Park Mi-Yeon;Park Chan-Woong;Kwon Chil-Sung;Chang Dong-Suck
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.7
no.1
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pp.10-15
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2004
A total of 52 pathogenic Vibrio strains was isolated from the Gwangan Beach during summer in 2003. The isolated vibrios were composed of 6 different species: V. parahaemolyticus, V. cholerae non O1, V. fluvialis, V. vulnificus, V. alginolyticus, and V. mimicus. V. parahaemolyticus was most predominant as $46\%$ (24/52), V. cholerae non O1 was the second with $23\%$ (12/52), and V. fluvialis was the third with $17\%$ (9/52). Among the isolated strains, 22 strains showed hemolytic, proteolytic or ureolytic activity. Eight strains showed both hemolysin and protease activities, and either 6 strains showed only hemolysin activities and 7 strains only protease activities. Only one strain of V. parahaemolyticus isolates showed urease activity. The urease-positive V. parahaemolyticus strain (V. parahaemolyticus S25) showed the same biochemical characteristics as the reference strain, V. parahaemolyticus KCTC 2471 (ureasenegative) except for urease production. To compare the degree of virulence of Vibrio strains having different pathogenic factors, hemolysin, protease, or urease-positive strains were injected into groups of 10 each of ICR mice (7- to l0-week-old male). The lethal rate of urease-positive V. parahaemolyticus S25 was significantly high, being $70\%$. Protease-positive strains showed $40-60\%$ of lethal rate. Hemolysin-positive strains showed no mortality, similar to non-pathogenic V. parahaemolyticus KCTC 2471 and V. parahaemolyticus FM12.
The bacteriological and physiochemical analysis of seawater in Tongyeong harbor was conducted to evaluate sanitary conditions, The samples were collected at 6 stations established once a month from January to December, 2000. During the study period, the ranges of temperature, transparency, chemical oxygen demand, dissolved oxygen, dissolved nitrogen, phosphate and chlorophyll-a were $6.8\sim25.2^{\circ}C,\;1.0\sim2.5\;m,\;1.79\sim2.41\;mg/L,\;5.7\sim10.1\;mg/L,\;6.59\sim10.53{\mu}g-at/L,\;0.56\sim1.01{\mu}g-at/L\;and\;1.21\sim9.54\;mg/m^3$, respectively, The viable cell counts of seawater in Tongyeong harbor ranged from $3.0\times10^4CFU/mL\;to\;6.9\times10^6CFU/mL$. The coliform group and fecal coliform MPN's of the samples were ranged $23\~4,600\;MPN/100\;mL$ (means 540 MPN/100 mL) and $11\~1,600\;MPN/100\;mL$ (means 210 MPN/100 mL), respectively, The coliform group was classified with IMViC reactions and pathogenic vibrios were analyzed. Two hundred eighteen strains that were obtained from seawater samples in Tongyeong harbor represented Escherichia coli group, $66.1\%$; Citrobacter freundii group, $11.0\%$; Enterobacter aerogenes, $9.6\%$; and unknown, $13.3\%$, respectively. During the study period, infectious bacteria such as Vibrio cholerae O1, Salmonella sp. and Shigella sp. were not detected from the samples, but detection ratios of V. parahaemolyticus, V cholerae non-O1 and V. vulnificus were $10.0\sim30.1\%$.
Five urease-positive Vibrio parahaemolyticus strains were isolated from Kamak Bay in Yeosu in 2002 and 2003. V. parahaemolyticus YKB4 and YKB14 were isolated from seawater, YFB20 from black rockfish (Sebastes schlegeli), and YFO2l and YFO22 from olive flounder (Paralichthys olivaceus). The five urease-positive strains (YKB4, YKB14, YFB20, YFO21, and YFO22) did not show hemolysin and protease activity, while they did alter in color (to red) as the bacteria grew in the urea broth medium. All samples showed identical biochemical characteristics as a reference strain, V. parahaemolyticus KCTC2471, except in urease production. The five urease-positive strains showed urease activities at a mid stationary phase, and their activity was maximal in the late stationary phase of their culture supernatant. The addition of urea to the Luria-Bertani (LB) broth medium significantly affected the initial production of urease of V. parahaemolyticus isolates. Mortality by urease-positive V. parahaemolyticus YKB4, YKB14, YFO2l, and YFO22 was significantly high, being$60-80\%$, while YFB20 only reflected a rate of $20\%$. Protease-positive V. parahaemolyticus FM39 and FM50 showed a $40\%$ and $60\%$ mortality rate, respectively. However, hemolysin-positive V. parahaemolyticus had no mortality, like the non-pathogenic V. parahaemolyticus KCTC2471, while V. vulnificus resulted in a $40\%$ mortality rate. Injection with urease-positive V. parahaemolyticus strains showed mortality within 12 hrs in mice, and the strains could be isolated from the dead mice.
