Micropropagation and adventitious root production via the culture of Polygonatum odoratum were performed. Stem segments of seedlings of Polygonatum odoratum were the most efficient explants for adventitious shoot formation compared to leaf and root segments. Exogenous cytokinin treatment was required for adventitious shoot formation. Among the cytokinin (BA, Kinetin and Zeatin) tested, BA was most effective for shoot formation from stem segments. Auxin (NAA or IBA) in combination with cytokinin significantly enhanced adventitious shoot formation. Twenty five percent of explants produced adventitious shoots on medium with 2.0 mg/L BAP alone, while 83% of explants produced adventitious shoots on medium with the combination of 2.0 mg/L BAP and 0.1 mg/L IBA. Rooting of adventitious shoots was achieved after transferring to 112 MS medium supplemented with 0.1 mg/L IBA and 0.5 mg/L zeatin. When stem segments were cultured on MS medium with various kinds of auxin (IBA, NAA and 2,4-D), adventitious roots were formed from callus. frequency of adventitious root formation was highest in 2,4-D than NAA and IBA. When roots were in clusters together with parental stem segments, growth of roots actively occurred in hormone-free MS liquid medium. The above results represent that possible application for the mass production of roots and plantlets through in vitro culture system of Polygonatum odoratum.
Leaf and petiole explants of kiwifruit were cultured on MT basal medium supplimented with 2,4-D, kinetin, NAA, and BA. Higher organogenic callus formation was observed on the media with NAA + BA than on the media added with 2,4-D + kinetin. Adventitious buds were formed only on media with NAA and BA. Leaf was better explant than petiole. When callus and adventitious buds were subcultured, shoot formation responsed best on medium with 0.1 mg/L NAA + 2.0 mg/L zeatin. When shoots were cultured on medium with 0.5 mg/L IAA + 0.1 mg/L BA after soaking for 1 hr at IBA solution, rooting was more effective than non-IBA treatment. Rooted shoots developed into normal plants.
An efficient system for the regeneration of adventitious shoots from in vitro cultured leaf sections of Lycium chinense Miller was developed and silent somaclones from the regenerants detected with RAPD method. Among the eight media tested (B5, SH, N&N, 1/2MS, MS, 3/2MS, GD and WPM), and four cytokinins (BA, kinetin, 2ip and zeatin) with different concentrations (1, 5, 10, 20, 30 and 40 $\mu{M}$), 1/2 MS medium supplemented with 20 and 30 $\mu{M}$ zeatin showed the best regeneration frequency (100% and 93.7%) and higher average number of shoots (9.0 and 9.4). All regenerants easily elongated after subculturing on 1/4MS without growth stimulants and produced spontaneous adventitious roots from their basal parts. With phenotypically normal 40 regenerants, RAPD analysis with 15 different random primers was performed to examine the cryptic somaclonal variants. No substantial differences in banding patterns were found in the amplified polymorphic DNAs implying no DNA changes during dedifferentiation into adventitious shoots. However, one (OPF-4) of the 15 primers detected silent somaclonal variation in one regenerant in which two different polymorphic bands did not appear when compared with the rest regenerants. The results indicate that regenerantion via intervening callus phase can be used to establish true-to-type planting stocks for homogeneous population.
When the leaves, roots and stem segments of seedling of Polygonatum odoratum were cultured on Murashige and Skoog medium with 2.0mg/l BAP, stem segments were the most efficient explants for adventitious shoot inductino. To observe the efficient combination of growth regulators on the adventitious shoot formation , stem segments were cultured on MS medium with various kinds of cytokinins (BAP, kinetin, zeatin). From this experiment, cytokinin treatement was prerequisite for theadventitious shoot formatino,especially BAP was the most effective. Auxin (NAA or IBA) in combination with cyotokinin highly enhanced the adventitious shoot formation. Twenty five percents of explants produced the adventitious shoots on medium with 2.0mg/l BAP solely, while 83% of explants produced the adventitious shoots on medium with 2.0mg/l BAP and 0.1mg/l IBA. Root formationform adventitious shoot was promoted after transfer to 1/2 MS medium supplemented with 0.1mg/l IBA and 0.5mg/l zeatin, thereafter the plantlets with shoots and roots were cultured on 1/2MS medium lacking growth regulators. When the stem segments were cultured to MS medium with 1.0mg/l 2,4 NAA and IBA , yellow and nodulous cali were formed from the stem segments which were developed into adventitious roots. These roots were actively grew after transferred to MS liquid medium lacking growth regulators.
