The endosymbionts of 4 strains of Acanthamoeba(KA/E9, KA/E21, KA/E22, and KA/E23) isolated from the infected corneas of Korean patients were characterized via orcein stain, transmission electron microscopic examination, and 16S rDNA sequence analysis. Double membrane-bound, rod-shaped endosymbionts were distributed randomly throughout both the trophozoites and cysts of each of Acanthamoeba isolates. The endosymbionts of KA/E9, KA/E22, and KA/E23 were surrounded by electron-translucent areas. No lacunae-like structures were observed in the endosymbionts of KA/E21, the bacterial cell walls of which were studded with host ribosomes. Comparative analyses of the 16S rDNA sequences showed that the endosymbionts of KA/E9, KA/E22 and KA/E23 were closely related to Caedibacter caryophilus, whereas the KA/E21 endosymbiont was assigned to the Cytophaga-Flavobacterium-Bacteroides(CFB) phylum. In the 4 strains of Acanthamoeba, the hosts of the endosymbionts were identified as belonging to the Acanthamoeba castellanii complex, which corresponds to the T4 genotype. Acanthamoeba KA/E21 evidenced characteristics almost identical to those of KA/E6, with the exception of the existence of endosymbionts. The discovery of these endosymbionts from Acanthamoeba may prove essential to future studies focusing on interactions between the endosymbionts and the amoebic hosts.
Areca palm yellow leaf (AYL) disease caused by the 16SrI group phytoplasma is a serious threat to the development of the Areca palm industry in China. The 16S rRNA gene sequence was utilized to establish a rapid and efficient detection system efficient for the 16SrI-B subgroup AYL phytoplasma in China by loop-mediated isothermal amplification (LAMP). The results showed that two sets of LAMP detection primers, 16SrDNA-2 and 16SrDNA-3, were efficient for 16SrI-B subgroup AYL phytoplasma in China, with positive results appearing under reaction conditions of 64℃ for 40 min. The lowest detection limit for the two LAMP detection assays was the same at 200 ag/μl, namely approximately 53 copies/μl of the target fragments. Phytoplasma was detected in all AYL disease samples from Baoting, Tunchang, and Wanning counties in Hainan province using the two sets of LAMP primers 16SrDNA-2 and 16SrDNA-3, whereas no phytoplasma was detected in the negative control. The LAMP method established in this study with comparatively high sensitivity and stability, provides reliable results that could be visually detected, making it suitable for application and research in rapid diagnosis of AYL disease, detection of seedlings with the pathogen and breeding of disease-resistant Areca palm varieties.
Li Na;Liu Xiao Hua;Zhou Jie;Li Yu Xiang;Zhao Ming Wen
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.12
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pp.1940-1946
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2006
The influence of environmental conditions on the ganoderic acid (GA) content in the fungus Ganoderma lucidum was investigated using a one-factor-at-a-time design and orthogonal design. Among the various medium components examined, sucrose, soybean powder or peptone, ferrous sulfate, and pH 6.0 were the most suitable carbon source (factor A), nitrogen source (factor B), mineral source (factor C), and initial pH (factor D), respectively, for the GA content in the one-factor-at-a-time design. According to the orthogonal design, the order of effect for the four factors on the GA content was A>C>D>B. The best level of factor A was $A_2$ (sucrose) with a value of +0.34 mg/100 mg DW. The optimal treatment combination was $A_2B_1C_3D_1$ with which the GA content reached up to 2.63$\pm$0.011 mg/100 mg DW. The interactions between the mineral ion and the nitrogen source, and the mineral ion and the pH were both highly significant (P<0.01). The highest interaction effect was ($B_2{\times}D_2$) with a value of +0.19 mg/100 mg DW, which was higher than the level effect value for $B_2$ (peptone) and D$_2$ (pH 5.0). Therefore, the results proved that interactions between factors cannot be ignored. The results also indicated the importance of the interactions between the factors, which may help to understand the metabolic pathway leading to triterpene biosynthesis and the expression and regulation of the key enzymes involved.
