보리(Hordeum vulgare L.)는 Poaceae/Gramineae 과에 속하며 주위에 흔히 있는 곡물이지만 고대 이집트에서는 보리가 의약품으로 사용되어 왔으며 오랜 전부터 많은 나라에서 기능성 식품, 향료 및 맥주로 사용되는 중요한 곡물이다. 보리의 효능에는 항염증, 항암 및 항당뇨병에 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 현재까지 보리에 관한 많은 연구가 진행되어왔지만 유산균 발효를 이용한 발효 보리에 대한 연구는 많이 진행되지 않았다. 본 연구에서는 유산균을 이용하여 발효 후 에탄올로 추출한 보리 씨앗의 효과에 대하여 조사 하였다. 이를 위해서 유산균으로 발효한 보리 씨앗과 발효하지 않은 보리의 총 폴리페놀 함량, 총 플라보노이드 함량, DPPH 라디칼 소거능, SOD 유사활성 및 타이로시나제 저해 활성을 분석하였다. 결과적으로 유산균으로 발효한 보리 씨앗이 발효하지 않은 보리 씨앗보다 더 효과적인 항산화 효과 및 미백 활성을 나타내는 것으로 보였다. 따라서 우리는 유산균으로 발효한 보리 씨앗이 건강 기능 식품 및 화장품 개발의 기초가 될 수 있음을 제안한다.
본 연구는 비타민 나무(Hippophae rhamnoides L.) 열매 추출물의 약리 활성 효과인 항산화 활성과 미백 효과의 유효성을 알아보기 위해 DPPH 소거능, tyrosinase 활성 억제 효과 및 세포 내 멜라닌 생합성 억제 효과를 연구하였다. 비타민 나무 열매 추출물의 DPPH 소거능은 비교군인 ascorbic acid와 유사하게 높은 항산화 효과를 보여주었다. 또한 tyrosinase 활성 억제 효과는 $100{\mu}g/mL$와 $500{\mu}g/mL$에서 52.1%와 73.4%로 나타나 비타민 나무 열매 추출물의 미백 작용에 있어 tyrosinase 활성 억제와 항산화 작용이 관련이 있다고 사료된다. 세포 내 멜라닌 생성 억제 효과를 측정한 결과는 멜라닌 생성 억제 효과가 시료농도 5, 10, 50, $500{\mu}g/mL$에서 48, 43, 47, 56%를 나타내 미백 효과가 우수한 arbutin보다 효과가 높게 나타났다. 활성산소를 제거하는 것이 멜라닌 색소 형성 억제에 효과적이라는 연구 보고(Miyazawa & Tamura 2007)에 근거하여 볼 때 본 실험 결과에서 항산화 효과가 우수한 ascorbic acid과 유사한 항산화 효과를 나타내었는데 이는 피부 내 활성산소를 제거하여 멜라닌 색소 형성 억제 작용에 의한 미백 효과를 추측할 수 있었다. 그리고 tyrosinase 억제 효과의 실험 결과 역시 멜라닌 색소 형성을 억제시키고 여러 단계의 기작으로 인하여 미백 작용을 나타내는데 중요한 역할을 하게 될 것이라는 결론을 얻었다. 이상의 결과에서 비타민, 미네랄, 아미노산 성분이 풍부한 비타민 나무 열매 추출물은 미백 효과와 항산화 효과에 의한 멜라닌 색소 형성 억제 작용이 우수한 기능성 천연 원료로써 미백 화장품으로 이용이 가능할 것으로 사료된다.
