V(D)J recombination, a site-specific gene rearrangement process occurring during the lymphocyte development, begins with DNA double strand breaks by two recombination activating gene products (RAG1/2) and finishes with the repair process by several proteins including DNA-dependent protein kinase (DNA-PK). In this report, we found that RAG2 was specifically phosphorylated by DNA-PK at the $365^{th}$ serine residue, and this phosphorylated RAG2 affected the V(D)J recombination activity in cells in the GFP expression-based assay. While the V(D)J recombination activity between wild-type RAG2 and mutant S365A RAG2 in the assay using a signal joint substrate was undistinguishable in DNA-PK deficient cells (M059J), the activity with wild-type RAG2 was largely increased in DNA-PK proficient cells (M059K) in comparison with mutant RAG2, suggesting that RAG2 phosphorylation by DNA-PK plays a crucial role in the signal joint formation during V(D)J recombination.
Two lymphoid-specific proteins, RAG1 and RAG2, are required for the initiation of the V(D)J recombination in vitro. The V(D)J cleavage that is mediated by RAG proteins at the border between the coding and signal sequences results in the production of a hairpin at the coding end and a double-stranded break at the signal end. Two hairpin coding ends are re-opened, modified, and sealed; whereas, the signal ends are directly ligated. Here I report that only RAG1 can carry out a distinct endonucleolytic activity in vitro using an oligonucleotide substrate that is tethered by a short single-stranded DNA. The purified RAG1 protein alone formed a nick at the near position to the recombination signal sequence. This endonucleolytic activity was eliminated by immunoprecipitation using the RAG1-specific antibody, and required the 3'-hydroxy group. All of the RAG1 mutants that were incapable of the nick and hairpin formation in the V(D)J cleavage analysis also showed this new endonucleolytic activity. This suggests that the nicking activity that was observed might be functionally different from the nick formation in the V(D)J cleavage.
The random V(D)J recombination process ensures the diversity of the primary immunoglobulin (Ig) repertoire. In two thirds of cases, imprecise recombination between variable (V), diversity (D), and joining (J) segments induces a frameshift in the open reading frame that leads to the appearance of premature termination codons (PTCs). Thus, many B lineage cells harbour biallelic V(D)J-rearrangements of Ig heavy or light chain genes, with a productively-recombined allele encoding the functional Ig chain and a nonproductive allele potentially encoding truncated Ig polypeptides. Since the pattern of Ig gene expression is mostly biallelic, transcription initiated from nonproductive Ig alleles generates considerable amounts of primary transcripts with out-of-frame V(D)J junctions. How RNA surveillance pathways cooperate to control the noise from nonproductive Ig genes will be discussed in this review, focusing on the benefits of nonsense- mediated mRNA decay (NMD) activation during B-cell development and detrimental effects of nonsense-associated altered splicing (NAS) in terminally differentiated plasma cells.
Recombination activating genes (RAGs) play a crucial role in initiating V(D)J recombination, which is essential for developing adaptive immunity in vertebrates. In this study, we cloned and characterized RAG1/2 cDNA from the marine medaka Oryzias dancena (OdRAG1/2) and investigated their mRNA expression patterns during ontogenetic developmental stages. The OdRAG1 and OdRAG2 cDNA contained open reading frames (ORFs) encoding proteins containing 1,078 and 531 amino acids, respectively. Multiple sequence alignment and phylogenetic analysis revealed that OdRAG1 and OdRAG2 are highly conserved with their corresponding orthologs, featuring distinct core and non-core regions. Notably, expression analysis showed that, in contrast to other fish RAGs studied, OdRAG1/2 expression peaked at 0 days post-hatching (DPH). Additionally, for the expression of T and B cell differentiation markers, CD3γ and CD20, also peaked at 0 DPH. Collectively, adaptive immunity in O. dancena potentially begins during embryonic development, which is critical for V(D)J recombination and essential immune component development, suggesting the early ontogenetic stage interactions between innate and adaptive immunity.
We measured and analyzed thermoluminescence spectra of $LaAlO_3$, single crystal by 3 dimensional data for temperature, wavelength and luminescence intensity. $LaAlO_3$, has used as the substrates of YBCO(superconductor) or semiconductors. We could determined the energy of recombination center, that is impossible through analysis of glow curve data. We could obtained the energy through analysis of the spectrum data at peak temperature by Franck-Condon model. The total glow curve was deconvoluted to three glow curves by curve fitting method. The activation energies were 0.54eV, 0.91eV and 1.02eV respectively. The energies of recombination centers were determined with 2.04eV and 2.75eV from the analysis of luminescence intensity data for wavelength.
