Protopectinase (PPases) are heterologous group of enzymes that degrade pectin from the insoluble protopection which is constituent of the middle lamella and primary cell wall of higher plants by restricted depolymerization. From the previous report[6], enzymatically separated plant cells, which are produced from plant tissues by PPases treatment, showed well-conserved cellular components with their rigid cell wall and this characteristic is applicable to preparation of novel food material. The purpose of this study is to investigate the effect of medium composition of PPase production from Bacillus subtilis EK11 which was selected as a PPase producer. Various carbon sources and concentrations on PPase production were studied and corn starch at 0.7% was the most effective for production of PPase. Among the nitrogen sources, yeast extract was the most effective for PPase production and the effect of (NH4)2SO4 was notable as inotganic nitrogen source. Inorganic compounds such as KH2PO4, K2HPO4, Na3-citrate.2H2O and MgSO4 were optimized for PPase production. PPase activity was inhibited by the adition of Ba2+ or Zn2+. The optimal medium for PPase production was devised: 0.7% corn starch, 0.3% yeast extract, 1.4% KH2PO4, 0.6% K2HPO4, 0.1% Na3-citrate.2H2O and 0.02% MgSO4. PPase production by using the optimum medium was carried out with shaking cultivation at 37$^{\circ}C$. The maximum PPase activity of 256unit/ml could be obtained after the cultivation for 48hrs. The activity was increased about 2.2timesthan the activity, 112 unit/ml, in basal medium.
Park, Joon-Koo;Choi, Boung-Don;Kim, Seung-Chul;Ryeom, Kon
Environmental Analysis Health and Toxicology
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v.8
no.3_4
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pp.7-12
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1993
An Actinomycete strain isolated from Mt. Dea-Dun had a strong antifungal activity. The culture brith produced by isolated strain showed only antifungal activity against fungi with the exception of yeast and bacteria. It was heat stable, dissolved in ehtylacetate. The concentrated antifungal agent showed cytotoxicity against HEP-2 and HeLa as tumor cell line, and showed weak cytotoxicity against VERO 36 as normal cell line. Morphological and physiological characteristics were tested with isolated strain. The spore color of isolated strain was gray. It had a short chain and produced brown colored lytic substance in yeast extract-malt agar. The cell wall of isolated strain was composed of meso-DAP, and we suggested it as genus Actinomadura. In the existing of chemical inhibitor, isolated strain grew on the condition of 0.0001% crystal violet, 0.1% phenol, 0.01% sodium azide and 10% sodium chloride. Carbon utilization of isolated strain was shown that glucose, sucrose, manitol and sodium citrate were well utilized.
The taxonomical properties of strain J-275L isolated from soil as a microorganism which produces extracellular adenine deaminase and cultural conditions for the enxyme production were studied. The hyphae of strain J-275L is fragmented into rod-or coccus-like elements. The elements of fragmented aerkal hyphae has smooth surfaces. The cell wall of the organism contains LL-diaminopimelic acid. Mycolic acid are not produced. As a result of taxonomical studies, strain J-275L is designated as Nocardioides sp. J-275L. The optimum medium for the enzyme production from Nocardioides sp.J-275L wascomposed of 0.5% peptone, 0.5% dextrin, 1% yeast extract, and 0.2% $K_{2}HPO_{4}$. The optimum initial pH of the medium was pH 7.5.
