White and brown strains of Flammulina velutipes were inter-crossed. All $F_1$ showed light-brown fruitbody, suggesting that a gene for the brown fruitbody was incompletely dominant against the white one. And backcross experiment showed that more than two genes were involved in color determination. To isolate a molecular marker linked to fruitbody color, a set of primers was designed from a sequence of clones derived by a bulked segregant analysis. These markers showed a specific band which co-segregated with brown fruitbody forming strains.
Bottle cultivation was conducted to clarify varietal differences and physiological characteristics of oyster mushroom under different temperatures. Mushroom pinheading and yield in each temperature showed different results according to the strains. Specially, Weonhyeong3-ho could not sprout over $16.5^{\circ}C$, but after pinheading at $13^{\circ}C$, its fruitbody was able to grow normally at all tested temperatures. Sambok, a high temperature strain, sprouted at $10^{\circ}C$ and then withered up. Fruitbody of this strain obtained at $13^{\circ}C$ could not grow normally at $10^{\circ}C$ and $25^{\circ}C$ conditions. Colour of fruitbodies turned close to white at high temperature. On the other hand, at low temperature, strains with gray fruitbody changed close to black and those with brown fruitbody turned to dark brown. With regards to fruiting trait, pinheading aspects were good even at low temperature. Those were, however, uneven and sprouted in patches and resulted in low quality and productivity as the temperature increased. When black fruitbody at $13^{\circ}C$ were moved to $23^{\circ}C$ and then to $13^{\circ}C$ again, colour of fruitbody turned to white and then recovered to blackish gray. These results confirmed that the colour of fruitbody responds to cultivation temperature.
Perforated vinyl mulching technique was performed on Pleurotus sajor-caju beds to assess fruitbody formation. Individual fruitbody of P. sajor-caju was transformed into bunch type on vinyl mulching bed. It was effective to grow the mushroom without waterlogging and abortion of small pins on the beds as well as hygienical bed management. A bunch showed 79 fruitbodies and 225 g of weight. Available site for fruiting was reduced up to 20% in comparison of 100% for conventional bed. The color of fruitbody turned on brownish white from treated vinyl mulching bed.
Five strains of Pleurotus sajor-caju were collected from some countries including India and Papua New Guinea. Four strains produced brown fruitbody but the other strain from Papua New Guinea produced white fruitbody. Monokaryons obtained from both strains producing brown fruitbody and white fruitbody were mated each other. They showed different mating types such as brown strain of $A_1A_2B_1B_2$ and white strain of $A_3A_4B_3B_4$. DNAs were isolated from mycelia of five strains of P. sajor-caju. Mitochondrial DNA was seperated from nuclear DNA by bisbenzimide-CsCl ultracentrifugation. Digestion of the fungal mitochondrial DNA with Eco RI restriction endonuclease yielded from ten to fourteen fragments. Two strains of the five strains showed different restriction pattern of mitochondrial DNA from the other three strains. Summation of the fragment sizes gave a mitochondrial DNA size of about 60 to 65kb.
Esterase isozyme band patterns were compared between the wild strain and commercial strain of Flammulina velutipes. Monospores were isolated from wild strain. ASI4019 and their mating types were determined. We investigated the relationship between pigmentation on the plate and fruitbody color to understand genetic relationship among F. velutipes strains. Dikaryotic strains mated between nonpigmenting strains produced white fruitbodies. However dikaryon obtained from mating between nonpigmenting monokaryon and brown pigmenting monokaryon produced brown fruitbody as the dikaryon obtained from mating of brown pigmenting monokaryons. The white fruitbody from wild strain was distinguished from that of commercial strain. When the nonpigmenting wild monokaryon was mated with commercial monokaryon, pale brown mushroom was produced. The BC1F1 was obtained by mating the above mentioned $F_1$ with commercial monokaryon. Fruitbody color of BC1F1 shared two types; one strain with all pale brown fruitbodies, and the other strain with separated eight pale brown and two mixed type involving pale brown and white fruitbodies.
Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation(ATMT) of Flammulina velutipes was used to produce a diverse number of transformants to discover the functions of gene that is vital for its variation color, spore pattern and cellulolytic activity. Futhermore, the transformant pool will be used as a good genetic resource for studying gene functions. Agrobacterium-mediated transformation was conducted in order to generate intentional mutants of F. velutipes strain KACC42777. Then Agrobacterium tumefaciens AGL-1 harboring pBGgHg was transformed into F. velutipes. This method is use to determine the functional gene of F. velutipes. Inverse PCR was used to insert T-DNA into the tagged chromosomal DNA segments and conducting sequence analysis of the F. velutipes. But this experiment had trouble in diverse morphological mutants because of dikaryotic nature of mushroom. It needed to make monokaryotic fruiting varients which introduced genes of compatible mating types. In this study, next generation sequencing data was generated from 28 strains of Flammulina velutipes with different phenotypes using Illumina Hiseq platform. Filtered short reads were initially aligned to the reference genome (KACC42780) to construct a SNP matrix. And then we built a phylogenetic tree based on the validated SNPs. The inferred tree represented that white- and brown- fruitbody forming strains were generally separated although three brown strains, 4103, 4028, and 4195, were grouped with white ones. This topological relationship was consistently reappeared even when we used randomly selected SNPs. Group I containing 4062, 4148, and 4195 strains and group II containing 4188, 4190, and 4194 strains formed early-divergent lineages with robust nodal supports, suggesting that they are independent groups from the members in main clades. To elucidate the distinction between white-fruitbody forming strains isolated from Korea and Japan, phylogenetic analysis was performed using their SNP data with group I members as outgroup. However, no significant genetic variation was noticed in this study. A total of 28 strains of Flammulina velutipes were analyzed to identify the genomic regions responsible for producing white-fruiting body. NGS data was yielded by using Illumina Hiseq platform. Short reads were filtered by quality score and read length were mapped on the reference genome (KACC42780). Between the white- and brown fruitbody forming strains. There is a high possibility that SNPs can be detected among the white strains as homozygous because white phenotype is recessive in F. velutipes. Thus, we constructed SNP matrix within 8 white strains. SNPs discovered between mono3 and mono19, the parental monokaryotic strains of 4210 strain (white), were excluded from the candidate. If the genotypes of SNPs detected between white and brown strains were identical with those in mono3 and mono19 strains, they were included in candidate as a priority. As a result, if more than 5 candidates SNPs were localized in single gene, we regarded as they are possibly related to the white color. In F. velutipes genome, chr01, chr04, chr07,chr11 regions were identified to be associated with white fruitbody forming. White and Brown Fruitbody strains can be used as an identification marker for F. veluipes. We can develop some molecular markers to identify colored strains and discriminate national white varieties against Japanese ones.
Five white fruitbodies of Ganoderma lucidum found from two different mushroom farms, and the characteristics of atypical fruiting structure formation of these strains were described. The white fruitbodies were spontaneously generated on Quercus-log during the cultivation. They did not differentiate to the normal fruitbodies with pileus, hymenium, stipe and coloration, and fruitbodies remained non-laccateed even after 3 months. Dikaryotic mycelia isolated from the five white fruitbodies differed from wild-type strains in the mycelial growth rate, colony color, and the capacity of atypical fruiting structure (AFS) formation on agar media. These white mutants readily induced brown colored AFSs on the colonies under ventilation and illumination conditions. Both isolates Gl-010 and Gl-011 that were obtained from a normal and white fruitbody, respectively, did not form AFSs in the dark and/or under black light blue (BLB) light illumination, but induced under the visible light. They required dim light for the AFS formation, and the AFS formation was inhibited up to $0.5{\mu}mol\;m^{-2}\;S^{-1}$ in light intensity. However, the other four isolates induced AFSs even in the dark and BLB illumination, although their parent strain, isolate Gl-030, did not form AFSs under any light conditions. The monokaryotic mycelia derived from basidiospores of the AFSs of the white mutants were compatible with the original culture (dikaryon) on a dual culture.
Winter mushroom, Flammulina velutipes, needs low temperature during its cultivation. To save on farm costs, especially during summer, a strain adaptable to a higher or elevated-temperature must be developed. At the start of breeding program, parental strains which could endure high temperature were obtained. Seuenty four dikaryotic strains were collected and divided into four groups according to the nature of temperature. They also had different fruiting temperature. Finally we selected three brown strains ASI 4048, 4057 and 4072, and collected their spores. These selected strains can germinate even at a high temperature of $32^{\circ}C$, which were dramatically higher than the other strains. Based on these results, the new white strain adapted to mid-temperature by backcross mating was developed. Molecular markers were applied to select white fruitbody producing strains without cultivation. They showed a specific band which co-segregated with brown fruitbody forming strains in $BC_1F_1$ progenies. Selected white strains were tested under several elevated temperature conditions.
The characteristics of monosporous isolates of winter mushroom [Flammulina velutipes (Curt. ex Fr.)] were investigated to obtain useful breeding materials. Within monokaryons from cultivars which have a white colored fruitbody showed narrow genetic variation, while domestic strains which have a brown colored fruitbody showed wide variation. The mating type of the white strains was A1A2B1B2 genotype, but that of the domestic brown strains were A3A4B3B4. In intra-crossing, the genetic stability of dikaryons mated by monokaryons from white strain was less than that of parents. While in brown strain, dikaryons with high yield and color variation were obtained.
Journal of Practical Agriculture & Fisheries Research
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v.16
no.1
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pp.25-35
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2014
Tremella fuciformis produces white jelly fruitbody which is used as a special food in the orient. Symbiotic relationship between T. fuciformis and Hypoxylon sp. is important for mass production of fruitbody in T. fuciformis. T. fuciformis showed the peak of 24mg/2mL on the 9th day, after that mycelial growth maintained a gentle curve. Protein content increased into 0.69㎍/mL in rapid, T. fuciformis fruiting body maintained high galactose, mycelia of T. fuciformis showed 42.6% trehalose.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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