Microbial community plays important roles in the culture environment of mud crab Scylla serrata. One of the environmental management efforts for the cultivation of S.serrata is by stabilizing microorganisms involved in nitrogen cycle process. The availability of dissolved inorganic nitrogen in its culture environment under a recirculating system closely relates to the nitrogen cycle, which involves both anaerobic and aerobic bacterial activities. Anaerobically, there are two major nitrogen compound degradation processes, i.e., denitrification and dissimilatory nitrate reduction to ammonium (DNRA). This study aimed to identify denitrifying and DNRA bacteria isolated from the recirculating cultivation of S. serrata. The water samples were collected from anaerobic filters called close filter system, which is anaerobically conditioned with the addition of varying physical filter materials in the recirculating mud crab cultures. The results showed that three denitrifying bacterial isolates and seven DNRA bacterial isolates were successfully identified. The phylogenetic analysis based on 16S rRNA gene of the denitrifying bacteria revealed that HIB_7a had the closest similarity to Stenotrophomonas daejeonensis strain MJ03. Meanwhile, DNRA bacterial isolate of HIB_92 showed a 100% similarity to Bacillus sonorensis strain N3, Bacillus vallismortis strain VITS-17, Bacillus tequlensis strain TY5, Geobacillus sp. strain DB24, Bacillus subtilis strain A1, and Bacillus mojavensis strain SSRAI21. This study provides basic information denitrifying and DNRA bacterial isolates identity which might have the potential to be applied as probiotics in aquaculture systems in order to maintain optimal environmental conditions.
Park, Kang-Gyun;Kim, Sang-Ha;Choi, Jong-Tae;Kim, Sunghyun;Kim, Young-Kwon;Yu, Young-Bin
Korean Journal of Clinical Laboratory Science
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v.49
no.4
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pp.407-412
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2017
The aim of this study was to shorten the time required for subculture and bacterial identification and obtain a simple and rapid identification method for new test methods for bloodstream infections. The following results were obtained using a mass spectrometer. In Vitek 2, 208 (81.8%) cases were well-identified and 45 isolates were not identified in blood cultures. Among 208 cases, 146 (57.5%) were Gram positive bacteria and 108 (42.5%) were Gram negative bacteria. In total, 233 were identified to the species level and 21 were identified to the genus level. The identification error was found to be Propionibacterium acnes as Clostridium bifermentans. The accuracy of Enterobacteriaceae, glucose non-fermentative bacilli (GNFB), and staphylococci were 81/83 (97.6%), 12/15 (80.0%), and 72/85 (84.7%), respectively. The concordance rate of Vitek 2 and Vitek MS by the direct method was 81.8% and 45 isolates were not identified. Most of the unidentified bacteria were Gram positive bacteria (N=37). The Gram positive bacteria were streptococci (14), coagulase-negative staphylococci (CNS) (11), enterococci (3), Staphylococcus aureus (2), Micrococcus spp. (2), Bacillus spp. (2) and Actinomyces odontolyticus, Finegoldia magna, and Peptostreptococcus spp. The results reporting time was reduced to 24~72 hours compared to the conventional method. The rate of identification of the aerobic and anaerobic cultures was similar, but the use of an anaerobic culture did not require a dissolution process, which could shorten the sample preparation time. These results suggest that the method of direct identification in blood cultures is very useful for the treatment of patients. In further studies, it might be necessary to further improve the method for identifying streptococci and CNS, which were lacking in accuracy in this study.
Lactobacillus brevis BK11 obtained from Baikkimchi was selected to study the effects of culture medium, initial pH, atmosphere composition, incubation temperature and time, and prebiotics on growth and production of antimicrobial substances. Growth and antimicrobial substances production of L. brevis BK11 were significantly higher in MRS broth than in BHI or M17 broth. The production of cell mass, lactic acid, and bacteriocin by BK11 strain was at maximum in MRS broth adjusted to pH 6.0. Aerobic and microaerobic conditions were favored cell growth and antimicrobial substances production than anaerobic condition. Biomass and lactic acid production and antimicrobial substances activity of BK 11 were significantly better at 30 and $37^{\circ}C$ than at $25^{\circ}C$. Growth of the strain BK11 entered the stationary growth stage at 24 h after inoculation, and decreased after 36 h. Antimicrobial activities of cell-free culture supernatant and bacteriocin solution were highest when cultured in MRS broth with an initial pH 6.0 for 24-30 h at $37^{\circ}C$. In addition, the highest cell number and lactic acid and bacteriocin production were recorded in the presence of 1 and 2% (w/v) fructooligosaccharide (FOS), however, inulin and raffinose did not affect biological and physicochemical characteristics and antimicrobial activities of L. brevis BK11 cultures. According to these results, production of antimicrobial substances by L. brevis KB11 was closely associated with cell density. Under optimal conditions for antimicrobial substances production, L. brevis BK11 effectively inhibited the growth of Helicobacter pylori ATCC 43504.