Flavor characteristics of raw Cordyceps militaris significatntly different from those of dried one. In the case of raw Cordyceps militaris , major flavor components were composed of 5 alcohols, 3 ketones, 4 phenols, 9 alkanes , and 3 alkenes. The major alcohol was 1-octen-3-ol(22.56%, 1147.3% ng/ml), which contributed to the characteristic green flavor. Ketones (3-ocatone, inparticular )were present in the highest concentration in raw Cordyceps militaris . In contrast, major flavor components of dried Cordyceps militaris were composed of 4 alcohols, 4 ketones, 3 furans, 4 pyrizines, 2 dithiazines, 5 phenols , 8alkenes , 17 alkanes, and 8 fatty acids. Dried Cordyceps militaris had unique sweet aroma of sesame as wella s a milky flavor. Green or fruit flavor were rarely detected . In alkanes , 10 cosanes, component fo wax were present. Typical flavor components of alkanes such as $\beta$-caryophyllen and Δ-cadinene were also detected. Fatty acids of dried Cordyceps militaris ranged from myristic acid (14 :0) to linoleic acid (18 ; 2). The sweet aroma of dried Cordyceps militaris was mostly due to pryazines, dithaiazines, and furans. Two dithaizines were identified and characteristics of these flavor components was a roasted bacon flavor. Strong antibacterial acitivity was observed toward Vibrio spp. such as V. vulnificus, V.cholerae, V. parahaemlyticus. Relatively high antibacterial acitivity was shown toward Bacillus subtilis , B,cereus, Staphyllococcus aureus, and Corynebacterium xerosis.
An ecological study on pathogenic vibrios was done in the aquatic environments of southern coast of Korea during summer in 1995, to investigate the distribution and relationship between pathogenic vibrio and zooplankton. Furthermore, special emphasis was given to study on the efforts of zooplankton existence on the wintering of Vibrio cholerae in the aquatic region in Korea. During the study period, pathogenic vibrios were isolated from the samples such as V. parahaemolyticus, V. vulnificus, V. mimicus, and V. cholerae non O1, but V. cholerae O1 was not detected in any sample submitted in this study. Adsorption ratio of V. parahaemolyticus onto zooplankton was higher than that of E. coli. The efficiency of adsorption was found to be on the concentration of NaCl and other ions found in sea water. For example, adsorption ratio of V. parahaemolyticus were $75\%\;at\;5\%_{\circ}$ of NaCl solution and $55\%$ at same salinity of diluted sea water, but those were decreased as $20\%\;and\;7\%\;at\;15\%_{\circ}$ salinity of NaCl solution and diluted sea water, respectively. In addition, survival period of pathogenic vibrio was extended in the presence of live copepods at $25^{\circ}C$, but zooplankton existence has no significant effect on the survival rate at $5^{\circ}C$ in closed microcosm and also microalgae and dead copepods do not affect on the survival of V. parahaemolyticus. According to these experimental results, zooplankton has positive effects on the growth and survival rate of pathogenic vibrios in sea water during the summer season, but copepods have no significant effects on the growth and survival rate of them in winter season in Korea. Finally, authors suggest that V. cholerae is not able to over winter with zooplankton in adjacent sea water in Korea.
Oh, Ryunkyoung;Moon, Soo Young;Cho, Hwa Jin;Jang, Won Je;Kim, Jang-Ho;Lee, Jong Min;Kong, In-Soo
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.44
no.3
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pp.355-362
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2016
The phosphomannomutase/phosphoglucomutase gene (pmm/pgm) of Vibrio anguillarum (the causative agent of fish vibriosis) was cloned, and the open reading frame corresponded to a protein with 446 amino acids. The pmm/pgm gene showed a significant degree of sequence homology with the previously reported genes from V. mimicus, V. vulnificus, V. splendidus, and V. harveyi, with 92.3%, 91.4%, 89.9%, and 89.9% amino acid identity, respectively. By reverse transcriptase-polymerase chain reaction, we found that the pmm/pgm gene was upregulated under cold stress condition. The PMM/PGM protein is known to catalyze the interconversion between mannose-1-phosphate and mannose-6-phosphate or glucose-1-phosphate and glucose-6-phosphate, which are important intermediates for lipopolysaccharide (LPS) biosynthesis. To confirm the role of PMM/PGM in the LPS biosynthetic pathway, we constructed a knock out mutant by homologous recombination. The respective LPSs were isolated from the V. anguillarum wild-type and mutant strains, and changes were compared by subjecting them to sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis. Based on the different patterns of the LPSs, we expect the pmm/pgm gene to have an important role in LPS biosynthesis. The pmm/pgm-deficient mutant of V. anguillarum will contribute to further studies about the role of LPS in V. anguillarum pathogenesis.
