삼차신경주감각핵에서 치수유래 일차들신경섬유의 종말과 그에 연접하는 연접이전신경종말에 함유된 연접소포들을 형태학적으로 비교하기 위하여 신경추적자(WGA-HRP)를 흰쥐 앞니의 치수강에 주입하여 치수 유래 일차들신경종말을 표식한 후, 투과형 전자현미경을 통한 미세구조적 정량 분석을 실시하였다. 표식된 치수유래 일차들신경종말은 직경이 $45{\sim}55\;nm$인 구형의 소포를 함유하고 있었으며, 일부 직경이 $80{\sim}120\;nm$ 큰 치밀소포가 관찰되기도 하였다. 또한 표식된 신경종말은 다형성 연접소포를 함유하고 있는 연접이전신경종말과 대칭연접을 이루고 있었다. 일차들신경종말의 연접소포들은 긴 지름에 대한 짧은 지름의 비율(form factor)이 $0.6{\sim}0.99$의 분포를 보인 반면, 연접이 전신경종말의 연접소포들은 $0.25{\sim}0.99$까지 다양하게 나타났다. 또한 대부분의 연접이전신경종말은 GABA에 대한 면역양성반응을 보였다. 이상의 결과는 표식된 신경종말과 그에 연접하는 연접이전신경종말의 연접소포는 서로 다른 형태를 보이고 있으며, 또한 그 연접이전신경종말이 억제성 신경전달물질인 GABA를 함유하고 있음을 나타낸다.
Kim, Ok-Seon;Lee, Yong-Bok;Oh, In-Joon;Koh, Ik-Bae;Lee, Yeong-Woo
Journal of Pharmaceutical Investigation
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제24권3호spc1호
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pp.11-18
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1994
We have studied the iron uptake by the purified brush-border membrane vesicles (BBMVs) to determine the effect of fructose on the absorption of iron. BBMVs were prepared by the modified calcium precipitation method, The degree of purification was routinely assessed by the marker enzyme, alkaline phosphatase, and the functional integrity was tested by $D-[1-^3H]glucose$ uptake. The appearance of membrane vesicles was shown by transmission electron microscopy (TEM). The uptakes of complexes of labeled iron $[^{59}Fe]$ with fructose and ascorbate were measured with a rapid filtration technique, The uptake rate and pattern of the two iron-complexes, Fe(III)-fructose and Fe(III)-ascorbate, were also observed. A typical overshooting uptake of D-glucose was observed with peak value of $2{\sim}3$ times higher concentration than that at equilibrium. This result was similar to other studies with BBMVs. TEM showed that the size of BBMVs was uniform and we can hardly find any contaminants, Fe(III)-fructose has the higher value of $V_{max}$ and the lower value of Km than those of Fe(III)-ascorbate, respectively. It may be concluded that D-fructose is more effective in promoting the iron absorption than ascorbate.
Kim, Yong-Keun;Kim, Tae-In;Jung, Jin-Sup;Lee, Sang-Ho
The Korean Journal of Physiology
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제25권2호
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pp.179-188
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1991
Effect of a sulfhydryl reagent, p-chloromercuribenzoic acid (PCMB), on the transport of succinate was studied in brush border (BBMV) and basolateral (BLMV) membrane vesicles isolated from rabbit renal cortex. PCMB induced an irreversible inhibition of the $Na^+-dependent$ succinate uptake in a dose-dependent manner with $IC_{50}$ of 55 and $65\;{\mu}M$ in BBMV and BLMV, respectively. The inhibitory effect of PCMB was prevented by a pretreatment of vesicles with dithiothreitol. PCMB did not increase $Na^+$ permeability at concentrations inhibiting succinate uptake. The PCMB inhibition of succinate uptake was due to a change in Vmax, but not in Km. When membrane vesicles were pretreated with PCMB in the presence of unlabelled succinate, the inhibitory effect was significantly reduced. In both BBMV and BLMV, succinate uptake was inhibited by various sulfhydryl reagents with the inhibitory potency of following order: $HgCl_2$>DTNB>PCMBS>PCMB. These results suggest that sulfhydryl groups are essential for dicarboxylate transport and that they may be located at or near substrate binding sites of the transporters in renal brush border and basolateral membranes.
