The present study were performed to analysis the hematocrit and the red blood cells content into the blood plasma of the transgenic pigs harboring recombinent human erythropoietin gene (rhEPO). Mouse whey acidic protein (mWAP) linked to rhEPO gene was microinjected into pronuclei of porcine one-cell zygotes. After delivered of offspring, PCR analyses identified one mWAP-rhEPO transgenic founder offspring(F$_{0}$). The first generation of transgenic pig (F$_{0}$) harboring mWAP-hEPO appeared to be a male, and the second generation (F$_1$) pigs were made by natural mating of F$_{0}$ with domestic swine, and male and female transgenic pigs (F$_1$) were identified by PCR. The blood samples from transgenic and normal pigs were collected for 50 days during lactation and were counted the red blood cell (RBC) numbers and Hematocrit (HCT) content into the blood. The transgenic pigs expressing rhEPO in their blood gave rise to higher RBC numbers and HCT contents than control animals. rhEPO was secreted both in the blood and milk of genetically engineered pigs harboring rhEPO gene. Therefore, this study provides a model regarding the production of transgenic pig carrying hEPO transgene for biomedical research.earch.
본 연구는 생명공학 관련 기술개발에 의하여 신소재 물질을 생산하고 사람에게 안전하고 생리활성이 높은 고가의 의료용 단백질 생산기술을 체계화하며 형질전환 가축을 이용한 유용물질 생산에 따른 산업화와 부가가치의 극대화에 그 목적이 있다. 유즙으로 사람의 빈혈치료제인 EPO(Erythropoietin)를 분비할 수 있는 형질전환돼지를 생산하기 위하여 WAP(Whey Acidic Protein) Promoter(2.6kb) 하류에 사람의 조혈촉진유전자(EPO: 2.6kb)를 연결시켜 미세주입용 재조합 벡터(WAP-EPO : 약 7.8kb)를 구축하였다. 구축된 재조합 벡터를 1세포기 수정란에 약 2ng/ul 농도로 미세주입한 다음 외과적 방법으로 이식하였다. 이식 후 분만 모돈으로부터 생산된 자돈의 꼬리조직을 이용 게놈DNA를 추출하고 PCR 검정을 한 결과, 유즙으로 사람의 빈혈치료제를 생산할 수 있는 유전자가 도입된 형질전환돼지 $\boxDr$새롬이$\boxUl$ (♂)를 확인하였다. 또한 이렇게 꼬리조직으로부터 확인된 새롬이의 혈액과 정액을 채취, 게놈 DNA를 추출하여 외래 유전자 삽입여부를 PCR 방법으로 검정한 결과 꼬리조직과 마찬가지로 혈액 및 정액에서도 외래유전자가 삽입되었음을 확인할 수 있었다. 이렇게 생산된 형질전환돼지 $\boxDr$새롬이$\boxUl$를 이용 계대번식을 통한 F$_1$ 산자의 생산과 유전자 전이율을 확인하기 위하여 $\boxDr$새롬이$\boxUl$정액을 이용한 인공수정을 실시하였다. 인공수정은 1999년 7월 1일부터 2000년 9월 8일 까지 총 78두의 모돈을 이용하였으며, 그 중 21두의 모돈이 분만하여 인공수정에 의한 분만율은 26.92%로 나타났다.(Table Omitted) Table 1에서와 같이 새롬이 정액을 이용한 인공수정에 의해 형질전환된 F$_1$ 자돈의 형질전환율은 17.98%로 나타났으며, 32두의 형질전환자돈 중 8두(암:4두, 수:4두)는 분만과 동시에 폐사하였거나 사육중 폐사하여 현재 24두(암:12두, 수:12두)가 생존하여 F$_1$ 간 교배계획에 의해 사육되고 있다. 이 중 암컷 4두는 현재 F$_2$ 자돈 생산과 함께 유즙내로 사람 빈혈치료제의 분비 유무를 검정중에 있으며, FISH 법에 의한 외래 유전자 삽입 검정을 확인 중에 있다.
