GST pull-down assays were used to characterize the SARS-CoV membrane (M) and nucleocapsid (N) interaction, and it was found that the amino acids 211-254 of N protein were essential for this interaction. When tetrad glutamines (Q) were replaced with glutamic acids (E) at positions of 240-243 of the N protein, the interaction was disrupted.
Sclerotia of Wolfiporia cocos are of medicinal and culinary value. The genes and molecular mechanisms involved in W. cocos sclerotial formation are poorly investigated because of the lack of a suitable and reproducible transformation system for W. cocos. In this study, a PEG/CaCl2-mediated genetic transformation system for W. cocos was developed. The promoter Pgpd from Ganoderma lucidum effectively drove expression of the hygromycin B phosphotransferase gene in W. cocos, and approximately 30 transformants were obtained per 10 μg DNA when the protoplast suspension density was 106 protoplasts/ml. However, no transformants were obtained under the regulation of the PtrpC promoter from Aspergillus nidulans.
A Gram-negative, rod-shaped, gliding, aerobic bacterium, designated $12157^T$, was isolated from the desert of Xinjiang, China and subjected to a polyphasic taxonomic study. The strain $12157^T$ grew optimally at pH 7.0 and $30^{\circ}C$. MK-7 was the predominant respiratory menaquinone. The DNA G+C content was 42.0 mol%. Phylogenetic analysis based on the 16S rRNA gene sequences showed that the isolate was mostly related to members of the genus Pedobacter, with similarities ranging from 90.0% to 93.7%. Phylogenetic evidence and the results of phenotypic and genotypic analyses support the establishment of a novel species, Pedobacter xinjiangensis sp. nov., with strain $12157^T$ (=CCTCC AB $208092^T$=NRRL B-$51338^T$) as the type strain.
We prepared $C_3N_4$ films by rf plasma enhanced chemical vapor deposition(PCVD) and alternating $C_3N_4$/TiN composite films by dc magnetron sputtering. X-ray diffraction (XRD) and transmission electron diffraction (TED) revealed that the structure of the films is amorphous or polycrystalline, depending on deposition conditions and heat treatment. X-ray photoelectron spectroscopy (XPS) and Fourier transform infrared (FTIR) spectroscopy confirmed the presence of $sp_3\; and sp _2$ hybridized C atoms bonded with N atoms in the tetrahedral and hexagonal configurations, respectively. Graphite-free $C_3N_4$ films were obtained by PCVD under optimal conditions. To prepare well crystallized $C_3N_4$ films by magnetron sputtering, we introduced negatively biased gratings in the sputtering system. CN films deposited at grating voltages (Vg) lower than 400V are amorphous. Crystallites of cubic and $\beta$-$C_3N_4$ were formed at increased voltages.
Cervical cancer is a serious public health problem in developing countries. We investigated possible risk factors for cervical cancer in rural areas of Wuhan China using a matched case-control study with 33 women diagnosed with cervical cancer and 132 healthy women selected from the same area as matched controls. A questionnaire, which included questions about general demography conditions, environmental and genetic factors, the first sexual intercourse, first marriage age, age at first pregnancy, pregnancy first child's age, female personal health history, social psychological factors, dietary habits, smoking and alcohol status and other living habits was presented to all participants. At the same time, HPV infection of every participant was examined in laboratory testing. Results showed HPV infection (P<0.000, OR=23.4) and pregnancy first child's age (P<0.000, OR=13.1) to be risk factors for cervical cancer. Menopause (P=0.003, OR=0.073) was a protective factor against cervical cancer. However, there was no indication of associations of environmental (drinking water, insecticide, disinfectant) genetic (cancer family history), or life-style factors (smoking status, alcohol status, physical training, sleep quality), including dietary habits (intake of fruit and vegetable, meat, fried food, bean products and pickled food) or social psychological factors with cervical cancer. The results suggest that the risk of cervical cancer in Chinese rural women may be associated with HPV infection, menopause and the pregnancy first child's age.
A new fiber optical sensor was developed for the determination of 2,4-dichlorophenol (DCP). The sensor was based on DCP oxidation by oxygen with the catalysis of iron(III) tetrasulfophthalocyanine (Fe(III)PcTs). The optical oxygen sensing film with $Ru(bpy)_3Cl_2$ as the fluorescence indicator was used to determine the consumption of oxygen in solution. A lock-in amplifier was used for detecting the lifetime of the oxygen sensing film by measuring the phase delay change of the sensor head. The different variables affecting the sensor performance were evaluated and optimized. Under the optimal conditions (i.e. pH 6.0, $25^{\circ}C$, Fe(III)PcTs concentration of 0.62 mg/mL), the linear detection range and response time of the sensor are $1.0{\times}10^{-6}-9.0{\times}10^{-6}$ mol/L and 250 s, respectively. The sensor displays high selectivity, good repeatability and stability, and can be used as an effective tool in analyzing DCP concentration in practical samples.
The synergistic activation mediator (SAM) system can robustly activate endogenous gene expression by a single-guide RNA. This transcriptional modulation has been shown to enhance gene promoter activity and leads to epigenetic changes. Human $interferon-{\gamma}$ is a common natural glycoprotein involved in antiviral effects and inhibition of cancer cell growth. Large quantities of high-purity $interferon-{\gamma}$ are important for medical research and clinical therapy. To investigate the possibility of employing the SAM system to enhance endogenous human $interferon-{\gamma}$ with normal function in innate immunity, we designed 10 single-guide RNAs that target 200 bp upstream of the transcription start sites of the $interferon-{\gamma}$ genome, which could significantly activate the $interferon-{\gamma}$ promoter reporter. We confirmed that the system can effectively and highly activate $interferon-{\gamma}$ expression in several humanized cell lines. Moreover, we found that the $interferon-{\gamma}$ induced by the SAM system could inhibit tumorigenesis. Taken together, our results reveal that the SAM system can modulate epigenetic traits of non-immune cells through activating $interferon-{\gamma}$ expression and triggering JAK-STAT signaling pathways. Thus, this strategy could offer a novel approach to inhibit tumorigenesis without using exogenous $interferon-{\gamma}$.
By a cDNA array representing 2308 signal transduction related genes, we studied the expression profiles of HeLa cells stably transfected by Hepatitis C virus nonstructural protein 4B (HCV-NS4B). The alterations of the expression of four genes were confirmed by real-time quantitative RT-PCR; and the aldo-keto reductase family 1, member C1 (AKR1C1) enzyme activity was detected in HCV-NS4B transiently transfected HeLa cells and Huh-7, a human hepatoma cell line. Of the 2,308 genes we examined, 34 were up-regulated and 56 were down-regulated. These 90 genes involved oncogenes, tumor suppressors, cell receptors, complements, adhesions, transcription and translation, cytoskeletion and cellular stress. The expression profiling suggested that multiple regulatory pathways were affected by HCV-NS4B directly or indirectly. And since these genes are related to carcinogenesis, host defense system and cell homeostatic mechanism, we can conclude that HCV-NS4B could play some important roles in the pathogenesis mechanism of HCV.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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