In the present experiments, isolated Vibrio species from marine and clinical specimens from July, 1985 to October, 1986, had the results as follows: 1. The 55 strains of Vibrio were isolated and identified; Vibrio parahaemolyticus was 35 strains, Vibrio vulnificus was 10 strains, Vibrio alginolyticus was 10 strains. 2. In the K-serotyping of Vibrio parahaemolyticus, fourteen serotypes identified but three were not strains typable by the availble K-antisera. 3. In the Kanagawa phenomenon experiment of Vibrio parahaemolyticus, it proved positive reaction, 14 of 15 strains(93%) isolated from the patient and 13 of 20 strains(65%) isolated from the nature. 4. In twelve antibiotic resistance experiments, Vibrio parahaemolyticus and Vibrio alginolyticus showed 100% resistance on ampicilline, but Vibrio vulnificus showed 100% sensitivity. But all of them proved 100% sensitivity on chloramphenicol, tetracycline, nalidixic acid. 5. In the antibiotic resistance patterns, Vibrio parahaemolyticus proved that 15 strains(43%) resisted on 4 antibiotics and 5 strains(14%) resisted on 7 antibiotisc and. Vibrio vulnificus proved that 1 strain(10%) resisted on 2 antibiotics and 6 strains(60%) without resistance, Vibrio alginolyticus proved that 7 strains(70%) resisted on 3 antibiotics and 2 strains(20%) resisted on 8 antibiotics.
To investigate the distribution of Vibrio parahaemopyticus in the southern 4 coastal areas, Vibrio parahaemolyticus was isolated from seawater, shellfish and sediment from May to October in 1991, and antimicrobial effect of grapefruit seed extract (GFSE) on the growth of isolated strains were examined. In the 120 sample from 4 coastal areas, 16 strains of Vibrio parahaemolyticus were isolated and identified. The distribution serotype of isolated strains was 10 types of monovalent k-antiserum. Especially k-5 and k-28 were highly distribyted with 3 and 4 strains. 31.3% of isolated strains showed positive on Kanagawa phenomenon test. All isolated Vibrio parahaemolyticus were sensitive to chloramphenicol and gentamycin, 5 and 6 strains were resistant to streptomycin and colistin, respectively. Isolated strains were compared with geographical, month and sample. The distribution of 16 isolated Vibrio parahamolyticus was high at Hadong with 50%(8 strains), on July with 43.8%(7 strains) and from seawater with 37.5%(6 strains) respectively. Minimal inhibitory level of GFSE to Vibrio parahaemolyticus was 50 ppm. With 100 ppm treatment of GFSE, the destroy of cell membrane function, outflow of cell ingredients and ghost morphology of cell were investigated.
The members of the genus Vibrio include harmless aquatic strain as well as strains capable of causing infections in human and fish. Pathogenic mechanisms are only understood for Vibrio cholerae O1 and O139 and not for the majority of Vibrio species. Twelve clinical and nonclinical strains were examined by in vitro and in vivo experiments for the importance of extracellular enzymes as a virulence determinant of Vibrio species. In vivo cytotoxicity assay was performed by injecting approximately $10^{8}$ cells/mL into mice (BALB/c). V. harvyi and V. vulnificus showed 100% lethality within 3hr after bacterial injection. V. fluvialis and four strains of V. parahaemolyticus showed 50% lethality within 4hr. V. mimicus, V. alginolyticus and V. furnissii revealed 30% lethality within 9hr. Nonclinical strains, V. campbellii and V. ordalii, did not show any lethality. In vitro protease and hemolytic activities were also good indicators for clinical and nonclinical strains of Vibrio species. The clinical strains showed much higher activities than nonclinical strains. The activity of some clinical strains of re-isolates was evidently increased. Most clinical strains had $\beta$ hemolytic activity. The results demonstrate that the prevalent distribution of extracellular proteases in pathogenic Vibrio sp. implies their importance as a virulence determinant.
