이 연구는 재래방법과 비교하여 수율이 높고 품질이 향상된 효모 자가분해들의 제조방법을 연구하는데 그 목적을 두었다. 제빵용 생 효모에 glucanase와 protease의 복합효소를 작용시킨 다음, 10,000 psi의 고압으로 균질하면 약 85.3%의 효모 세포벽이 파손되었다. 세포벽이 파손된 효모를 사용하여 자가분해 시키는데 가장 적당한 조건을 반응 표변방법(RSM)을 이용하여 조사한 결과는 pH 7.0, 온도 $30^{\circ}C$ 에탄올 4%, 소금 3%이었다. 세포벽이 파손된 효모를 위와 같은 최적조건에서 3일간 분해시켜 얻은 효모 자가분해물의 수율은 2.6배 향상되었으며, 총 아미노산의 함량도 현저히 증가(2.8배)하였다. 그리고 관능적인 품질도 재래방법으로 제조된 시료보다 고기 향미가 많고, 이미-이취가 현저하게 적어서 전체인 기호도에서도 상당히 우수한 것으로 평가되었다.
Lactobacillus acidophilus A12 was isolated from chicken feces for use as an immunostimulating livestock probiotic. The purpose of this study was to optimize the production of L. acidophilus A12 using response surface methodology (RSM). Initially, the influence of growth medium was studied in terms of carbon sources (glucose, fructose, lactose, glycerol, sucrose, ethanol, and mannitol), nitrogen sources (beef extract, yeast extract, malt extract, and tryptone), and inorganic salts ($CaCl_2$, $MgSO_4$, $KH_2PO_4$, $(NH_4)_2SO_4$, $FeSO_4$, and NaCl). Through one factor-at-a time experiment, lactose, yeast extract, and $CaCl_2$ were determined to be the best sources of carbon, nitrogen, and inorganic salt, respectively. The optimum composition was found to be 17.7 g/L lactose, 18.6 g/L yeast extract, and 0.9 g/L $CaCl_2$. Under these conditions, a maximum cell density of 9.33 Log CFU/mL was produced, similar to the predicted value.
A varient strain of budding yeast, Hansenula anomala B-7 which had been identified to be highly resistant to cadmium ions, were observed by transmission electron microscopy. It was shown that the cells accumulated excess amounts of cadmium ions throughout inside the cell rather than on the cell surface. The cell growth in response to cadmium or heat shock stress has also been investigated. It was observed that the cells precultured in the presence of 500 $\mu$ g/ml of Cd ions grew slower than those precultured at 1, 000 $\mu$ g/ml of the metal ions, when they were cultivated in the media containing 1, 000 $\mu$g/ml of the metal ions. Heat shock, however, stimulated the cell growth transiently, when the cells were allowed to grow in the presence of 1, 000 $\mu$g/ml of the metal ions. But the cells given heat shock for more than 100 min received permanent damage to growth. Effects of both stresses on budding rate was also examined. It revealed that the stresses did not change the budding ratio much, which was contradictory to that observed from the same budding yeast, Saccharomyces cerevisiae. Furthermore, the cells treated with 1, 000 $\mu$g/ml of the metal ions not only induced, but also switched off the expression of several new proteins. Some of the cadmium stress-inducible proteins were estimated to be also induced by heat shock stress.
In this study, the optimization of culture medium using a Sterigmatomyces elviae mutant was investigated using statistical analysis to increase the cell mass and lactosucrose ($^4G-{\beta}$-D-galactosylsucrose) production. In basal medium, the cell mass and lactosucrose production were 4.12 g/l and 140.91 g/l, respectively. However, because of the low cell mass and lactosucrose production, optimization of culture medium was carried out to increase the cell mass and lactosucrose production. Culture media were optimized by the S. elviae mutant using analysis of variance (ANOVA) and response surface methodology (RSM). Central composite designs using RSM were utilized in this investigation. Quadratic models were obtained for cell mass and lactosucrose production. In the case of cell mass, optimal components of the medium were as follows: sucrose 1.13%, yeast extract 0.99%, bactopeptone 2.96%, and ammonium sulfate 0.40%. The predicted maximum value of cell mass was about 5.20 g/l and its experimental value was 5.08 g/l. In the case of lactosucrose production, optimal components of the medium were as follows: sucrose 0.96%, yeast extract 1.2%, bactopeptone 3.0%, and ammonium sulfate 0.48%. Then, the predicted maximum value of lactosucrose production was about 194.12 g/l and the corresponding experimental value was about 183.78 g/l. Therefore, by culturing using predicted conditions, the real cell mass and lactosucrose production increased to 23.3% and 30.42%, respectively.