To compare two different schemes, continuous scheme (CS) and discontinuous scheme (DCS), of once-weekly ovum pick up (OPU) with ultrasound-guided follicular puncture technique, Holstein heifers were randomly divided into two groups of five. After characterization of their two normal estrous cycles, the heifers were subjected to consecutive 20 weeks of once-weekly OPU under two schemes: the CS (one week interval between continuous OPU, total 100 OPU sessions performed) and the DCS (OPU fixed to the day 3 and day 10 of each estrus). Then, the status of ovaries and artificial insemination results were observed. On oocyte yield, the total number of punctured follicles using DCS was lower than that using CS, but the mean numbers of punctured follicles and recovered oocytes per session were higher in DCS than CS group. So the total number of recovered oocytes was similar in both groups. There were also no differences in the quality of recovered oocytes, nor in the developmental ability of oocytes fertilized in vitro between groups. The heifers in the DCS group showed regular estrous cycles with stable estrous signs through the periods of before, during, and after OPU, while those in CS group showed longer estrous cycles and less estrous signs during and/or after OPU compared with before period. Furthermore, the mean number of inseminations required for obtaining pregnancy after completion of the experiments was lower in DCS than CS group. The research demonstrates that similar quantity and quality oocytes can be achieved, and the side effects on donors are lower in DCS that needs fewer OPUs than CS group, and DCS is superior to CS.
The origin of domestic donkeys in China has been controversial. To clarify the origin of Chinese domestic donkeys, we investigated the partial mitochondrial D-loop sequences of 126 samples from 12 native breeds. The results revealed two mitochondrial origins, lineage Somali and lineage Nubian of African wild ass detected in Chinese domestic donkeys. Lineage Somali was predominant in Chinese domestic donkey breeds. The pattern of genetic variation in ass mtDNA D-loop sequences indicated that the two lineages Somali and Nubian from China had undergone population expansion events. In a combined analysis of lineages Somali and Nubian between previously published sequences from other countries/regions and sequences of Chinese domestic donkeys, the results indicated that the two lineages of Chinese domestic donkeys were from Africa and supported the African maternal origins of Chinese domestic donkeys. There was no obvious geographical structure in Chinese domestic donkey breeds, but the population showed abundant mtDNA diversity. The spread routes of Chinese domestic donkeys were also discussed.
Inhibitor of DNA binding 1 (Id1) plays an important role in genesis and metastatic progression of prostate cancer. We previously reported that down regulation of Id1 by small interfering RNA could inhibit the proliferation of PC3 cells and growth of its xenografted tumors. Curcumin, the active ingredient of turmeric, has shown anti-cancer properties via modulation of a number of different molecular regulators. Here we investigated whether Id1 might be involved in the anti-cancer effects of curcumin in vivo and in vitro. We firstly confirmed that curcumin inhibited cell viability in a dose-dependent fashion, and induced apoptosis in PC3 cells, associated with significant decrease in the mRNA and protein expression of Id1. Similar effects of curcumin were observed in tumors of the PC3 xenografted mouse model with introperitoneal injection of curcumin once a day for one month. Tumor growth in mice was obviously suppressed by curcumin during the period of 24 to 30 days. Both mRNA and protein levels of Id1 were significantly down-regulated in xenografted tumors. Our findings point to a novel molecular pathway for curcumin anti-cancer effects. Curcumin may be used as an Id1 inhibitor to modulate Id1 expression.