Lilium formolongi 'Fl August' plantlets with scale-leaves and scale-bulb were treated at 10, 15, 20, $25^{\circ}C$ for 15, 30, or 45 days and planted in February, March, April and May. In the April planting, flowering percentage was below 10% and in the May planting no flowering occurred. Sprouting and flowering percentages were lower at the late planting times. Days to flowering of the April planting was 110.8 days compared to 128 days for the February planting. Plant height and numbers of leaves were reduced to 7.2 in May planting, compared to 40.5 leaves in February planting, and almost no flowers emerged in either the April or May plantings. Plantlets exposed to 10 or $15^{\circ}C$ flowered at 80 percent or higher at all treatment durations, but at 20 or $25^{\circ}C$ flowering percentages were lower, with 30% or less in the $25^{\circ}C$ treatment. In the $15^{\circ}C$ treatment days to flowering were less than 100 days, while the number of flowers and flower bud differentiation were greatest in the $15^{\circ}C$ treatment. Cytokinin and auxin were analyzed in bulblets grown at 15, 20 and $25^{\circ}C$. T-zeatin content was three times greater in the $15^{\circ}C$ treatment than at $25^{\circ}C$, but the content of indoleacetic acid (IAA) was less at $15^{\circ}C$ than at 20 and $25^{\circ}C$. In the $15^{\circ}C$ treatment, T-zeatin content was about twice the IAA content in the scale- bulblet. The auxin and cytokinin balance may affect flower bud differentiation. $15^{\circ}C$ with 30 days was most effective for flowering in scale-bulblet and planting of February and March were effective for flowering too.
The in vitro regeneration and genetic transformation systems in hot pepper(Capsicum annuum L.) have not been routinely available, which has been a major limiting factor in the application of new genetic manipulations. An efficient procedure to regenerate whole pepper plants and to generate transgenic plants expressing a foreign gene was established. A relatively high frequency of plant regeneration was observed when hypocotyl and cotyledon explants were cultured on MS medium supplemented with NAA 0.1 mg/L plus zeatin 2.0 mg/L or IBA 10.0 mg/L plus BAP 1.0 mg/L. Addition of AgNO$_3$5 $\mu$M to these media improved the regeneration frequency up to 8%. For plant transformation, hypocotyl and cotyledon explants of hot pepper were precultured on shoot induction media without kanamycin added for 2 days, and then cocultured with Agrobacterium tumefaciens pDY183 for 2 days. Putative transformants were obtained from selection media containing 100 mg/L kanamycin sulfate and 500 mg/L carbenicillin. Putatively selected transformants were confirmed by amplification of selectable marker genes (ADA and NPT II) by polymerase chain reacion. Successful transcripts of ADA gene were detected by Northern blot analysis. Enzyme activity of ADA was also examined by spectrophotometric analysis, and expression of ADA gene in hot pepper suggests the potential application of ADA gene as a selectable marker in plants.
Apical meristems of Wasabia japonica were cultured on Murashige and Skoog's medium supplemented with cytokinins alone or together with 1.0 mg/L IAA. Shoot initials could be induced from leaf primordia on apical meristems. Calli and roots were formed on the medium containing cytokinins and 1.0 mg/L IAA in combination after 30 days of culture, but there were no callus proliferation. Shoot organogenesis began after 60 days of culture and these small shoots elongated when transferred to a medium containing 1.0 mg/L BA or kinetin. Shoots were formed directly without callus induction from apical meristems all the explants on the medium containing cytokinins variously, and most of the shoots proliferated multiple shoots which could be divided to obtain plantlets. Shoot multiplication rate in response to cytokinins was best on the medium containing 1.0 mg/L BA or 2.0 mg/L zeatin. Divided plantlets rooted well on MS medium containing 0.01 mg/L IBA after 15~30 days of subculture and the rooted plantlets developed into whole plants with multiple shoots. After rooting, the regenerated plants were washed and transferred to the pots containing sterilized soil.