Vibrio 속에 속한 세균에 의한 식중독은 오염된 해산물 식품의 섭취로 인하여 빈번하게 발생하고 있다. 그러므로 해산물을 날것으로 섭취하는 한국인의 특성을 고려할 때, 빠르고 정확한 Vibrio 검출기술은 식품위생 및 공중보건의 측면에서 매우 중요하다. 이와 관련하여 본 연구에서는 전통적인 배지를 이용한 동정방법의 단점을 보완할 수 있는 생화학적 방법인 Vitek 2 system방법과 분자생물학적 방법인 species-specific PCR 방법을 사용하여 얻은 동정결과를 비교 평가하고자 하였다. 본 연구에서는 5개의 Vibrio 표준균주와 16S rRNA gene sequencing 결과에 의하여 Vibrio 속으로 확인된 24개의 분리균주가 이용되었다. Vitek 2 system방법을 이용한 경우, 이와 같이 본 연구에 사용된 29개 균주 중 Vibrio 표준균주 2개(2/5, 40%), 16S rRNA gene sequencing 결과 Vibrio 속으로 확인된 분리균주 15개(15/24, 62.5%) 등의 총 17개 균주(17/29, 58.6%)가 Vibrio 종으로 동정되었다. 그리고 species-specific PCR방법을 이용한 경우, 위의 29개 균주 중 Vibrio 표준균주 5개(5/5, 100%), 16S rRNA gene sequencing 결과 Vibrio 속으로 확인된 분리균주 16개(16/24, 66.7%) 등의 총 21개 균주(21/29, 72.5%)가 Vibrio 종으로 동정되었다. Vitek 2 system방법과 species-specific PCR방법을 이용하여 동정된 결과를 비교하였을 때 표준균주 중 V. parahaemolyticus, V. mimicus 등의 2개(2/5, 40%), 새우분리균주 24개 중에서 16S rRNA gene sequencing 결과 Vibrio 속으로 확인된 분리균주 7개 (7/24, 29.2%) 등의 총 9개(9/29, 31%) 균주들에 대한 동정결과만이 일치하였다.
The distribution of hemolytic Vibrio sp. from sea water of three main beaches located in Busan (Gwangan(G), Haeundae(H) and Songjeong(S) beaches) was investigated from June to September 2006 ; this is mid-summer and the main season for bathing. The monthly detection ratio from each beach was 29.2% (7 of 24 samples, G), 33.3% (8 of 24 samples, H), and 16.7% (4 of 24 samples, S). The most probable number(MPN) of strains detected ranged from 1.8-36(G), 1.8-180(H) and 1.8-18(S) MPN/100mL. Of the isolated strains, 24 strains showed definite hemolytic activity. These 24 strains were identified as Vibrio fluvialis, Vibrio vulnificus, Aeromonas hydrophila, Actinobacillus ureae and Eikenella corrodens. Vibrio fluvialis was detected from all three beaches investigated. Vibrio vulnificus was detected from Haeundae and Gwangan beaches. Gwangan beach had a higher detection ratio of Vibrio sp. than Haeundae and Songjeong beaches. These results suggest that seafood harvested from the vicinity of theses beaches may cause food poisoning and risk management to prevent Vibrio septicemia is required, especially for Haeundae and Gwangan beaches.
Distribution of Vibrio parahaemolyticus in the Tegillaria granosa Linne in Costal area Inchun. The survey has been done chiefly from the Inchun Sea ports during 5 months from Oct. 1974 to May 1975. 1. The number of Vibrio parahaemolyticus isolated 17(13.8%) of 117 specimens from Anadara Subcrenata. 2. The number of Vibrio alginolyticus isolated 92 strains of 119 specimens from Tegillaria granosa Linne. 3. Bacteriological characterigation such as morphological, ecological, biochemical results of 17 isolated strain has been identified the category of typical Vibrio parahaemolyticus differentiation. 4. Most of Kanagawa positive strains was positive in Greig test, and considerable number of Kanagawa negative strains was also positive. The result of Greig test was almost the same between cultures in brain heart infusion broth and brain heart infusion agar. 5. Kanagawa positive strains showed same lethal activity in inoculated mice into peritoreal cavity as compared with Kanagawa negative strain.
