지하수는 전 세계적으로 널리 이용되는 음용수원이다. 하지만, 병원성 미생물에 의한 지하수 오염은 매우 심각한 환경문제로써 음용수의 수질을 저하시키고 인류의 건강을 위협한다. 지하수를 오염시키는 병원성 미생물은 바이러스, 세균, 원생동물 등이 있는데, 이중 바이러스는 박테리아나 원생동물보다 크기가 훨씬 작기 때문에 토양을 통과하는 과정에서 잘 제거되지 않고, 지하수 환경에서 이동성이 뛰어나다. 토양과 대수층에서 바이러스 거동 연구는 지하수의 병원성 미생물 오염 취약성을 판단하고 안전한 음용수원을 확보하는데 꼭 필요하다. 또한, 이러한 연구는 공중 보건을 위한 정책 및 규정을 제정하기 위한 중요한 정보를 제공한다. 본 논문에서는 최근까지의 지중 환경에서 바이러스 거동과 관련하여 수행된 연구들을 현장 조건에서 수행된 것과 실험실 조건에서 수행된 것으로 나눠 정리하였다. 또한, 이러한 연구들을 통해 알려진 바이러스의 거동에 영향을 미치는 인자들을 제시하였다. 그리고, 최근 바이러스 거동 연구에 널리 이용되는 박테리오파지의 특성을 정리하였고, 바이러스 거동을 모사하는데 이용되는 수학적 모델과 콜로이드 여과이론을 제시하였다. 지금까지의 연구결과를 바탕으로 향후 연구는 바이러스 오염원으로부터 지하수를 보호한다는 측면에서 바이러스 보호구역의 설정과 관련된 연구들이 활발히 진행되어야 할 것으로 판단된다. 특히, 바이러스 보호구역 설정과 관련하여 이격거리나 이동시간을 계산할 수 있는 수학적 모델을 개발하고 모델과 관련된 파라미터들의 정보를 축적하는데 집중되어야 할 것으로 판단된다.
Non-viral vectors, including lipid- or polymer-based systems, have attracted much attention to date as a gene delivery vehicle, due to safety issues with viral vectors. Chitosan, a naturally existing cationic polymer, has shown great potential as a gene delivery carrier, as it has low immunogenicity and toxicity, excellent transcellular transport ability, and is relatively easy to chemically modify. This review summarizes and discusses the general features of chitosan and its applications as a delivery carrier of DNA and RNA.
Herpes simplex is caused by viruses of the herpesvirus hominus family. HSV have four categories: type 1, 2, 6, and 8. Generally HSV-1 affects the mouth. Once infected by HSV, the person's infection is permanent. Retrograde transport through adjacent neural tissue to sensory ganglia leads to a lifelong latent infection. Recently, we treated a patient with recurrent herpes-stomatitis mimicking acute necrotizing ulcerative gingivitis (ANUG). The results were satisfactorty so we report this case. 31 years old male patient showed sore throat, gingival ulceration, palpable both submandibular lymph node, and sulcular pus formation around posterior decayed teeth. This is the third time he has suffered from this symptom. Tentative diagnosis was acute necrotizing ulcerative gingivitis. Antibiotic therapy was started. But, intraoral symptom got worse in process of time. Especially ulcer of marginal gingiva got worse. Viral disease was suspected. We carried out viral cultivation. At the same time topical application of antiviral ointment (herpecid$^{(R)}$) was performed on oral ulcer unilaterally for the purpose of diagnosis and reducing pain experimentally. The next day pain was decreased dramatically on application area. Basing on the viral cultivation and clinical effect of antiviral ointment (herpecid$^{(R)}$), we have diagnosed it as a recurrent herpes-stomatitis and concluded that viral infection was major cause of disease and bacterial infection was secondary.
Tomato yellow leaf curl China virus is a species of the widespread geminiviruses. The infection of Nicotiana benthamiana by Tomato yellow leaf curl China virus (TYLCCNV) causes a reduction in photosynthetic activity, which is part of the viral symptoms. ${\beta}C1$ is a viral factor encoded by the betasatellite DNA ($DNA{\beta}$) accompanying TYLCCNV. It is a major viral pathogenicity factor of TYLCCNV. To elucidate the effect of ${\beta}C1$ on plants' photosynthesis, we measured the relative chlorophyll (Chl) content and Chl fluorescence in TY-LCCNV-infected and ${\beta}C1$ transgenic N. benthamiana plants. The results showed that Chl content is reduced in TYLCCNV A-infected, TYLCCNV A plus $DNA{\beta}$ (TYLCCNV A + ${\beta}$)-infected and ${\beta}C1$ transgenic plants. Further, changes in Chl fluorescence parameters, such as electron transport rate, $F_v/F_m$, NPQ, and qP, revealed that photosynthetic efficiency is compromised in the aforementioned N. benthamiana plants. The presense of ${\beta}C1$ aggravated the decrease of Chl content and photosynthetic efficiency during viral infection. Additionally, the real-time quantitative PCR analysis of oxygen evolving complex genes in photosystem II, such as PsbO, PsbP, PsbQ, and PsbR, showed a significant reduction of the relative expression of these genes at the late stage of TYLCCNV A + ${\beta}$ infection and at the vegetative stage of ${\beta}C1$ transgenic N. benthamiana plants. In summary, this study revealed the pathogenicity of TYLCCNV in photosynthesis and disclosed the effect of ${\beta}C1$ in exacerbating the damage in photosynthesis efficiency by TYLCCNV infection.