Candida albicans infections are often problematic to treat owing to antifungal resistance, as such infections are mostly associated with biofilms. The ability of C. albicans to switch from a budding yeast to filamentous hyphae and to adhere to host cells or various surfaces supports biofilm formation. Previously, the ethanol extract from Paeonia lactiflora was reported to inhibit cell wall synthesis and cause depolarization and permeabilization of the cell membrane in C. albicans. In this study, the P. lactiflora extract was found to significantly reduce the initial stage of C. albicans biofilms from 12 clinical isolates by 38.4%. Thus, to assess the action mechanism, the effect of the P. lactiflora extract on the adhesion of C. albicans cells to polystyrene and germ tube formation was investigated using a microscopic analysis. The density of the adherent cells was diminished following incubation with the P. lactiflora extract in an acidic medium. Additionally, the P. lactiflora-treated C. albicans cells were mostly composed of less virulent pseudohyphae, and ruptured debris was found in the serum-containing medium. A quantitative real-time PCR analysis indicated that P. lactiflora downregulated the expression of C. albicans hypha-specific genes: ALS3 by 65% (p = 0.004), ECE1 by 34.9% (p = 0.001), HWP1 by 29.2% (p = 0.002), and SAP1 by 37.5% (p = 0.001), matching the microscopic analysis of the P. lactiflora action on biofilm formation. Therefore, the current findings demonstrate that the P. lactiflora ethanol extract is effective in inhibiting C. albicans biofilms in vitro, suggesting its therapeutic potential for the treatment of biofilm-associated infections.
Dong-Wook Lim;Ga-Yang Lee;Min-Jeong Jung;Byoung-Mok Kim;Joon-Young Jun
Food Science and Preservation
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v.30
no.6
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pp.1043-1055
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2023
This study was conducted to suggest an extraction method for preparing the extract from green tea leaves that possess enhanced antioxidant and antibacterial activities. Different ethanol concentrations were tested to recover phenolics and flavonoids, and 50% ethanol was the best under heat treatment (121℃, 15 min). The ethanol extract exhibited excellent DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) radical scavenging activity and growth inhibition against B. cereus, B. licheniformis, S. aureus subsp. aureus, and A. hydrophila subsp. hydrophila. To enhance the antioxidant and antibacterial activities, cell-wall degrading enzymes (2.5% cellulose+2.5% pectinase, v/w dry sample) treatment and Saccharomyces cerevisiae fermentation were applied singly or in combination. The enzymatic treatment of green tea leaves notably increased extraction yield. However, the antioxidant and antibacterial activities of the extract were lower than those of the control (heat-treated 50% ethanol extract). In contrast, the yeast fermentation alone did not affect the yield, but enhanced antioxidant and antibacterial activities, contributing to the increase in the extract's total phenolic and flavonoid contents.
Several kinds of organic acids, alcohols, aromatic compounds and sugars as carbon sources were tested in order to produce the cell mass of Rhizopus oryzae which is used in part of food processing or organic acid fermentation. Sodium acetate among them was good enough for carbon source as well as glucose under the concentration of one percent. All nitrogenous substances tested such as ammonium, nitrate or organic nitrogen compounds were well used by this strain of Rhizopus oryzae as nitrogen source. Ammonium sulfate among inorganic nitrogen compounds was most utilized as a nitrogen source in glucose or acetate medium. This strain did not require any growth factors such as yeast extract. The following composition of medium was therefore determined in order to produce the cell mass of Rhizopus oryzae: Na-acetate 1 %, (NH$_4$)$_2$SO$_4$ 0.2%, $K_2$HPO$_4$ 0.05%, MgSO$_4$.7$H_2O$ 0.01%, NaCl 0.01% (PH 5.5). The cell wall of mycelium grown in above medium was lysed optimally at pH 6.5 and 5$0^{\circ}C$ by the action of Strepzyme 115-5. On producing protoplast from mycelium by enzymatic action, almost all of the mycelium was damaged after 4hrs of treatment.
A full-length cDNA of OgGRP gene encoding a glycinerich cell wall protein was isolated from wild rice (Oryza grandiglumis). Deduced amino acid sequences of OgGRP are composed of 148 amino acids (16.3 kDa), and show 85.9% homology with Osgrp-2 (Oryza sativa). RT-PCR analysis showed that RNA expression of OgGRP was regulated by defense-related signaling chemicals, such as cantharidin, endothall, jasmonic acid, wounding, or yeast extract treatment. In relation to pathogen stress, the function of OgGRP was analyzed in OgGRP over-expressing Arabidopsis thaliana. Overexpression of OgGRP in Arabidopsis contributed to moderate resistance against fungal pathogen, Botrytis cinerea, by lowering disease rate and necrosis size. In the analysis of the transgenic Arabidopsis lines to check the change of gene expression profile, induction of PR1, PR5 and PDF1.2 was confirmed. The induction seemed to be caused by the interaction of ectopic expression of OgGRP with SA-and JA-dependent signaling pathways.