Kim, Seung-Heui;Song, Gi-Cheol;Park, Jeong-Gwan;Park, Moo-Yong
Korean Journal of Environmental Agriculture
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v.25
no.4
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pp.352-358
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2006
We investigated the mechanism on occurring of briny injury in four fruit species (apple, pear, grape, peach). Briny injury of apple, pear, peach, and grape was induced by the foliar splay of saline solutions. Browning symptom was initiated one hour after the spray of 3% NaCl in apple, pearl and peach trees. while two hour were needed for grape, but the latter developed the symptom faster than the formers. Foliar spray of 3% NaCl resulted in 4-fold increase in ethylene production 24 h after the spray, and the production was returned to early stage rate after 72 h. Ethylene production of control was nearly constant with slight decrease after 4 h. Browning and defoliation response to the spray of 3% NaCl on lower side were not different from the spray on both sides regardless of fruit species, while no injury symptoms occurred by the spiny on upper side. In saline damage for treated date, lateral bud was only germinated in apple at 30 July. A shoot apex was 100% grew in all fruit tree. In result for hormonal content of leaf and shoot apex, control was high t-zeatin content in leaf. However, IAA and ABA content was increasing in high saline concentration.
Cacalia firma recently has been used increasingly as leaf vegetables but endangered in natural forest. In this work, we established the plant regeneration via adventitious shoot formation from petiole segments of seedling and in vitro plantlets. Wounding of seed coats and $GA_3$ treatments were effective to induce in vitro germination of seeds, whereas, seed did not germinate at all without these treatment. When cotyledon, leaf, petiole, and root segments of seedling were cultured on medium with 2 $mg{\cdot}L^{-1}$ benzyl adenine (BA) and 0.5 $mg{\cdot}L^{-1}$ naphthaleneacetic acid (NAA), petiole segments showed highest number of shoots per explant among the other segments. Among the various kinds of cytokinins, BA, isopentyl adenine (2-ip), kinetin, zeatin, thidiazuron (TDZ), TDZ and BA treatments were effective to induce high frequency of adventitious shoot formation from petiole segments of in vitro propagated plants. NAA stimulated the frequency of adventitious shoot formation but not for number of adventitious shoots per explants compared to TDZ or BA treatment alone. Most of adventitious shoots were developed directly from surfaces of explants. Adventitious shoots were transferred on medium with IBA for root formation, thereafter the plantlets were successfully transferred to soil.
This study was carried out to find the effects of plant growth regulators on callus formation, rooting and shooting from cotyledon explant in oriental me]on. Various combinations of 0.1 mg/L auxins (IAA, NAA) and 0.5, 1.0. 1.5, 2.0 mg/L cytokinins (BA, kinetin, zeatin) were treated to the MS basal medium, respectively. Callus was induced mort effectively as 2,437.0 mg (FW)/explant in MS medium supplemented with 0.1 mg/L NAA and 2.0 mg/L BA, but that was non-embryogenic callus as colored yellow white and broke easily. Root was induced most effectively at a frequency of 98.0% in MS medium supplemented with 0.1 mg/L NAA and 0-5 mg/L kinetin. Shoots formed on cut part of vein at a frequency of 98.0% in MS medium supplemented with 0.1 mg/L IAA and 2.0 mg/L BA, that were multiple shoots. in case of its concentration, BA and lower concentration of IAA and NAA (0.01 and 0.05 mg/L). respectively. shooting ratio was not increased. The result of treatment with BA 0-5 mg/L and IAA 0.1 mg/L, callus induced at a week, and shoot start to form multiple shoots about 3 weeks after inoculation. After 2 times subculture as 2 weeks intervals, divided shoots rooted and developed into intact plantlets at 10 weeks and then that grown normally on pots after acclimatization.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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