Li, Defa;Qiao, Q.;Johnson, E.W.;Jiang, J.;Wang, F.;Blum, R.;Allee, G.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.12
no.8
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pp.1263-1272
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1999
The effects of carnitine in diets with or without added fat (5% lard or soybean oil) were evaluated in 72 Large White ${\times}$ Landrace ${\times}$ Duroc pigs weaned at 35 days of age. Pigs were fed a 1.30% lysine corn-soybean basal diet+15% dried whey+4% fish meal with carnitine at 0 or 50 mg/kg and either 0% added fat, 5% soybean oil or 5% lard for 6 weeks in a $2{\times}3$ factorial trial (6 treatments, 3 pens per treatment, 4 pigs per pen). Addition of carnitine increased average daily gain (ADG) and average daily feed intake (ADFI) in the second two weeks of the six-week trial and overall, but had no significant effect on feed per gain (F/G). Lard alone depressed ADG (p<0.05) in the last two weeks of the trial and overall, but the ADG for pigs fed lard+carnitine was similar to the control. Lard reduced feed intake in the first two weeks of the trial (p<0.05). Carnitine reduced the percentage of pigs with poor (ADG<375 g/d) growth (15 vs 40%; p<0.05). The greater uniformity of growth was most evident in low-weaning-weight pigs in the second period (16 vs 62%, p<0.005). Addition of fat did not produce any positive effect on uniformity and had no interaction with carnitine on uniformity. Carnitine addition increased serum total carnitione and short-chain acyl-carnitine levels (p<0.05), but did not modify free carnitine levels. Serum carnitine levels were lower at weaning than at 14, 28, or 39 days after weaning (p<0.05). Carnitine increased serum protein levels on day 14 (p<0.05). Addition of fat in the form of soybean oil or lard did not improve piglet growth performance. Addition of 50 mg/kg of carnitine to the diet of weanling pigs enhanced postweaning performance.
The effects of various nutrients added to soy milk on the growth of Lactobacillus acidophilus were investigated. Soy milk was prepared from defatted soy flour and various nutrients such as sugars, growth stimulating agents, amino acid and milk by-products. The growth curve obtained from the experiment suggested that the log phase ended after 12hr. Glucose and fructose greatly enhanced the acid production by L. acidophilus. The optimum concentration of these two sugars in the media was approximately 3% each. Among the tested growth stimulating agents, yeast extract stimulated the acid production by L. acidophilus, and the optimum concentration of this additive was approximately 0.5%. L-methionine reduced the acid production by L. acidophilus. Whey powder and skim mills powder did not significantly stimulated the growth and acid production by L. acidophilus. Concentration of protein in soy milk did not affect the growth and acid production by L. acidophilus.
Yu, Jae-Min;Renchinkhand, Renchinkhand;Bae, Hyoung Churl;Jeong, Seok Geun;Paik, Seung-Hee;Nam, Myoung Soo
Korean Journal of Agricultural Science
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v.40
no.4
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pp.359-365
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2013
The aim of this study was to produce enzymatic hydrolysis of ${\alpha}$-LA, ${\beta}$-LG and BSA with alcalase for the possible application of hypoallergenic foods toward cow's milk allergenic infant. The molecular weights of most of the peptides in hydrolysates from ${\alpha}$-LA, ${\beta}$-LG and BSA by alcalase were below 3,000 dalton. Antigenesity of ${\alpha}$-LA, ${\beta}$-LG and BSA hydrolysates to rabbit anti-${\alpha}$-LA antiserum, ${\beta}$-LG antiserum and BSA antiserum were remarkably decreased by more than $10^{-3}$ at 20% inhibitionrate. Antigenesity of polyvalent antigenic peptide in ${\alpha}$-LA, ${\beta}$-LG and BSA hydrolysates to specific rabbit anti-${\alpha}$-LA antiserum, ${\beta}$-LG antiserum and BSA antiserum was determined by PCS test using guina-pig. Hydrolysates of ${\alpha}$-LA, ${\beta}$-LG and BSA with less than 3,000 dalton did not show polyvalent antigenic reaction against rabbit antiserum. Hydrolysates of ${\alpha}$-LA, ${\beta}$-LG and BSA could be a source for the manufacturing of hypoallergenic food.
The trend towards ageing populations has been observed over many years in Europe and the US but has accelerated significantly in developed countries in Asia including Japan and South Korea. In the latter country the elderly population (65+) has increased 5-fold between 1960 and 2000 and this group will comprise 40% of the population by 2050. This creates a new socio-economic group with specific demands and considerable spending power. As ageing occurs a range of changes occur in the body that can be moderated by adjustments in nutrition. A significant body of evidence points to changes in the balance of glutathione synthesis and utilisation as people age. Glutathione is the most important natural anti-oxidant of the body and the amounts present can become limited by available cysteine in the diet. A cysteine-enriched peptide product, Cysteine Peption$^{TM}$ has been developed by DMV International for dietary supplement and food applications. A qualitative consumer trial has indicated benefits including improved sleep and more energy. Animal and clinical trials will be described that provide indications on bioavailability and possible mechanisms of action of Cysteine Peption$^{TM}$ with particular focus on the ageing population.