Background: The p53-binding protein 1 (TP53BP1) gene may be involved in the development of cancer through disrupting DNA repair. However, investigation of associations between TP53BP1 rs2602141 A/C polymorphism and cancer have yielded contradictory and inconclusive outcomes. We therefore performed a meta-analysis to evaluate the association between the TP53BP1 rs2602141 A/C polymorphism and cancer susceptibility. Materials and Methods: Published literature from PubMed, Medline, the Cochrane Library, EMbase, Web of Science, Google (scholar), CBMDisc, Chongqing VIP database, and CNKI database were retrieved. Pooled odds ratios (ORs) with 95% confidence intervals (CIs) were calculated using fixed or random-effects models. Publication bias was estimated using funnel plots, Begg's and Egger's test. Results: A total of seven studies (3,018 cases and 5,548 controls) were included in the meta-analysis. Our results showed that the genotype distribution of TP53BP1 rs2602141 A/C was not associated with cancer risk overall. However, on subgroup analysis, we found that TP53BP1 rs2602141 A/C was associated with cancer risk within an allele model (A vs C, OR=1.14, 95%CI: 1.01-1.29) and a codominant model (AA vs CC, OR=1.36, 95%CI: 1.06-1.74) in Asians rather than in Caucasians. Subgroup analysis by cancer type, genotype, and with or without adjustment for controls showed no significant association. Conclusions: The findings suggested an association between rs2602141 A/C polymorphism in TP53BP1 gene and increased risk of cancer in Asians.
Yang Young-Yell;Zhao Xin-Qing;Jin Ying-Yu;Huh Jung-Hyun;Cheng Jin-Hua;Singh Deepak;Kwon Hyung-Jin;Suh Joo-Won
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.6
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pp.896-900
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2006
Cytokinin has been known to act as a plant hormone to promote cell division and function in diverse processes in plant growth and development. Besides being produced in plants, it is also produced by various bacteria and fungi; however, its ecological significance is still unclear. In this report, we present an interesting finding that transzeatin riboside (tZR), a naturally occurring cytokinin compound, increased antibiotic production in many different streptomycetes, including Streptomyces coelicolor Ml3O, S. pristinaespiralis ATCC 25486, S. violaceoruber Tu22, S. anfibioticus ATCC l1891, and S. griseus IFO 13350. In vitro plate assays showed that the addition of 100 $\mu$M tZR increased the growth inhibition of Pseudomonas syringae pv. syringae, a plant pathogen, by S. griseus, a streptomycin producer. We suggest that cytokinin could act as a signaling molecule for antibiotic production in streptomycetes, a group of rhizosphere bacteria.
Ji, Kui-Xian;Chi, Feng;Yang, Ming-Feng;Shen, Shi-Hua;Jing, Yu-Xiang;Dazzo, Frank B.;Cheng, Hai-Ping
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.20
no.2
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pp.238-244
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2010
Rhizobia are well-known for their ability to infect and nodulate legume roots, forming a nitrogen-fixing symbiosis of agricultural importance. In addition, recent studies have shown that rhizobia can colonize roots and aerial plant tissues of rice as a model plant of the Graminaceae family. Here we show that rhizobia can invade tobacco, a model plant belonging to the Solanaceae family. Inoculation of seedling. roots with five GFP-tagged rhizobial species followed by microscopy and viable plating analyses indicated their colonization of the surface and interior of the whole vegetative plant. Blockage of ascending epiphytic migration by coating the hypocotyls with Vaseline showed that the endophytic rhizobia can exit the leaf interior through stomata and colonize the external phyllosphere habitat. These studies indicate rhizobia can colonize both below- and above-ground tissues of tobacco using a dynamic invasion process that involves both epiphytic and endophytic lifestyles.
The purpose of the study was to determine the effects of autophagy related gene Beclin1 at different levels of expression on the sensitivity of cisplatin-resistant ovarian cancer cells (SKOV3/DDP) to different chemotherapeutics. In pSUPER-Beclin1 transfected cells, real-time fluorescence quantitative RT-PCR and Western blot analysis showed that expression was significantly inhibited. Flow cytometry revealed that the mean fluorescence intensity (MDC), reflecting autophagy, and cells in the G0/G1 phase were markedly reduced. When compared with the blank control group, inhibition of Beclin1 expression in SKOV3/DDP cells not only increased the rate of apoptosis following treatment with chemotherapeutics, but also increased the sensitivity. These findings suggest that Beclin1 expression plays an important role in chemotherapeutic agent-induced death of SKOV3/DDP cells. Inhibition of autophagy related gene Beclin1 expression in SKOV3/DDP cells may increase the rate of apoptosis and elevate the sensitivity to chemotherapeutics.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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