분갈(Pueraria thomsonii Benth)은 전통적으로 중국 의학에서 발열, 급성 이질, 설사, 당뇨병 및 심혈관 질환 치료를 위한 약재로 사용되어 왔다. 이러한 분갈의 꽃인 분갈화의 피부 효능은 아직까지 밝혀진 바 없어, 본 연구에서는 멜라닌세포인 B16F1 세포주와 섬유아세포인 HS68 세포주를 이용하여 분갈화의 피부효능을 검증하고자 하였다. 분갈화의 에탄올 추출물이 멜라닌세포의 멜라닌 합성을 농도 의존적으로 감소시킴을 확인하고, 분갈화 추출물의 효능 성분을 추적하고자 high performance liquid chromatography (HPLC)를 이용하여 분석하였다. 그 결과, 분갈화에 함유된 이소플라본류 화합물인 tectorigenin, tectoridin, tectorigenin 7-O-xylosylglucoside 3종 성분을 확인하였다. 3종 성분 모두 독성을 보이지 않는 농도에서 멜라닌세포의 멜라닌 생합성을 농도 의존적으로 감소시켰으며, 이러한 멜라닌 생합성 감소는 tyrosinase와 microphthalmia-associated transcription factor (MITF) 유전자 발현을 감소시키는 것에 기인함을 확인하였다. 멜라닌 합성저해의 또 다른 기전을 확인하기 위하여, 섬유아세포에서 유래되는 멜라닌 합성억제 인자인 DKK-1의 발현에 대한 영향을 측정한 결과, 분갈화 추출물, tectoridin, tectorigenin 7-O-xylosylglucoside는 DKK-1의 발현을 농도 의존적으로 감소시킨 반면, tectorigenin은 DKK-1의 발현을 농도 의존적으로 증가시키는 것을 확인하였다. 이상의 연구 결과를 바탕으로, 분갈화 성분 중 tectorigenin은 멜라닌세포에서의 멜라닌 합성 억제와 섬유아세포에서의 멜라닌 생성 억제 인자 분비를 촉진하는 효과적인 미백 개선제로 활용할 수 있을 것으로 판단된다.
To compare the medical efficacy of original Socheongyong-tang with fermented Socheongyong-tang, we've studied the two medicines according to the search for optimal bacteria and optimal conditions, component analysis, assessment of medical efficacy and toxicity, and have the result below. The results were obtained as follows: Considering bacterial growth, $CO_2$ gas emission and pH, we examined that using 3 kinds of bacteria(S. cerevisiae KCTC 7913, L. casei KCTC 3109, L. brevis KCTC 3102) is desirable. There is no main difference in optimum conditions between incubator and shaking incubator. And it is considered that ideal fermentation time is 2 days after vaccination. As the result of componential analysis of before and after fermentation, there's a noticeable decrease of total sugar and protein. But there's no alterations in total phenolics compounds and in total flavonoid compounds that influence on medical effect. The result was interpreted that it can promote the assimilation of herbal decoction after fermentation. As the result of medical efficacy assessment, we can check out that there is more anti-oxidating effects in fermented Socheongyong-tang, whereas anti-inflammatory effects and obesity-preventing effects were favorable in original Socheongyong-tang. And there is no main difference of whitening and COX-2 removing effects between before and after the fermentation. As a result of assessing weight change, hepatotoxicity and nephrotoxicity, we can not notice any unusual difference between before and after the fermentation. According to the results above, it is considered that we checked out the optimal bacteria and optimal conditions, advantages and disadvantages of the medical efficacy of original Socheongyong-tang and fermented Socheongyong-tang. And we suggest that there will have to be a following in-depth and systematic research on this subject in the future.
본 연구에서는 참죽나무 새순 추출물의 항산화 효능과 tyrosinase 저해 활성을 측정함으로써 기능성 화장품에서의 이용 가능성을 평가하였다. 참죽나무 새순 추출물의 free radical (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH) 저해활성($FSC_{50}$)은 ethyl acetate 분획($3.54\;{\mu}g/mL$)과 aglycone 분획($2.15\;{\mu}g/mL$) 모두 지용성 항산화제인 (+)-$\alpha$-tocopherol ($8.98\;{\mu}g/mL$)에 비해 우수한 활성을 나타내었다. 또한 luminol 화학발광법을 이용한 $Fe^{3+}$-EDTA/$H_2O_2$ 계에서 생성된 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)에 대한 참죽나무 추출물의 총항산화능은 추출물의 ethyl acetate 분획($0.15\;{\mu}g/mL$)과 aglycone 분획($0.12\;{\mu}g/mL$)에서 모두 L-ascorbic acid ($1.50\;{\mu}g/mL$) 보다 약 10배 더 큰 것으로 나타내었다. Rose-bengal로 증감된 사람 적혈구의 광용혈에 대한 참죽나무 새순 추출물의 억제 효과를 측정하였을때 ethyl acetate 분획과 aglycone 분획 모두 농도 의존적($5{\sim}25\;{\mu}g/mL$)으로 세포보호 효과를 나타내었다. Tyrosinase의 활성 저해 효과($IC_{50}$)는 참죽나무 새순 추출물의 ethyl acetate 분획과 aglycon 분획에서 각각 $48.00\;{\mu}g/mL$, $5.88\;{\mu}g/mL$으로 나타났으며 aglycone 분획의 경우 강력한 미백제인 arbutin ($226.88\;{\mu}g/mL$)에 비해 약 40배정도 더 우수한 활성을 갖는다. 이상의 결과들은 참죽나무 새순 추출물이 활성산소종을 소거하고 활성산소종에 대항하여 세포막을 보호함으로써 생체계, 특히 태양 자외선에 의해 손상된 피부에서 항산화제로서 작용할 수 있음을 가리키며, tyrosinase 저해활성으로부터 미백 기능성 화장품원료로서 응용 가능성이 있음을 시사한다.
