. water extract showed antibacterial activities against Burkholderia sp., Haemopilus somnus, and Haemopilus parasuis. The MIC value for Haemopilus parasuis was $105{\mu}g/mL$ in this. Antioxidant activity of Zingiber officinale Rosc n-hexane extract showed 2.23 mg/mL effective concentration 50% ($EC_{50}$) value was the highest activity among tropical plants extracts. Total polyphenol content in Zingiber officinale Rosc methanol extract was $48.4{\mu}g/mL$ and flavonoid content was $22.1{\mu}g/mL$ showed the highest values among tested plants extracts. Conclusion: Taken together, these results suggest that tropical plants used in this study may have a potential benefit as an alternative antibiotics agent through their antibacterial and antioxidant activities.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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