Kamra, D.N.;Saha, Sudipto;Bhatt, Neeru;Chaudhary, L. C.;Agarwal, Neeta
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제16권3호
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pp.374-379
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2003
Four rumen fistulated Murrah buffaloes were used to study the effect of four diets differing in roughage to concentrate ratio on rumen biochemical changes, microbial enzyme profile and in sacco degradability of feed in a $4{\times}4$ Latin Square design. The animals were fed four diets consisting of 80:20, 70:30, 60:40 and 50:50 ratios of wheat straw and concentrate mixtures, respectively. Wheat straw and concentrate mixture were mixed with water (0.6 l/kg feed) and complete feed mixture was offered to the animals at 8:00 h and 16:00 h in two equal parts. The variation in pH of rumen liquor (difference of maximum and minimum during 0-8 h post feeding) increased with increasing level of concentrate mixture in the diet. There was no effect of diet composition on volatile fatty acids, total nitrogen and trichloro-acetic acid precipitable nitrogen in the rumen liquor, but ammonia nitrogen increased with increasing level of concentrate mixture in the ration. Major portions of all fibre degrading enzymes were present in the particulate material (PM) of the rumen contents, but protease was absent in PM fraction. The activities of micro-crystalline cellulase, acetyl esterase and protease increased with increase in the level of concentrate mixture, but the activities of other enzymes (carboxymethylcellulase, filter paper degrading activity, xylanase, $\beta$-glucosidase and $\beta$-xylosidase) were not affected. The in sacco degradability and effective degradability of feeds increased with increasing level of concentrate mixture in the ration.
본 연구에서는 우리나라와 일본의 담수어에서 분리된 운동성 aeromonads 7균주와 American Type Culture Collection (ATCC)에서 분양받은Aeromonas hydrophila 4균주의 표현형적 특성을 API20E와 APIZYM 방법으로 평가하고, 7종류의 항생제에 대한 최소 성장 억제 농도 (minimum inhibitory concentrations; MICs) 를 측정하였다. API20E 시험 결과 시험한 모든 균주는 (n=7) 운동성 aeromonads로 동정되었다. API20E시험에서lysine decarboxylase와mannitol, rhamnose, amygdalin, arabinose를 포함한 4종류의 carbohydrates의 산 생성은 균주에 따라 다른 반응을 나타내었다. APIZYM 시험을 이용한 효소 활성능을 평가한 결과, 모든 시험된 균주가valine arylamidase, cystine arylamidase, α-chymotrypsin, α-galactosidase, β-glucuronidase, α-glucosidase, α-mannosidase, α-fucosidase반응에서 음성 반응을 나타내었으나, 비록 그 효소 활성의 강도에서 차이는 있었으나alkaline phosphatase, esterase-lipase, leucine arylamidase, β-galactosidase, N-acetyl-β-glucosaminidase 모든 균주에서 양성 반응이 나타났다. 최소 성장 억제농도를 시험한 결과, 시험된 모든 균주는 ampicillin sodium (MIC>100㎍/ml) 에 내성을 가지며 chloramphenicol (MIC≤1.6㎍/ml) 감수성을 나타내었다. 그러나 1998년 이후에 분리된 3균주 (AC9804, AC0202, GMA0361)는 tetracycline (MIC=50㎍/ml) 모두 저항성이 있었으며, AC9804는 oxolinic acid (MIC=12.5㎍/ml), GMA0361는 kanamycin sulfate (MIC>100㎍/ml)와 streptomycin sulfate (MIC>100㎍/ml)에도 저항성을 나타내었다.
잿빛곰팡이병균(Botrytis cinerea)의 procymidone약제 저항성 발현 요인을 구명하기 위하여 procymidone 약제 저항성과 감수성 균주를 각각 세균주씩 선발하여 약제 저항성 검정과 아울러 세포구성물질의 함량 및 조성을 조사한 결과를 요약하면 아래와 같다. 1. 공시균주의 약제 저항성 검정 결과 저항성이 감수성균주에 비하여 1,000배 이상의 저항성이 발현된 것으로 확인되었다. 2. Monooxygenase저해제인 piperonyl butoxide와 esterase 저해제인 triphenyl phosphate를 PDA 배지에 처리한 후 균사생육을 조사한 결과 저항성과 감수성균주간에 차이가 없어 저항성은 균체의 내적요인에서 기인된 것으로 판단되었으며, 아울러 procymidone과 혼합 처리시 약효 상승 효과는 확인되지 않았다. 3. 스테롤 조성은 저항성과 감수성 균주 모두 유사하였으며, GC/MS 분석결과 분자량 428의 스테로이드계 화합물이 비슷한 함량으로 존재하였다. 4. 지질함량은 저항성이 감수성균주에 비하여 30% 정도 많았고, 지방산 함량은 저항성균주의 경우 palmitic acid와 stearic acid가 약 2.5배, oleic acid 2.9배, 그리고 linoleic acid가 공시균주의 주된 지방산으로 나타났으며, 2배 정도 많은 함량을 보였다. 5. 조키틴 함량은 감수성균주가 저항성에 비하여 0.11% 많았으나, 이의 가수분해산물인 N-acetyl glucosamine함량은 저항성균주가 감수성에 비하여 반응 24시간에 3배 그리고 48시간에서 2배 많았다. 따라서 잿빛곰팡이병균(Botrytis cinerea)의 procymidone 약제 저항성은 lipid 함량의 증가, fatty acid 함량의 증가 및 조성의 변화 그리고 키틴 전구물질인 GlcNAc 함량과의 복합적인 요인에 의하여 발현되었을 것으로 판단되었다.