A Pseudomonas fluorescens was selected from mushrooms and studied in both batch and fed-batch cultures in order to get maximal biomass concentration. P. fluorescens is an aerobic bacterium and antagonistic to Pseudomonas tolaasii which causes blotch disease on the mushroom cap. P fluarescens and P. tolaasii were identified by Gram staining, gelatin liquefaction, oxidase test, etc. and were characterized by pigment production, temperature sensitivity, salt tolerance and rapid pitting test, etc., Celts of P. fluorescens well in medium containing 30g/L of glucose, whereas the growth was inhibited at the glucose levels at higher than 30g/L. The highest values of specific growth rate and productivity were obtained when using 10g/1 of yeast extract. Optimum concentrations of $NH_4Cl$ and ${(NH_4Cl)}_2SO_4$ for culture were found to be 1.0g/L and 0.1g/L respectively. Optimum concentration of $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ used as a sulfursource was 1.0g/L. It was also found that the cell concentrations reached the maximum level when grown on the medium containing 1.0g/L of $KH_2PO_4$ and 0.1g/L of $CaCl_2$. Also, the optimum culture conditions were $30^{\circ}C$ and pH 6.0. Cultivation of P. fluarescens at high dissolved oxygen (DO) concentration led to a decrease of bacterial productivity in batch culture. Maximum productivity was achieved at 40% DO concentration.
Park, Se-Jin;Jung, Haw-Jae;Shin, Hun-Kyu;Kim, Eu-Gene;Lim, Jong-Jun;Yoon, Ji-Woong
Journal of Korean Foot and Ankle Society
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v.13
no.2
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pp.150-155
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2009
Purpose: To help the empirical antibiotics selection in diabetic foot infection patients, we investigated prevalence of microorganisms and their antibiotics sensitivity results. Materials and Methods: Patients who came to our clinics to treat diabetic foot infections with deep ulceration and were followed up more than 6 months until complete recovery were adopted. From March 2006 to June 2009, there were 140 patients who corresponded with such a inclusion criteria. Wound cultures were done by deep tissue or bone debris at first visit to our clinics. Microorganisms which was documented by wound culture and most susceptible antibiotics by minimum inhibitory concentrations were surveyed retrospectively. Results: Microorganisms were confirmed in 113 cases (80.7%). In the other 27 cases (19.3%), there were no cultured microorganisms. In bacterial growth group, there were 72 cases (63.7%) of gram-positive bacteria and 41 cases (36.3%) of gram-negative bacteria. All of them were aerobic microorganisms and there were no anaerobic microorganisms. Methicillin-sensitive staphylococcus aureus was the most common pathogen and accounted for 35 cases (31.0%). As other common pathogens, there were Enterobacter cloacae (11 cases, 9.7%), pseudomonas aeruginosa (10 cases, 8.8%), Methicillin-resistant staphylococcus aureus (10 cases, 8.8%) and enterococcus faecalis (6 cases, 5.3%), and so on. Common susceptible antibiotics in gram positive microorganism were vancomycin (60 cases, 83.3%), teicoplanin (60 cases, 83.3%), nitrofurantoin (60 cases, 83.3%) and ciprofloxacin (53 cases, 73.6%). In gram negative ones, common susceptible antibiotics were imipenem (35 cases, 85.3%), piperacillin/tazobactam (33 cases, 80.5%) and gentamicin (31 cases, 75.6%). Conclusion: Methicillin-sensitive Staphylococcus aureus in gram positive and enterobacter cloacae in gram negative was the most common pathogen in each group. Ciprofloxacin and gentamicin might be adaptable as a first-line empirical antibiotics in infected diabetic foot patients.