Objective: This study was performed to investigate the depigmentation effects of the extracts of Kamikwibi-Tang. Methods Inhibition of tyrosinase activity, melanin production & cell viability in cultured B16 melanoma cells, UV screen and cytoprotective effects on PC12 cells injured by hydrogen peroxide were measured. Results: The extracts of Kamikwibi-Tang did not have any inhibitory effects on tyrosinase activity and did not show any inhibitory effects on melanin production in melanoma cells and also did not have any inhibitory effects on UV screen. But the extracts showed high cytoprotective effects on PC12 cells injured by hydrogen peroxide. Conclusion : These results suggest that Kamikwibi-Tang indrectly inhibits melanin biosynthesis which is involved in hyperpigmentation and could be used as a whitening agent for the skin.
니겔라 사티바(Nigella sativa Linn.) 오일의 미백 효능을 확인하기 위하여 니겔라 사티바 오일 및 오일에서 분리된 유효성분들을 버섯 타이로시네이즈 효소, B16 멜라노마 세포를 이용하여 멜라닌 생성에 관련된 다양한 실험을 실시하였다. B16-F10 멜라노마 세포를 이용한 멜라닌 저해 활성시험 결과에서 니겔라 사티바 오일은 10 mg/mL의 농도에서 약 86 %의 멜라닌 생성을 억제하였으며, RT-PCR과 Western blot을 통한 멜라닌 생성 기작에 대한 영향을 조사한결과, 멜라닌 합성의 주요 단백질인 타이로시네이즈 발현 저해효과가 우수하게 나타났다. 또한, tyrosinase related protein-1 (TRP-1) 및 tyrosinase related protein-2 (TRP-2)의 발현이 억제되는 것을 확인하였다. 따라서, 니겔라 사티바오일은 멜라닌 생합성 저해 효과뿐만 아니라, 멜라닌 합성에 필수적인 효소(타이로시네이즈, TRP-1, TRP-2)의 발현저해를 통해 미백 효과를 나타내는 것으로 확인되었으며, 이에 따라 니겔라 사티바 오일은 멜라닌 생합성을 저해하는미백 소재로 활용할 수 있을 것으로 사료된다.
Korean ginseng(Panax Ginseng C.A. Meyer) known as a oriental miracle drug is an important medicinal plant. Ginseng has been used for geriatric, tonic, stomachic, and aphrodisiac treatments for thousands years. Also, it is an antibiotic and has therapeutic properties against stress and cancer. Ginseng is widely distributed all over the world. Among them, Korean mountain ginseng has the most valuable effect on pharmaceuticals. The roots of mountain ginseng contained several kinds of ginsenosides that have many active functions for the human body. However, the study of mountain ginseng has a limit because the mountain ginseng is very expensive and rare. So, we artificially cultured mountain ginseng adventitious roots using the bioreactor culture system. We induced callus from original mountain ginseng, directly dug up in mountain and aged about one hundred ten years. Separated adventitious roots were precultured in 500ml conical flasks and then, transferred in 20L bioreactors. The adventitious roots of mountain ginseng were harvested after culturing for 40days, dried and then, extracted with several solvents. In this study, we investigated the whitening effect, anti-wrinkle effect and the safety of tissue cultured adventitious roots extract of mountain ginseng in order to identify the merit as a cosmetic ingredient. Particularly, extract of mountain ginseng adventitious roots showed whitening and anti-wrinkle effects. The inhibitory effect of this extract on the melanogenesis was examined using B-16 melanoma cell. When B-16 melanoma cells were cultured with adventitious root extract, there was a dramatically decrease in melanin contents of 8-16 melanoma cell. And we identified this extract inhibited Dopa auto-oxidation significantly. Also, when transformed mouse fibroblast L929 cells were treated with this extract, there was a significant increase in collagen synthesis. The results show significant inhibited melanization and wrinkle without inhibiting cell viability.