Cellulolytic bacterial strains have been isolated from the faeces of wild (blackbuck, Antilope cervicapra; nilgai, Baselophus tragocamelus chinkara, Gazella gazella spotted deer, Axis axis and hog deer, Cervus porcinus) and rumen liquor of domestic (sheep, Ovis aries) ruminants. Five best cellulose degrading bacterial isolates (Ruminococcus sp.) were used as microbial feed additive along with buffalo rumen liquor as inoculum to study their effect on digestibility of feed and enzyme production in in vitro conditions. The bacterial isolate from chinkara (CHI-2) showed the highest per cent apparent dry matter (DM) digestibility ($35.40{\pm}0.60$), true dry matter digestibility ($40.80{\pm}0.69$) and NDF ($26.38{\pm}0.83$) digestibility (p<0.05) compared to control ($32.73{\pm}0.56$, $36.64{\pm}0.71$ and $21.16{\pm}0.89$, respectively) and other isolates at 24 h of incubation with lignocellulosic feeds (wheat straw and wheat bran, 80:20). The same isolate also exhibited the highest activities of fibre degrading enzymes like carboxymethylcellulase, xylanase, ${\beta}$-glucosidase and acetyl esterase. The bacterial isolate from chinkara (Gazella gazella) appears to have a potential to be used as feed additive in the diet of ruminants for improving utilization of nutrients from lignocellulosic feeds.
A tuber lectin from Arisaema jacquemontii Blume belonging to family Araceae was purified by employing a single step affinity chromatography using column of asialofetuin-linked amino activated silica beads and the bound lectin was eluted with 100 mM glycine-HCl buffer pH 2.5. The purified A. jacquemontii lectin (AJL) showed a single protein band with an apparent molecular mass of 13.4 kDa when submitted to SDS-polyacrylamide gel electrophoresis under reducing as well as non-reducing conditions. The native molecular mass of AJL determined by gel filtration on a Biogel P-200 column was 52 kDa and its carbohydrate content was estimated to be 3.40%. Thus AJL is a tetrameric glycoprotein. The purified lectin agglutinated erythrocytes from rabbit but not from human. Its activity was not inhibited by any of the mono- and disaccharides tested except N-acetyl-D-lactosamine having minimal inhibitory sugar concentration (MIC) 25 mM. Among the glycoproteins tested only asialofetuin was found to be inhibitory (MIC $125\;{\mu}g/mL$). A single band was obtained in native PAGE at pH 4.5 while PAGE at pH 8.3 showed two bands. Isoelectric focusing of AJL gave multiple bands in the pI range of 4.6-5.5. When incorporated in artificial diet AJL significantly affected the development of Bactrocera cucurbitae (Coquillett) larvae indicating the possibility of using this lectin in a biotechnological strategy for insect management of cucurbits. Larvae fed on artificial diet containing sub-lethal dose of AJL showed a significant decrease in acid phosphatase and alkaline phosphatase activity while esterase activity markedly increased as compared to larvae fed on diet without lectin. Out of various human cancer cell lines employed in sulphorhodamine B (SRB) assay, this lectin was found to have appreciable inhibitory effect on the in vitro proliferation of HCT-15, HOP-62, SW-620, HT-29, IMR-32, SKOV-3, Colo-205, PC-3, HEP-2 and A-549 cancer cell lines by 82, 77, 73, 70, 41, 41, 37, 29, 21 and 21% respectively.