Park Mi-Yeon;Kim Hyun-Jin;Choi Seung-Tae;Oh Eun-Gyong;Chang Dong-Suck
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.5
no.3
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pp.178-182
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2002
The authors identified 68 Vibrio strains from Gwangan beach seawater from June to October in 2001. We identified them as 19 strains of Vibrio alginolyticus, 15 strains of V. vulnificus, 15 strains of V. parahaemolyticus, 11 strains of V. cholerae non O1, 7 strains of V. fluvialis and just one strain of V. hollisae. They showed their typical biochemical characteristics by API 20E kit (bioMerieux), respectively. It was examined whether their cultural supernatants had enzymatic activities such as hemolysin, protease or urease. The 46 strains showed hemolytic activities and/or protease activities. But we could not find any strain which had urease activity. All isolates of V. cholerae non O1 showed $\beta$ hemolysis. The others showed $\alpha$ hemolysis or did not show clear zones on sheep blood agar plates. These results of Kanagawa phenomenon were not always correspondant with hemolytic activities of cultural supernatants at late log phase. Some strains had higher hemolytic activities despite of showing protease activities on skim milk agar plates and in litmus milk media. On the other hand, some strains showed protease activities but did not show hemolytic activities. Therefore we could guess that there were the relationships between hemolysins and proteases produced by pathogenic vibrios.
The present study was to investigate in vitro antimicrobial effects of propolis against six different fish bacterial pathogens, Aeromonas hydrophila, Edwardsiella tarda, Vibrio vulnificus, V. parahaemolyticus, A. salmonicida subsp. masoucida, A. salmonicida subsp. salmonicida) using minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bacteriocidal concentration (MBC) tests. In the results, propolis exhibited antimicrobial activity against all bacteria used in the present study, but there was no marked difference in bacterial species except Vibrio species. Collectively, propolis was thought to be an usefulness antimicrobial substance for controlling bacterial diseases in the fish industry.
The present study was to investigate anti-microbial effects of curcumin on major bacterial pathogens for farmed fish, such as Aeromonas hydrophila, A. salmonicida subsp. masoucida, A. salmonicida subsp. salmonicida, Edwardsiella tarda, Vibrio vulnificus, V. paraheamolyticus using disk diffusion, minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) tests. In disc diffusion test, curcumin exhibited concentration-dependent antimicrobial activities to all bacteria pathogens used in the study. Antimicrobial effects of curcumin was found differently depending on bacterial species when determined by MIC or MBC tests. For examples, E. tarda and A. hydrophila was respectively the most sensitive bacterium for bacteriostatic and bacteriocidal effect of curcumin. Collectively, curcumin could be a potential natural drug for controlling pathogenic bacteria in the aquaculture industry.
Kim, Ji-Hyun;Park, So-Hyun;Moon, Kyung-Mi;Kim, Dong-Hwi;Heo, Moon-Soo
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.46
no.2
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pp.127-134
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2018
In this study, 79 bacterial isolates were collected from the surface of marine algae Umbraulva japonica. As a result of analysis of 16s rRNA gene sequence, the 79 isolated bacteria were divided into 4 major groups: [Proteobacteria (74.69%), Actinobacteria (2.53%), Fimicutes (2.53%), and Bacteroidetes (20.25%)] - 7 classes (Actinobacteria, Flavobacteria, Sphingobacteria, Baciili, Alphaproteobacteria, Betaproteobacteria, and Gammaproteobacteria), 12 orders, 17 families and 31 genera. The newly isolated 3 strains could be novel species because of less than 97% similarity in 16s rRNA sequence. Therefore, it is considered that additional experiments should be conducted together with the standard strain. Analysis of 79 bacterial antibacterial activity against human and fish pathogens, such as Edwardsiella tarda, Vibrio harveyi, Streptococcus iniae, Steptococcus parauberis, Escherichia coli, Steptococcus mutans, Listeria monocytogenes and Vibrio vulnificus, was performed by using the supernatant liquid and pellet. As a result, pellet of UJT9, UJT20 and UJR17 showed antibacterial activity against V. vulnificus, UJR17 also showed antibacterial activity against S. parauberis. UJT7 and UJT20, UJR17 have been identified as Bacillus sp. and Pseudomonas sp. and it may be safely assented that it's beneficial to carry out additional experiments for various applications.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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