본 연구는 택사의 화장품 원료로서의 특성을 알아보기 위하여 화장품의 기능들인 항산화, 미백, 세포 손상 회복 및 항염증과 관련된 다양한 실험을 실시하였다. 30, 70, 100% MeOH 용매로 추출한 택사 추출물들은 DPPH법으로 실시한 free radical scavenging assay에서 좋은 활성을 보여주었고, tyrosinase 활성 억제 시험에서도 0.5% 이상의 농도에서 농도 의존적인 활성을 보여주었다. Human fibroblast를 사용한 proliferation assay (MTT assay)에서 각 용매 추출물들은 별다른 효과를 보여주지 못했고 0.05% 이하의 농도에서는 세포 독성으로부터 안전하다는 것을 알 수 있었다. Bl6 melanocyte를 사용한 melanin 생성 억제시험에서 각 용매별 추출물은 독성으로부터 안전한 0.05% 이하의 농도에서 melanin 생성을 40% 이상 억제하는 높은 활성을 보여주었다. 이후 우리는 택사 추출물의 MPLC분리 분획을 실시하여 세 가지 분획을 얻었으며 이들을 대상으로 세포 손상 회복시험과 melanin생성 억제 시험, 염증인자 생성 억제 시험을 실시하였다. 그 결과 분획물들 중 3번 분획물이 세포 손상 회복을 30% 이상 올려주는 좋은 결과를 보여주었고, melanin 생성 억제 시험과 COX-2 생성억제에서도 주목할만한 결과를 보여주었다.
Objective : In this study, herbal medicine(GJE, Gardenia jasminoides Ellis; HCT, Houttuynia cordata Thunb.; CIL, Chrysanthemum indicum Linne; PMS,Paeonia moutan Sims, P. subfruticosa Makino; APL, Agrimonia pilosa Ledebour) were screened for their inhibitory activities against Tyrosinase and PMA plus A23187-induced $TNF-{\alpha}$, IL-6, IL-8 productions in HMC-1 cells to reveal their skin -whitening and anti-allergic effect. Method : To investigate Tyrosinase inhibition we treated Mushroom Tyrosinase(Fluka, 93898) $10{\mu}{\ell}$ and 7.5mM Tyrosine (Sigma, T3754) $20{\mu}{\ell}$ with 80% ethanol medicine extracts. Then we observed 96well micro plate extinction at 490nm. In the next experiment, to investigate Anti-allergic effect we blended cultured Human Mast Cells(HMC-1) with medicine extracts. We treated the blended solution with Phorbol 12-myristate 13-acetate(PMA) and A23187, then observed $TNF-{\alpha}$, IL-6, IL-8 by ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) at 450nm. Results : In inhibiting Tyrosinase the results are as follows. 1. We observed 22% inhibition of Mushroom Tyrosinase at $500{\mu}g/m{\ell}$ concentration of GJE extracts. 2. We also could observe that the decreased Mushroom Tyrosinase activities in HCT, CIL extracts. In inhibiing $TNF-{\alpha}$, IL-6, IL-8 productions in HMC-1 cells the results are as follows. 1. Of the extracts examined, HCT, PMS, APL extracts showed over 50% inhibitions of Cytokines at $200{\mu}g/m{\ell}$ concentration. 2. In particular, APL extracts showed the best inhibitory effect on Cytokine productions in a dose-dependent manner. Conclusion : These results suggest that GJE extracts contributes to the anti melanin activities and represent a potential source of whitening agent. Thus these herbal medicines suggest novel drugs on anti-allergic effects.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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