An obligately aerobic bacterium, strain KOPRI $20902^T$, was isolated from a marine sediment in Ny-${\AA}$lesund, Spitsbergen Islands, Norway. Cells were irregular rods and motile with polar monotrichous flagellum. The optimum growth temperature was $17-22^{\circ}C$. Cells grew best in pH 7.0-10.0 and 3-4% sea salts (corresponding to 2.3-3.1% NaCl). The novel strain required $Ca^{2+}$ or $Mg^{2+}$ in addition to NaCl for growth. Sequence analysis of 16S rRNA gene revealed that the Arctic isolate is distantly related with established species (<92.4% sequence similarity) and formed a monophyletic group with Cellvibrio, which formed a distinct phylogenetic lineage in the order Pseudomonadales. Predominant cellular fatty acids [$C_{16:1}\;{\omega}7c/15:0$ iso 2OH (45.3%), $C_{16:0}$ (18.4%), ECL 11.799 (11.2%), $C_{10:0}$ 3OH (10.4%)]; DNA G+C content (37.0 mol%); nitrate reduction to nitrogen; absence of aesculin hydrolysis, N-acetyl-${\beta}$-glucosaminidase and esterase; no assimilation of arabinose, galactose, glucose, lactose, maltose, and trehalose differentiated the strain from the genus Cellvibrio. Based on the phylogenetic and phenotypic characteristics, Dasania marina gen. nov., sp. nov. is proposed in the order Pseudomonadales. Strain KOPRI $20902^T$ (=KCTC $12566^T$=JCM $13441^T$) is the type strain of Dasania marina.
토양으로부터 강력한 CAH activity를 갖는 균주를 분리하여, 생화학적, 배양학적, 전자현미경 동정을 한 결과, Bacillus sphaericus로 확인되었으며, 이를 B. sphaericus 366M-9로 명명하였다. 또한 이 균으로부터 최초로 cephalosporin-C deacetylase(CAH)를 분리 정제하였다. 정제수율은 약 7.5% 였으며, B. sphaericus 366M-9에서 분리한 CAH-9의 최적활성 온도는 $50^{\circ}C$였으며, 효소안정 온도구간은 30~$50^{\circ}C$이다. 또한 최적 활성 pH는 7.0이었으며, 효소안정 pH구간은 pH 6.0~8.0으로 90% 이상의 잔존 활성도를 나타내었다. 효소반응속도에 미치는 기질의 영향에서는 $K_{m}$ 값은 0.87 mM 이며,$ V_{max}$는1.22 unit/ml이었다.다.
Jo Qtae;Choy Eun-Jung;Park Doo Won;Jee Young-Ju;Kim Sung Yeon;Kim Yoon
Fisheries and Aquatic Sciences
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제5권4호
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pp.263-270
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2002
The Pacific oysters, Crassostrea gigas, were stressed with different concentrations of benzo(a) pyrene and depurated to determine the hemocyte lysosomal membrane stability and hydrolytic enzymatic activity as a biomarker candidate to the chemical, using NRR (neutral red retention) and API ZYM System, respectively. The membrane damage measured as NRR decrease was significant with the increase of chemical concentration and exposure time (P<0.05), providing a possible tool for biomarker. Interestingly, the control showed intrinsic stress probably due to captive life in the laboratory, and a recovering trend was also found during the depuration. The benzo(a)pyrene-exposed oysters showed increased enzyme activities in alkaline phosphatase, esterase (C4), acid phosphatase, naphthol-AS-BI-phosphohydrolase, $\beta$-galactosidase, $\beta$-glucuronidase, and N-acetyl- $\beta$-glucosaminidase. Of them, only two enzymes, acid phosphatase and alkaline phosphatase, showed some potential available for the generation of enzymatic biomarker in the oyster. The results are suggestive of the potential availability of the cellular and enzymatic properties as a biomarker. However, considering that a robust biomarker should be insensitive to natural stress coming from normal physiological variation, but sensitive to pollutants, a concept of intrinsic stress the animal possesses should be taken into consideration. This reflects the necessity of further research on the intrinsic stress affecting the cellular and enzymatic properties of the chemicalstressed oysters prior to using the data as a biomarker.
An alkaliphilic bacterium, Bacillus sp. strain BK, was found to produce extracellular cellulase-free xylanolytic enzymes with xylan-binding activity. Since the pellet-bound xylanase is eluted with 2% TEA from the pellet of the culture, they contain a xylan-binding region that is stronger than the xylan-binding xylanase of the extracellular enzyme. The xylanases had a different molecular weight and xylan-binding ability. The enzyme activity of xylanase in the extracellular fraction was 6 times higher than in the pellet-bound enzyme. Among the enzymes, xylanase had the highest enzyme activity. When Bacillus sp. strain BK was grown in pH 10.5 alkaline medium containing xylan as the sole carbon source, the bacterium produced xylanase, arabinofuranosidase, acetyl esterase, and $\beta$-xylosidase with specific activities of 1.23, 0.11, 0.06, and 0.04 unit per mg of protein, respectively. However, there was no cellulase activity detected in the crude enzyme preparation. The hydrolysis of agricultural residues and kraft pulps by the xylanolytic enzymes was examined at 50$^{\circ}C$ and pH 7.0. The rate of xylan hydrolysis in com hull was higher than those of sugarcane bagasse, rice straw, com cop, rice husk, and rice bran. In contrast, the rate of xylan hydrolysis in sugarcane pulp was 2.01 and 3.52 times higher than those of eucalyptus and pine pulp, respectively. In conclusion, this enzyme can be used to hydrolyze xylan in agricultural residues and kraft pulps to breach and regenerate paper from recycled environmental resources.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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