Pourhosseini, Pouneh S.;Saboury, Ali A.;Najafi, Farhood;Divsalar, Adeleh;Sarbolouki, Mohammad N.
폴리머
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제37권3호
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pp.294-301
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2013
Polymersomes made of biodegradable triblock copolymers based on poly(fumaric acid-co-sebacoyl chloride)/PEG (PEG-co-P(FA/SC)-co-PEG) were prepared and studied in aqueous solutions. TEM confirmed the formation of vesicles in aqueous media. Aggregation behavior of the copolymers was studied by fluorescence spectroscopy of 8-anilino-1-naphthalenesulfonic acid, and the critical aggregation concentration (c.a.c.) of the copolymer was found to be ${\sim}26.2{\mu}M$ indicating desirable stability of the vesicles. Dynamic light scattering revealed that the size of the vesicles was distributed within the range of 170-270 nm. Turbidity measurements confirmed the relative short-term stability of the polymersomes. Carboxyfluorescein, a hydrophilic compound, was simply encapsulated in the vesicles during polymersome preparation. The release of encapsulant from the polymersomes at 25 and $37^{\circ}C$ lasted about 3 weeks, and the rate of release followed a first-order kinetics. The release is speculated to be primarily carried out through diffusion. These results confirm that these polymersomes are promising as controlled-release carriers of various drugs.
콜레스테롤을 갖는 계면활성제를 합성하고 중합하여 고분자화된 vesicle들을 얻었으며, 이러한 vesicle들을 이용하여 콜레스테롤을 추출해 내는데 사용하였다. 콜레스테롤을 갖는 계면활성제와 두 개의 알킬사슬을 갖는 계면활성제를 50 : 50으로 혼합하여 vesicle을 형성시킨 후 중합하여 형성된 고분자화된 Vesicle이 각각의 계면활성제들을 사용한 경우와 비교하여 볼 때 콜레스테롤을 효과적으로 추출해 내었다. vesicle의 투과도도 50 : 50으로 혼합하여 형성시킨 경우가 가장 컸다. 그러므로 많은 양의 콜레스테롤을 함유하려면 어느정도의 여유 공간이 필요하다고 결론지을 수 있다.
Basolateral and brush border membrane (BLM and BBM) vesicles of renal proximal tubules were prepared from adult male New Zealand White rabbits to evaluate as a potential model for assessment of nephrotoxicity. PAH uptakes using BLMV, glucose and leucine uptakes using BBMV were measured in the rabbits treated cephaloridine. In addition, urinalysis and histopathological studies were performed to investigate the correlationship with membrane vesicle uptakes. The results were as follows: (1) the activite of Na+, K+ -ATPase was enriched 12.3-fold in vasolateral memvrane vesicles (BLMV) and the specific activity of alkaline phosphatase in purified brush border memvrane vesicles (BBMV) was enriched 10.1-fold compared with each of microsomal homogenate. (2) In the uptake experiments, cephaloridine decreased initial and probenecid-sensitive PAH uptakes in BLMV. (3) Cephaloridine tested decreased initial and phlorizin-sensitive glucose uptakes in BBMV. (4) Cephaloridine tested decreased initial and Na+-dependent leucine uptakes in BBMV. (5) Cephaloridine tested significantly increased the urinary excretion of glucose and activity of ${\gamma}$-GTP. (6) Cephaloridine tested caused moderate necrotic changes in renal tubular cells and formation of urinary cast in the lumina of Henle's loop and collecting tubules besides the swelling of renal tubules.
