Understanding salt tolerance mechanisms is important for the increase of crop yields, and so, several screening approaches were developed to identify plant genes which are involved in salt tolerance of plants. Here, we transformed the Arabidopsis cDNA library into a salt-sensitive calcineurin (CaN)-deficient ($cnb{\Delta}$) yeast mutant and isolated the colonies which can suppress salt-sensitive phenotype of $cnb{\Delta}$ mutant. Through this functional complementation screen, a total of 34 colonies functionally suppressed the salt-sensitive phenotype of $cnb{\Delta}$ yeast cells, and sequencing analysis revealed that these are 9 genes, including CaS, AtSUMO1 and AtHB-12. Among these genes, the ectopic expression of CaS gene increased salt tolerance in yeast, and CaS transcript was up-regulated under high salinity conditions. CaS-antisense transgenic plants showed reduced root elongation under 100 mM NaCl treatment compared to the wild type plant, which survived under 150 mM NaCl treatment, whereas CaS-antisense transgenic plant leaves turned yellow under 150 mM NaCl treatment. These results indicate that the expression of CaS gene is important for stress tolerance in yeast and plants.
Hyun, Se Hee;Mun, Hye Yeon;Lee, Hyang Burm;Kim, Ha-Kun;Lee, Jong-Soo
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.41
no.4
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pp.383-390
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2013
Several yeasts were isolated from flowers found in Gyonggi-do Province and Jeju island in Korea. They were then identified by a comparison of their PCR-amplified D1/D2 regions of 26S rDNA, internal transcribed spacer 1 and 2 inclusive of 5.8S rDNA, using the BLAST database. A total of fifty four yeast strains were isolated from wild flowers in Gyonggi-do and the genus Pseudozyma was noted as being dominant. A total of thirty two strains were isolated from Songaksan and Seongsan-ilchulbong in Jeju island and Sporobolomyces ruberrimus was seen to be dominant. The anti-gout xanthine oxidase inhibitory activities of the culture broths and cell-free extracts from eighty six yeast strains were then determined. The cell-free extracts of Pseudozyma hubeiensis 228-S-1 exhibited the highest xanthine oxidase inhibitory activity of 19.6%. The XOD inhibitor was also maximally produced when Pseudozyma hubeiensis 228-S-1 was cultured at $30^{\circ}C$ for 36h in YEPD medium.
We isolated 120 strains of wild yeasts from the water and riverside soils of Daejeoncheon and Gapcheon in Daejeon, Korea. We identified Debaryomyces udenii JSF601, Kazachstania telluris JSF602, Trichosporon faecale JSF614, Candida infanticola WJSL0039, Candida palmioleophila WJSL0048, Pichia spartinae WJSL0087, and Trichosporon coprophilum WJSL0093 from Daejeoncheon, and Leucosporidium golubevii WJSL0108 and Ustilentyloma graminis WJSL0118 from Gapcheon, as newly recorded yeast strains in Korea and investigated their microbiological characteristics. All of these previously unrecorded yeasts were oval- or ellipsoidal-shaped with ascospores, except C. infanticola WJSL0039, C. palmioleophila WJSL0048, and D. udenii JSF601. L. golubevii WJSL0108 and U. graminis WJSL0118 grew in vitamin-free medium, and C. infanticola WJSL0039 was halotolerant and grew in 10% NaCl-containing YPD broth. K. telluris JSF602 and P. spartinae WJSL0087 were thermophilic yeasts, which grew at $37^{\circ}C$.
In order to manufacture the alcoholic drinks using cultured wild ginseng roots(CWGR) of 5 and $10\%$ (w/v), sugar content of fermentation media was adjusted to 24-25 $^{\circ}$Brix with white sugar and glucose. And 3 kinds of yeast (S. cerevisiae(KCCM 50757), S. cerevisiae (KCCM 50583) and S. bayanus(ATCC 10601) were used and then the quality of alcoholic drinks was analyzed by physical, chemical and sensory evaluation. Alcohol content was highest value of $15.8\%$ in $10\%$ of CWGR, white sugar, and S. bayanus(ATCC 10601). Major alcohols were ethanol and 1-propanol. Number of yeast cells increased to 5 days fermentation and slightly decreased afterwards. The pH was decreased abruptly from 5.0 in initial fermentation to 3.1-4.1 in 5 days fermentation. Total sugar contents were decreased continuously with fermentation periods and showed 7.0-10.5 $^{\circ}$Brix in 20 days fermentation. Saponin patterns and contents were various and higher in wine treated with S. bayanus(ATCC 10601). From the sensory evaluation, the highest score of overall quality was observed in the alcoholic beverage of $10\%$(w/v) of CWGR, glucose, and S. cerevisiae(KCCM 50583).