Survival and stability of 19 bifidobacterial strains included 13 isolates from Korean infants against acid, bile acid and oxygen exposure were examined. Acid resistance of selected strains at pH values of 4.0, 3.0 and 2.0 was tested. Among the bifidobacterial strains tested, B. bifidum B3, B. longum D6, and B. adolescentis F1 exhibited higher viable cell counts exposed to acid whereas other strains had various results. The abilities of the strains to grow in the MRS broth containing 0.2% thioglycolic acid and 0.2% oxgall were tested and the tolerance of B. bifidum B3 and B. longum D6 to bile acid were higher than that of others. Even though in same species, the tolerance of tested strains to bile acid were variable. Stabilities of tested strains to oxygen exposure were variable and B. bifidum and B. longum strains showed relatively higher viable cell counts after 48 hours exposure to aerobic incubation. These results demonstrated that the survival and stability of bifidobacterial strains to acid, bile acid, and oxygen exposure were variable and strain-dependent. Due to their tolerant ability to environmental factors like acid, bile acid, and oxygen, B. bifidum B3 and B. longum D6 had good potential properties as probiotic cultures and may be useful for industrial application.
Two isolates of genus Acinetobacter were obtained from Jang-Baek waterfall in North Korea. Morphological characteristics of the isolated 2 strains were Gram-negative, aerobic and rod shape bacteria. Physiological and biochemical characterization of the isolated 2 strains were some different aspect from those of type strains. 16S rDNA sequence analysis showed that the two isolates shared 99.9% sequence similarity. Strains JB10 and $JB15^{T}$ were shown to belong to the Gammaproteobacteria and showed the highest levels of sequence similarity to Acinetobacter tandoii $4N13^{T}$ (97.3%), Acinetobacter haemolyticus $ATCC17906^{T}$ (97.2%), Acinetobacter johnsonii $DSM6963^{T}$ (97.2%), Acinetobacter junii $DSM6964^{T}$ (96.7%), Acinetobacter schindleri $LUH5832^{T}$ (97.0%) and Acinetobacter ursingii $LUH3792^{T}$ (96.6%). The major cellular fatty acid in Acinetobacter type strains and isolated strains included $C_{18:1}\;{\omega}9c\;and\;C_{16:1}\;{\omega}7c/C_{15:0}\;iso\;2OH$. Eventhough it was ascertained that the isolated strains were closely related to genus Acinetobacter, physiological and biochemical characteristics and the result of the isolated strains 16S rDNA analysis indicate some different aspects from those of type strains of genus Acinetohacter It is considered that the isolated JB10 (=KEMC 52-093) and $JB15^{T}\;(=KEMC\;52-094^{T})$ strains be new species of genus Acinetobacter. We name it as Acinetobacter koreensis sp. nov.
The non-ionic surfactant (NIS) Tween 80 was evaluated for its ability to influence invitro cumulative gas production, dry matter digestibility, cellulolytic enzyme activities, anaerobic microbial growth rates, and adhesion to substrates by mixed rumen microorganisms on rice straw, alfalfa hay, cellulose filter paper and tall fescue hay. The addition of NIS Tween 80 at a level of 0.05% increased significantly (P<0.05) in vitro DM digestibility, cumulative gas production, microbial growth rate and cellulolytic enzyme activity from all of substrates used in this study. In vitro cumulative gas production from the NIS-treated substrates; rice straw, alfalfa hay, filter paper and tall fescue hay was significantly (P<0.05) improved by 274.8, 235.2, 231.1 and 719.5% compared with the control, when substrates were incubated for 48 hr in vitro. The addition of 0.05% NIS Tween 80 to cultures growing on alfalfa hay resulted in a significant increase in CMCase (38.1%), xylanase (121.4%), Avicelase (not changed) and amylase (38.2%) activities after 36 h incubation. These results indicated that the addition of 0.05% Tween 80 could greatly stimulate the release of some kinds of cellulolytic enzymes without decreasing cell growth rate in contrast to trends reported with aerobic microorganism. Our SEM observation showed that NIS Tween. 80 did not influence the microbial adhesion to substrates used in the study. Present data clearly show that improved gas production, DM digestibility and cellulolytic enzyme activity by Tween 80 is not due to increased bacterial adhesion on the substrates.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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