An alkalophilic bacterium, the strain AC-711 as a potent producer of alkaline cellulase, was selected among many isolates from soil environments. Morphological, physiological and chemical characteristics of the strain AC-711 suggested that it belongs to the genus Pseudomonas according to the Bergey's Manual of Systematic Bacteriology, however the G+C mol% (54.43) of its chromosomal DNA is lower than the normal values of the genus. The major cell wall fatty acids were determined as 15:0 and 17:0 anteiso. The production of alkaline CMCase by the strain was maximal when grown on the mediun containing 1% carboxymethyl cellulose, 0.1% $KH_2PO_4$, 0.02% $CoCl_2$, 0.02% Tween 80, 0.5% $Na_2CO_3$, 0.8% yeast extract, pH 10.3 at $30^{\circ}C$ for 3 days, and the most of enzyme was excreted into culture mediun.
Ciliates have the possibility of a new live food in marine finfish culture because of their wide range of body size, thin tell wall, show motility, and fast reproduction rate. In this research, six species of ciliates were isolated from south coast and salt pond in Korea. The fitness of these species as a live food was evaluated in terms of size, motility, suspensibility and cell density. As the result, Euplotes sp. (K-1) was found suitable to be a new live food which might substitute rotifers, Brachionus plintilis and B. rotundiformis in fish larvae culture. The modified $F{\emptyset}yn's$ Erdschreiberd media, MErds-2 with the addition of glycine, glucose and yeast extract increased six times higher growth rate of Euplotes sp. (K-1) than the basic F$\emptyset$yn's Erdschreiberd media. The optimum water temperature, pH and light intensity for this ciliates were $22.5^{\circ}C$, 8 and 2,000 lux, respectively, and its culture environmental range was relatively wide, On the other hand, this ciliate fed baker's yeast, Saccharomyces cererisiae grew up to 1,240 inds./mL with the inocula of 100 inds./mL within 7 days. The results of the study showed that Euplotes sp. (K-1) has a potential to be utilized as a new live food in fish larvae culture.
A bacterium which has high enzymatic activities such as amylase, cellulase and protease was isolated from Korean traditional soybean food, doenjang. The isolated bacterium was identified to Bacillus subtilis HS25 by the test of morphological and biochemical properties according to Bergey's Manual of Systematic Bacteriology and API 50 CHL kit, and by the 16S rDNA sequence. The isolated B. subtilis HS25 had a potent antibacterial activity against food born causative or pathogenic bacteria. B. subtilis HS25 is endospore forming cell and contained flagella and abundant viscous material at the out layer of cell wall. It was rod type bacterium $(0.5{\sim}0.8{\times}3{\sim}5{\mu}m)$ having biochemical characteristics such as gram staining(+), catalase(+), oxidase(-) and hydrolysis of esculin(+). The optimal medium compositions for production of antibacterial substance in the B. subtilis HS25 were 1% of soluble starch, 0.5% of yeast extract, 0.5% of peptone and 0.05% of MgCl$_2{\cdot}6H_{2}O$. The optimum temperature and pH of the growth of the B. subtilis HS25 was 35$^{\circ}C$ and pH 7.5, respectively. The antibacterial activity was more high in neutral to a little alkaline pH (6.5-10.5) than in acidic pH. The optimal shaking speed to grow and to produce antibacterial substance of the B. subtilis HS25 was 160${\sim}$200 rpm. The optimal culture time for antibacterial activities of the bacterium were shown to be in the range of 12-36 hr.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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