This study was focused on the isolation of pathogenic Vibrio species, V. vulnificus and V. parahaemolyticus from marine environment from May to July of 1999. Isolation sites were coast near by Pusan and Daechon. The results obtained were as follows: 1. Seventy strains of V. parahaemolyticus and 19 strains of V. vulnificus were isolated from a total of 120 specimens. 2. Nineteen strains of V. vulnificus did not fermented arabinose and salicin but fermented lactose and cellobiose. All of V. parahaemolyticus isolates did not fermented lactose and cellobiose. 47 strains of V. parahaemolyticus fermented arabinose but 53 strains did not fermented salicin. 3. V. vulnificus and V. parahaemolyticus isolates showed three different API index numbers with 5046105 and 4346107 dominant. 4. V. vulnificus did not grow on 0% and 8% NaCl containing medium. V. parahaemolyticus grew on 8% NaCl containing medium. 5. V. vulnificus isolates and V. parahaemolyticus revealed different outer membrane protein profiles on SDS-PAGE.
Recently Vibrio sp. are the most frequently isolated microorganism, which causing food poisoning. We investigated the detection of toxin genes and effect of chitosan to toxin genes with PCR. Thirty strains of Vibrio sp. were isolated from sea water and sea products through biological and biochemical tests. Out of 30 strains, 8 were identified as V. parahemolyticus, 7 as V. mimcus, 6 as V. damsela, 5 as V. vulnificus, 4 as V. alginoyticus. In detection of ctx, tdh, and t고 as food poisoning-causing toxin genes, ctx from 7 strains, trh from 4 strains and tdh from 6 strains were detected. Among toxin genes detected strains, we selected V. vulnificus-2 V. damsela-1 and V. parahemolyticus-7. As adding chitosan solution to PCR product of 3 strains, the amplified DNA bands were not detected over 450$\mu\textrm{g}$/$m\ell$ concentrantion of chitosan. Over the result, chitosan is thought to influence the detection of toxin gene.
The author tried to isolate the Vibrio parahaemolyticus from Han River water and river fishes, to investigate the route of contamination by way of marine product and to make clear the survival ability in various kinds of food. The results are as follows: 1. Twenty eight strains of V. parahaemolyticus were identified among 312 samples in Han river from March to August. 2. V. parahaemolyticus was detected in the margenic content of Cyprinus and Anguilla. 3. 9 strains of K-3 type, 5 strains of K-11 type, 8 strains of K-8 type, 6 strains of K-32 type and 1 strain of K-52 type were clarified through K-antiserum reaction.
The halophilic bacterium Vibrio vulnificus, previously called lactose-positive(L+) Vibrio and Beneckea vulnifica, causes acute, fulminating wound infections and septicemia in humans. Septicemia is very serious infection with a fatality rate of about 50%. Most patients with primary septicemia due to V. vulnificus have preexisting liver disease. V. vulnificus also cause severe wound infections usually after trauma and exposure to marine animals or the marine environment. The mortality rate is not nearly as high as in primary septicemia caused by this organism. In most cases human disease results from ingestion of contaminated seafood or from infection of a wound, frequently of seawater or crab origin. The author made an attempt to isolation of the V vulnificus from seawater, seamud, fish, shellfish, and algae on the southern sea of Korea from January to September in 1987, using for the purpose of vaccine preparation. The author investigated for bacteriological identification, hemolysis and determination of serotypes of isolated V. vulnificus strains. Eighty-five strains(5.9%) out of 1450 specimens collected of V. vulnificus were isolated. The distribution of the 85 isolates were as follows: 21 strains from seawater, 11 strains from seamud, 28 strains from fish, 19 strains from shellfish, and 6 strains from algae, respectively. All 85 isolates were positive reaction on human blood agar. The distribution of serotypes of V. vulnificus isolates were O1 to O8: 13 strains of O1, 6 strains of O2, 11 strains of O3, 9 strains of O4, 10 strains of O5, 7 strains of O6, 15 strains of O7, and 10 strains of O8, respectively. Eighty-one strains showed agglutination with O antisera, but 4 strains failed to show agglutination. In this study, the author suspected that serotypes of V. vulnificus isolates distributed also in the seaside of Korea as well as in most seaside of the world, and new serotypes were in existence in the seaside of Korea except reported up to now.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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