The globus pallidus of normal cats were prepared for electron microscopic study following perfusion with a mixture of 1% paraformaldehyde and 1% glutaraldehyde solution. Neurons of two size categories were identified in 1 $\\mu$m araldite sections and their ultrastructural characteristics were studied in adjacent thin section. 1. Large neurons ($30 \\mum \\times 45 \\mum$ in diameter) had extensive areas of rough surfaced endoplasmic reticulm, abundant perinuclear Golgi complex, numerous mitochondria and lipofusin granule, and had a large spherical nucleus with shallow indentation of nuclear manbrane. Small neurons ($17 \\mum \\times 27 \\mum$ in diameter) had poorly rough surfaced endoplasmic reticulum, moderate number of mitochondria and randomly distributed Golgi complex. The nuclear envelope of this cell frequently showed multiple deep invagination. 2. Three types of axo-somatic synapses were identified on the basis of the size and shape of vesicle in the axon terminal and the symmetrical or asymmetrical thickening at the synaptic site. Type I synaptic terminal shows an even distribution of round and oval synaptic vesicles, and has a symmetrical synaptic thickening. Type II axon terminals reveal mostly round and pleomorphic vesicles and a few vesicles were localized near the presynaptic membrane in pale axoplasm and its synaptic thickening were symmetric. Type III axon terminals contain round vesicles, which were aggregated in the axoplasm, and has a asymmetrical synaptic thickening. 3. The majority of axo-somatic contact with the large and small neurons were type I, and type II and III synapes were rare.
Graft transmission and cytopathological studies of a severe pear disease, pear black necrotic leafspot(PBNLS), were carried out to determine the causal agent of the disease. No evidence was found that a fungal or bacterial pathogen could be the causal agent of the disease. Attempts to transmit the agent by sap-inoculation to other plants including herbaceous hosts failed. How-ever, the pathogen was readily graft-transmitted from symptomatic diseased pears to healthy pears. Graft transmission of the pathogen was also demonstrated by using an indicator plant, PS-95, developed in the laboratory through various grafting methods. Ultrastructural study of the disease revealed the consistent presence of flexuous rod-shaped virus-like particles (VLP) in the symptomatic leaves of both Niitaka cultivar and indicator pear, PS-95. The particles, approximately 12 nm in diameter with undetermined length, occurred in the cytoplasm of mesophyll parenchyma cells. Cells with VLPs also contained fibril-containing vesicles, which are common in cells infected with plant viruses with ssRNA genome. The vesicles were formed at the tonoplast. Based on the symptomatology, the presence of fibril-containing vesicles, and graft-transmissibility, it is believed that the VLPs that occurred on symptomatic leaves of black necrotic leafspot of pear are viral in nature, possibly those of a capillovirus.
Yoo, Gyeongji;An, Hyeong Jeon;Yeou, Sanghun;Lee, Nam Ki
Molecules and Cells
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제45권11호
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pp.806-819
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2022
Synaptic accumulation of α-synuclein (α-Syn) oligomers and their interactions with VAMP2 have been reported to be the basis of synaptic dysfunction in Parkinson's disease (PD). α-Syn mutants associated with familial PD have also been known to be capable of interacting with VAMP2, but the exact mechanisms resulting from those interactions to eventual synaptic dysfunction are still unclear. Here, we investigate the effect of α-Syn mutant oligomers comprising A30P, E46K, and A53T on VAMP2-embedded vesicles. Specifically, A30P and A53T oligomers cluster vesicles in the presence of VAMP2, which is a shared mechanism with wild type α-Syn oligomers induced by dopamine. On the other hand, E46K oligomers reduce the membrane mobility of the planar bilayers, as revealed by single-particle tracking, and permeabilize the membranes in the presence of VAMP2. In the absence of VAMP2 interactions, E46K oligomers enlarge vesicles by fusing with one another. Our results clearly demonstrate that α-Syn mutant oligomers have aberrant effects on VAMP2-embedded vesicles and the disruption types are distinct depending on the mutant types. This work may provide one of the possible clues to explain the α-Syn mutant-type dependent pathological heterogeneity of familial PD.
Extracellular vesicles (EVs) are nanosized vesicles secreted from cells into the extracellular environment and are composed of a lipid bilayer that contains cargos with biological activity, such as lipids, proteins, mRNAs, and noncoding microRNAs (miRNAs). Due to their biological activity and their role in cell-to-cell communication, interest in EVs is rapidly increasing. Bovine milk is a food consumed by people of all ages around the world that contains not only a significant amount of nutrients but also EVs. Milk-derived EVs also exhibit biological activity similar to other source-derived EVs, and studies on bovine milk EVs have been conducted in various research fields regarding sufficient milk production. In particular, not only are the effects of milk EVs themselves being studied, but the possibility of using them as drug carriers or biomarkers is also being studied. In this review, the characteristics and cargo of milk EVs are summarized, as well as their uptake and stability, efficacy and biological effects as carriers, and future research directions are presented.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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