Changes in milk quality during storage of extended shelf life milk (ESL milk) and non-ESL milk were evaluated. No significant differences were observed between ESL and typical ultra high temperature-treated (UHT) milk in physicochemical properties including non-casein nitrogen (NCN) content, whey protein nitrogen index (WPNI), and L-ascorbic acid content. Low temperature and long time-treated milk (LTLT milk) had significantly higher NCN content and WPNI than those of UHT milk. In terms of microbial quality, yeast, molds, coliforms, and other bacteria were not detected in ESL milk during entire storage (21 days after expiration date) period at 4 and $25^{\circ}C$, while LTLT milk was more susceptible to microbial infection. Rats fed ESL milk resulted in significantly higher body weight, average daily gain, and feed efficiency than those given UHT milk. These results suggest ESL milk maintains better microbial quality than typical UHT milk, particularly during storage under extended refrigeration and at high temperature.
The effects of continuous GH(hGH) secretion on the female reproduction was studies in adults female transgenic rats expressing the hGH gene with a mouse whey acid protein (mWAP) promotor. Two line of transgenic female rats carrying the mWAP/hGH gene were established and used in the study. One was characterized by relatively high levels of serum hGH (high line), and the other had relatively low levels (low line). 1. High line female rats had recurring, Pseudopregancy-like estrous cycles accompanied by increased serum progesterone level for 2 weeks after ovulation, and they were fertile. 2. In the rats, luteinization occurred spontaneously without cervical stimulation, probably due to high levels of serum hGH, which has prolactin (PRL)-like activity in the rat. 3. Low line female rats had recurring, regular 4-days estrous PRL surge following cervical stimulation were not, detected and PRL secretion was not induced by a dopamine antagonist. 4. The ovarian tissue in this line had a much higher number of corpora lutea and grew much heavier than in normal littermates, suggesting impairment of PRL induced structural luteolized. Su, pp.ession of PRL secretion in the low line rats was, at least in part, due to a marked decrease in the number of lactotrophs in the pituitary. The present study shows that the serum hGH level plays a crucial role in regulating luteal function in female transgenic rats expressing the hGH gene.
Edible films were developed from jujube (Zizyphus jujube Miller) using depolymerization processes of ultrasound and high-pressure homogenization. A 4.6% (w/w) jujube hydrocolloid was treated by ultrasound (600W, 20 min) or homogenized at high pressure (172 MPa, 6 s) and mixed with whey protein isolate, glycerol, xanthan, and sucrose esters of fatty acids to form film-forming solutions from which films were formed by drying. The film prepared by highpressure homogenization (HPH film) produced more homogeneous films without particles than those prepared without depolymerization or with the ultrasound treatment. HPH films possessed the highest tensile strength (4.7MPa), the lowest water vapor permeability ($2.9g{\cdot}mm/kPa{\cdot}h{\cdot}m^2$), and the most uniform and dense microstructures among the films. Flavor profiles of jujube powder and the films were distinguishable. Heat seal strength and oxygen permeability of the HPH films were 44.4 N/m and $0.025mL{\cdot}{\mu}m/m^2$/day/Pa, respectively. Antioxidant activities of jujube power and HPH films were not significantly different.
The effects of adding green tea powder on the quality and storage characteristics of tofu were studied. As the addition of green tea powder increased, the moisture content of tofu was decreased but those of crude protein and the crude ash were increased. The addition of green tea powder increased the production of whey and consequently decreased the yield of tofu. At the beginning of storage, the pH of the tofu with green tea powder was increased, but decreased rapidly at the eighth day of storage. The pH of tofu-soaking solution was decreased during the storage period. The L and b values showed no significant changes but a value was increased during storage. Textural characteristics of tofu added with green tea powder also did not show significant changes during storage. Although the total plate counts and absorbances of soaking solution of tofu were increased during storage, the samples with 1.0% green tea powder had the lowest TPC (3.0$\times$10$\^$6/ CFU/ml) and the lowest absorbance (0.175) at the eighth day of storage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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