Yang, Xue;Zhang, Xuenan;He, Xi;Liu, Canzhen;Zhao, Xinjie;Han, Ning
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.32
no.6
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pp.761-767
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2022
EHT1 and EEB1 are the key Saccharomyces cerevisiae genes involved in the synthesis of ethyl esters during wine fermentation. We constructed single (Δeht1, Δeeb1) and double (Δeht1Δeeb1) heterogenous mutant strains of the industrial diploid wine yeast EC1118 by disrupting one allele of EHT1 and/or EEB1. In addition, the aromatic profile of wine produced during fermentation of simulated grape juice by these mutant strains was also analyzed. The expression levels of EHT1 and/or EEB1 in the relevant mutants were less than 50% of the wild-type strain when grown in YPD medium and simulated grape juice medium. Compared to the wild-type strain, all mutants produced lower amounts of ethyl esters in the fermented grape juice and also resulted in distinct ethyl ester profiles. ATF2, a gene involved in acetate ester synthesis, was expressed at higher levels in the EEB1 downregulation mutants compared to the wild-type and Δeht1 strains during fermentation, which was consistent with the content of acetate esters. In addition, the production of higher alcohols was also markedly affected by the decrease in EEB1 levels. Compared to EHT1, EEB1 downregulation had a greater impact on the production of acetate esters and higher alcohols, suggesting that controlling EEB1 expression could be an effective means to regulate the content of these aromatic metabolites in wine. Taken together, the synthesis of ethyl esters can be decreased by deleting one allele of EHT1 and EEB1 in the diploid EC1118 strain, which may modify the ester profile of wine more subtly compared to the complete deletion of target genes.
Jeong-Su Moon;Min-Young An;Mal-Geum Park;Jong-Soo Lee
The Korean Journal of Mycology
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v.51
no.1
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pp.39-49
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2023
This study aimed to screen and investigate the microbiological characteristics, enzyme activity, and physiological functionality of unrecorded wild yeasts from the Wolsung valley of South Deogyu mountain and Jinjamcheon in Daejeon city, Korea. Candida sorboxylosa WSC25-4 (NNIBRFG47336), Arxula adeninivorans WSC6-3 (NNIBRFG47335), Farysizyma taiwaniana JRC6-2 (NNIBRFG47339), Saturnispora dispora JTS19-1 (NNIBRFG47334), Vanderwaltozyma polyspora JJCH5-3 (NNIBRFG47337), and Vanrija fragicola SW-9 (NNIBRFG47338) have not been previously recorded. None of these formed spores or pseudo-mycelium, and four strains, including C. sorboxylosa WSC25-4, were global in shaped. Except for V. polyspora JJCH5-3, all strains grew well in the yeast extract-peptone-dextrose (YPD), potato-dextrose and yeast malt extract media. A. adeninivorans WSC6-3 and S. dispora JTS19-1 grew well in 40% glucose-containing YPD medium and V. fragicola SW-9 in 5% NaCl-containing YPD medium. The supernatant of A. adeninivorans WSC6-3, F. taiwaniana JRC6-2, and V. fragicola SW-9 exhibited 58.0, 59.0, and 59.0% of glucoamylase activity, respectively. C. sorboxylosa WSC25-4 also produced extracellular alkaline protease. Antioxidant activity of the supernatant from F. taiwanian JRC6-2 was high (79.8%), while the other five unrecorded yeasts demonstrated elevated antiaging superoxide dismutase (SOD)-like activity (99%). Anti-gout xanthin oxidase inhibitory activity of S. dispora JTS19-1 and V. fragicola SW-9 was also elevated at 79 and 80%, respectively.