본 연구의 목적은 미국 환경보호청에서 개발한 확률적 정량모델인 VIRULO 모델의 구성과 특성을 분석하는 것이다. 이 모델은 몬테카를로 방법을 이용하여 수리지질학적 차단벽으로써 토양의 바이러스 저감능을 평가할 수 있는 모델이다. 모델에 사용된 지배방정식은 크게 불포화 지역에서의 물의 흐름식과 바이러스의 이동식으로 구성되어 있다. 사용되는 파라미터들 중, 물의 흐름과 관련된 파라미터는 11종류의 토양에 대하여 UNSODA 데이터베이스로부터 얻어진 것 들이며, 바이러스와 관련된 파라미터 값들은 다섯 종류의 바이러스에 대하여 문헌조사를 통해 정리된 것이다. 모델은 목표로 하는 바이러스 저감 역치값과 특정 조건에서 몬테카를로 모사를 통해 얻어진 토양의 바이러스 저감인자를 비교하여, 목표로 하는 바이러스 저감 역치값에 도달하지 못하는 확률을 결정한다. 그리고, 몬테카를로 모사횟수와 목표 역치값에 도달하지 못한 횟수를 결과물로 제시한다. 11개의 USDA 토양을 대상으로 바이러스 저감을 평가한 결과, 양질사토와 모래의 바이러스 저감능이 점토나 미사 계열의 토양에 비하여 상당히 떨어지는 것으로 평가되었다. 5종의 바이러스를 대상으로 저감을 비교한 결과, 바이러스 간에 저감 정도에 차이가 있는 것으로 나타났으며, 그 중 폴리오바이러스의 저감 정도가 가장 큰 것으로 분석되었다. 그리고, 토양 함수량이 증가함에 따라 토양의 바이러스 저감능이 급격하게 감소하였으며, 토양의 깊이가 증가함에 따라 바이러스 저감능이 비선형적으로 증가하였다. 본 연구에 의하면, VIRULO 모델은 지중환경에서의 바이러스 위해성 평가에 사용될 수 있는 유용한 스크리닝 도구로 판단된다.
The baculovirus/insect cell expression system is of great value for the large-scale production of normal and mutant mammalian passive glucose-transport proteins heterologously for structural and functional studies. In most mammalian cells that express HepG2, this transporter isoform is predominantly located at the cell surface. However, it had been reported that heterologous expression of other membrane proteins using the baculovirus system induced highly vacuolated cytoplasmic membranes. Therefore, how a cell responds to the synthesis of large amounts of a glycoprotein could be an interesting area for investigation. In order to examine the subcellular location of the human HepG2 transport proteins when expressed in insect cells, immunofluorescence studies were carried out. Insect cells were infected with the recombinant baculovirus AcNPVHIS-GT or with wild-type virus at a MOI of 5, or were not exposed to viral infection. A high level of fluorescence displayed in cells infected with the recombinant virus indicated that transporters are expressed abundantly and present on the surface of infected Sf21 cells. The evidence for the specificity of the immunostaining was strengthened by the negative results shown in the negative controls. Distribution of the transporter protein expressed in insect cells was further revealed by making a series of optical sections through an AcNPVHIS-GT-infected cell using a confocal microscope, which permits optical sectioning of cell sample. These sections displayed intense cytoplasmic immunofluorecence surrounding the region occupied by the enlarged nucleus, indicating that the expressed protein was present not only at the cell surface but also throughout the cytoplasmic membranous structures.
This study was aimed to know the effect of cadmium chloride (CdCl₂) on glucose transport in L6 myotube and its action mechanism. CdCl₂ increased the 2-deoxy- (l-3H)-D-glucose (2-DOG) uptake 1.9 and 2.4 fold at 10 and 25 μM respectively. To investigate the stimulating-mechanism of glucose transport induced by CdCl₂, the wortmannin and PD98059 were used as PI3K (phosphatidylinositol 3-kinase) inhibitor and MAPK inhibitor respectively, which did not affect 2-DOG uptake. This fact suggests that CdCl₂ induced 2-DOG uptake may not be concerned to the insulin signalling pathway. Whereas nifedipine, a calcium channel blocker, and trifluoperazine, a calmodulin inhibitor, were found to inhibit the 2-DOG uptake stimulted by CdCl₂. In addition, we also measured the ROS (reactive oxygen species) production and GSH level in L6 myotube to investigate the correlation between the glucose uptake and ROS. CdCl₂(25 μM) increased ROS generation approximately 1.5 fold and changed the cellular GSH level, but GSSG/GSH ratio remained unchanged. CdCl₂ stimulated 2-DOG uptake and ROS generation were inhibited by N-acetylcystein. And BSO pretreatment, a potent inhibitor of γ-GCS, resulted in the dramatic decrease of 2-DOG uptake and also the increase of the sensitivity to cadmium cytotoxicity. The obtained results suggest that CdCl₂-stimulated glucose uptake might be based on the activation of HMP shunt as an antioxidant defense mechanism of the cells.