In this paper, the autolysis process of Saccharomyces cerevisiae FX-2 (S. cerevisiae FX-2) via, a variety of endogenous enzyme, was investigated systematically by analyzing changes in physicochemical parameters in autolysate, surface morphology and the internal structure of the yeast cells. As an explicit conclusion, the arisen autolysis depended on the pH and the optimal pH was found to be 5.5. Based on the experimental data and the characteristics of mycelia morphology, a hypothesis is put forward that simple proteins in yeast vacuolar are firstly degraded for utilization, and then more membrane-bound proteins are hydrolyzed to release hydrolytic enzymes, which arouse an enzymatic reaction to induce the collapse of the cell wall into the cytoplasm.
To screen for an anti-yeast substance (AYS), many bacteria were isolated from soil and a strain AY2000 was selected. The strain AY2000 was identified as Rahnella aquatilis by morphology, biochemical properties, and 16S r-RNA nucleotide sequence analyses. The strain AY2000 showed anti-yeast activity against Candida albicans and Saccharomyces cerevisiae, whereas R. aquatilis ATCC33071 as a type strain did not show the activity against the yeasts under the same condition. The growth of yeast cell was significantly inhibited by AYS produced by the strain AY2000, as shown by optical density and MTT assay. The minimum inhibitory concentration (MIC) of the AYS against S. cerevisiae and C. albicans at $28^{\circ}C\;was\;20{\mu}g/ml\;and\;60{\mu}g/ml$, respectively. The MIC of AYS against hyphae of C. albicans at $37^{\circ}C\;was\;600{\mu}g/ml$. Scanning electron microscopic analysis revealed that yeast cells treated with AYS had an irregular form with a wrinkled and rough surface.
회분식 포말분리관에 효모용액을 충전하여 효모분리실험을 수행하며 효모 액면 높이, 질소 공급량, 효모농도, pH와 온도 및 $CaCl_2$ 첨가 등의 변화에 따른 포말 분리관의 분리 및 특성 등을 연구하였다. 액면 높이가 20cm인 경우 최대 효모분리비 70.6을 얻을 수 있었고 포말 생성시간도 6분으로 가장 길었다. 질소 공급량이 120ml/min인 경우 3분 분리운전후 액본체 효모의 90~94%가 제거되어 매우 신속하고 효과적인 분리법이었다. 효모농도가 3.92~8.4g/l 범위가 pH가 5~7 범위에서 분리시간에 따른 효모 제거율은 비슷하였다. 효모용액의 온도가 26~$36^{\circ}C$ 범위에서 온도가 상승할수록 분리시간에 따른 효모 분리비가 증대하였다. 효모의 응집성을 증대하는 $CaCl_2$ 농도는 0.2g/l일 때 효모 분리비가 가장 높았다.
경유(輕油)를 기질(基質)로 한 석유탄화수소발효액(石油炭化水素醱酵液)으로부터 효과적(效果的)으로 균체(菌體)를 회수(回收), 정제(精製)하기 위한 몇가지 지견(知見)과 예비동물사육시험(飼備動物飼育試驗)결과를 요약(要約)하면 다음과 같다. 1) 발효배양액(醱酵培養液)으로부터 균체(菌體) cream의 정치분리(精置分離)는 30분만에 종료(終了)되며 이때 cream의 균체농도(菌體濃渡)는 5.6%였다. 2) pH 9 이상의 강알칼리성에서 균체(菌體) emulsion은 불안정(不安定)하였으며 열처리(熱處理), 동결(凍結)에 의하여 emulsion으로부터 $60{\sim}80%$의 균체(菌體)를 분리(分離)할 수 있었다. 3) Emulsion 파괴(破壞)를 위한 식용계면활성제(食用界面活性劑)로는 트리오가 가장 우수하였으며 그 적합한 농도(濃渡)는 0.3%였다. 이 외에 Aldo, Monogly 5-7 및 G-4도 유효(有效)하였다. 4) NaCl, KCl 등의 할로겐화알칼리금속염이 균체(菌體) emulsion 파괴(破壞)에우수하였으며 트리오와 같은 계면활성제(界面活性劑)와 혼합(混合)하여 사용하므로서 90% 이상의 균체(菌體)를 분리(分離)할 수 있었다. 5) 건조반제품(乾燥半製品)을 hexane-ethyl alcohol 및 iso-propyl alcohol의 공비혼합물(共沸混合物)로 유출(抽出)하는 것이 가장 기대(期待)되는 균체(菌體)의 정제방법(精製方法)이며 추출온도(抽出溫度)는 $58^{\circ}C$, 추출시간(抽出時間)은 30분(分), 균체(菌體) 대(對) 용매비율(溶媒比率)은 1 : 3이 적합하였다. 6) 균체단백질(菌體蛋白質)의 사양실험결과 어백과 5% 대체(代替)한 수준(水準)에시는 대조구(對照區)보다 3.3%의 더 좋은 증체(增體)를 보였으나 8% 대체구(代替區)는 다른 처리구에 비하여 간(肝)중량이 더 무거운 것이 인정되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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