Jeong-Su Moon;Seung-A Shin;Seung-Eun Baek;Jong-Soo Lee
The Korean Journal of Mycology
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v.51
no.3
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pp.205-217
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2023
This study aimed to produce novel bioactive compounds from non-pathogenic pigmented wild yeasts. Culture supernatants and cell-free extracts of non-pathogenic pigmented yeast strains were prepared, and their physiological functionalities and enzyme activities were measured. Cell-free extracts from Rhodosporidium paludigenum HHGG35-1 and culture supernatants from Rhodosporidium diobovatum NMD18-1 demonstrated very high antioxidant activity (76.6%) and anti-gout xanthin oxidase inhibitory activity (86.2%), respectively. Maximal production of the antioxidants (76.9%) was obtained when Rh. Paludigenum HHGG35-1 was cultured in a yeasts extract-peptone-dextrose (YPD) medium (pH 6.5) at 30℃ for 24 h. The xanthin oxidase inhibitor was also maximally produced (91.6%) when Rh. Diobovatum NMD18-1 was cultured at 30℃ for 96h in a YPD medium (pH 6.5). Rh. Paludigenum HHGG35-1 was oval in shape and formed ascospre. The Rh.diobovatum NMD18-1 specimen displayed dimensions of 1.6 × 1.6 ㎛ and produced ascospores; however, it did not form pseudomycelium. Both of Rh. Paludigenum HHGG35-1 and Rh. Diobovatum NMD18-1 grew well in a 40%-glucose-containing YPD medium and 10%-NaCl-containing YPD medium.
The present study aimed to screen unrecorded wild yeasts from Jeju lsland and Jangsado on the southern coast of Korea, and to investigate their microbiological characteristics. To date, Coniozyma leucospermi JJD37-2, Hanseniaspora thailandica JJD44-1, Kluyveromyces nonfermentans JJD15-1, Kockovaella fuzhouensis JJD47-3, Vishniacozyma heimaeyensis JJD8-4, Candida carpophila JSDH24-1, Wickerhamomyces strasburgensis JSDH34-2, Candida savonica HJD6-4, and Candida karawaiewii YP23-3 have not been previously recorded in Korea. In the present study, we investigated the microbiological characteristics of these previously unrecorded yeasts. Except for W. strasburgensis JSDH34-2 strain, none of the strains formed spores, and only the C. leucospermi JJD37-2 strain formed pseudomycelia. Almost all strains grew well in yeast extract-peptone-dextrose (YPD) medium, potato dextrose (PD) medium and yeast extract-malt extract (YM) media. C. carpophila JSDH24-1 and W. strasburgensis JSDH34-2 also grew well in YPD medium containing 10% NaCl. H. thailandica JJD44-1 is fermented to produce glucose, fructose and mannose.
To increase the quality of Korean traditional yakju, we prepared seed cultures by fermentation at $20^{\circ}C$ for 2 days after addition of 140% water, 3% nuruk and 1.5% yeast into cooked rice. After the 200% cooked rice, 120% water and 0.08% commercial saccharifying enzyme were added to seed cultures and fermented for 2 days at $20^{\circ}C$, wild ginseng was added and then further fermented for 5 days. Physicochemical properties of traditional yakju were investigated. Ethanol was produced (18.5%) by the addition of 1.2% wild ginseng. However, ethanol content was not increased by addition of microwave treated-wild ginseng and rice (either cooked rice or raw). The traditional yakju obtained by fermentation at $20^{\circ}C$ for 5 days, after 90 sec of microwave treated-wild ginseng was added into main fermentation broth, showed good total acceptability and also contained 791 ppm saponin.
Copper is essential but toxic in excess for aerobic organisms. Yeast transcription factor ACE1 functions as a sensor for copper and an inducer for the transcription of CUP1. In addition, ACE1 can activate the transcription of superoxide dismutase gene (sod1) in response to copper. In this study, we introduced the yeast ACE1 into Arabidopsis and analyzed its function in plant. Under high copper stress, the transgenic plants over-expressing ACE1 showed higher survival rate than the wild-type. We also found that over-expression of ACE1 in Arabidopsis increased the activities of SOD and POD, which were beneficial to the cell in copper buffering. Excess copper would suppress the expression of chlorophyll biosynthetic genes in Arabidopsis, RT-PCR analysis revealed that over-expression of ACE1 decrease the suppression. Together, our results indicate that ACE1 may play an important role in response to copper stress in Arabidopsis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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