Cadmium is well known as a toxic metal and has insulin mimicking effects in rat adipose tissue. This study was undertaken to investigate the effect of CdCl₂ on glucose transport and its mechanism in 3T3 - L1 adipocytes. CdCl₂ exhibits respectively 2.2 and 2.8 fold increases in the 2-deoxyglucose uptake when exposed to 10 and 25 μM of CdCl₂ for 12 hr. To investigate the stimulating mechanism of glucose transport induced by CdCl₂. Wortmannin and PD98059 were used respectively as PI3K inhibitor and MAPK inhibitor, which did not affect 2-DOG uptake. This results suggest that induced 2-deoxy-(l-3H)-D-glucose (2-DOG) uptake by CdCl₂ may not be concerned with the insulin signalling pathway. Whereas nifedipine, a calcium channel blocker inhibited the 2- DOG uptake stimulated by CdCl₂. In addition, we also measured the increased production of Reactive oxygen substances (ROS) and glutathione (GSH) level in 3T3-L1 adipocytes to investigate correlation between the glucose uptake and increased production of ROS with H2DCFDA. CdCl₂ increased production of ROS. Induced 2-DOG uptake and increased production of ROS by CdCl₂ were decreased by N-acetylcystein (NAC). And L-buthionine sulfoximine (BSO) a potent inhibitor of γ-GCS, decreased of 2-DOG uptake. Also NAC and BSO changed the cellular GSH level, but GSH/GSSG ratio remained unchanged at 10, 25 μM of CdCl₂.
Respiratory infections are very common and highly contagious. Respiratory infectious diseases affect not only the person infected but also the family members and the society. As medical sciences advance, several diseases have been conquered; however, the impact of novel infectious diseases on the society is enormous. As the clinical presentation of respiratory infections is similar regardless of the pathogen, the causative agent is not distinguishable by symptoms alone. Moreover, it is difficult to develop a cure because of the various viral mutations. Various respiratory infectious diseases ranging from influenza, which threaten the health of mankind globally, to the coronavirus disease 2019, which resulted in a pandemic, exist. Contrary to human expectations that development in health care and improvement in hygiene will conquer infectious diseases, humankind's health and social systems are threatened by novel infectious diseases. Owing to the development of transport and trading activity, the rate of spread of new infectious diseases is increasing. As respiratory infections can threaten the members of the global community at any time, investigations on preventing the transmission of these diseases as well as development of effective antivirals and vaccines are of utmost importance and require a worldwide effort.
Since 1993, the White Spot Syndrome Virus (WSSV) disease occurred in China among cultured shrimps resulting in mass mortality. Epizootiological surveys undertaken during the outbreak period of 1993-1994 indicated that all stages of Penaeus chinensis, P. japonicus and P. monodon were infected. Consequent to the transport of contaminated shrimp seedlings and seawater, the disease spread all over the farms of China. The disease was more rapidly transmitted at temperatures above $25^{\circ}C$. Challenge experiments showed the causative agent was highly virulent. White spots appeared on the carapace of both span-taneous and experimentally infected shrimps. Moribund shrimps contained turbid hemolymph, hypertrophied Iymphoid organ and a necrotic mid-gut gland. Electron microscopy showed the presence of viral particles in the gills, stomach, lymphoid organ, and epidermal tissue of the infected shrimp. The visions were slightly ovoid with an envelope and averaged 350 $\times$ 150 nm; nucleocapsids measured 375 $\times$ 157 nm. With discontinuous sucrose gradient of 35, 50 and 60% (w/v), the virus was separated from hemolymph of the infected shrimp. The estimated molecular weight of genomic DNA was 237 Kb with EcoR I, 247 Kb with Hind III and 241kb with Pst I. A total of 9 hybridoma colones secreting monoclonal antibodies (MAbs) were produced from mouse myeloma and spleen cells immunized with WSSV. The immunofluorescence assay of gill tissue showed that the MAbs reacted with diseased but not with healthy shrimp. The MAbs belonged to IgGl, IgG2b subclass and IgM class, all with kappa light Immune-electron-microscopy with colloidal gold marker showed the presence of 5 MAbs epitopes on the envelope and one on the capsid of the virus. Baculoviral mid-gut gland necrosis showed the specificity of the MAbs produced. For diagnosis 5 different methods were selected. Using Kimura primers for PCR, or MAbs for immunoblot, ELISA or FAT method, in situ hybridization was carried out to show the gene. All these methods detected WSSV in the organ samples of the diseased shrimp but not in healthy one.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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