Kim, G.Y.;Jeong, A.R.;Jo, W.;Jo, H.J.;Kim, D.H.;Sung, S.J.;Hwang, D.K.;Kang, J.K.;Lee, D.H.
한국태양에너지학회:학술대회논문집
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2012.03a
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pp.149-152
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2012
$Cu(In,Ga)Se_2$ (CIGS) is one of the most promising photovoltaic materials because of large conversion efficiency which has been achieved with an optimum Ga/(In+Ga) composition in $CuIn_{1-x}Ga_xSe_2$ (X~0.3). The Ga/(In+Ga) content is important to determine band gap, solar cell performances and carrier behaviors at grain boundary (GB). Effects of Ga/(In+Ga) content on physical properties of the CIGS layers have been extensively studied. In previous research, it is reported that GB is not recombination center of CIGS thin-film solar cells. However, GB recombination and electron-hole pair behavior studies are still lacking, especially influence of with different X on CIGS thin-films. We obtained the GB surface potential, local current and I-V characteristic of different X (00.7 while X~0.3 showed higher potential than 100 mV on GBs. Higher potential on GBs appears positive band bending. It can decrease recombination loss because of carrier separation. Therefore, we suggest recombination and electron-hole behaviors at GBs depending on composition of X.
DNA-dependent protein kinase catalytic subunit (DNA-PKcs), a member of the phosphatidylinositol 3-kinase-related kinase family is a well-known player in repairing DNA double-strand break through non-homologous end joining pathway. This mechanism has allowed us to understand its critical role in T and B cell development through V(D)J recombination and class switch recombination, respectively. We have also learned that the defects in these mechanisms lead to the severely combined immunodeficiency (SCID). Here we highlight some of the latest evidence where DNA-PKcs has been shown to localize not only in the nucleus but also in the cytoplasm, phosphorylating various proteins involved in cellular metabolism and cytokine production. While it is an exciting time to unveil novel functions of DNA-PKcs, one should carefully choose experimental models to study DNA-PKcs as the experimental evidence has been shown to differ between cells of defective DNA-PKcs and those of DNA-PKcs knockout. Moreover, while there are several DNA-PK inhibitors currently being evaluated in the clinical trials in an attempt to increase the efficacy of radiotherapy or chemotherapy, multiple functions and subcellular localization of DNA-PKcs in various types of cells may further complicate the effects at the cellular and organismal level.
The total ionizing dose (TID) and non ionizing energy loss (NIEL) effects of 100 MeV phosphorous ($P^{7+}$) and 80 MeV nitrogen ($N^{6+}$) ions on 200 GHz silicon-germanium heterojunction bipolar transistors (SiGe HBTs) were examined in the total dose range from 1 to 100 Mrad(Si). The in-situ I-V characteristics like Gummel characteristics, excess base current (${\Delta}I_B$), net oxide trapped charge ($N_{OX}$), current gain ($h_{FE}$), avalanche multiplication (M-1), neutral base recombination (NBR) and output characteristics ($I_C-V_{CE}$) were analysed before and after irradiation. The significant degradation in device parameters was observed after $100MeV\;P^{7+}$ and $80MeV\;N^{6+}$ ion irradiation. The $100MeV\;P^{7+}$ ions create more damage in the SiGe HBT structure and in turn degrade the electrical characteristics of SiGe HBTs more when compared to $80MeV\;N^{6+}$. The SiGe HBTs irradiated up to 100 Mrad of total dose were annealed from $50^{\circ}C$ to $400^{\circ}C$ in different steps for 30 min duration in order to study the recovery of electrical characteristics. The recovery factors (RFs) are employed to analyse the contribution of room temperature and isochronal annealing in total recovery.
Molecular dynamics (MD) simulations were conducted to investigate the temperature effects on the primary damage in gallium nitride (GaN) material. Five temperatures ranging from 300 K to 900 K were studied for 10 keV Ga primary knock-on atom (PKA) with inject direction of [0001]. The results of MD simulations showed that threshold displacement energy (Ed) was affected by temperatures and at higher temperature, it was larger. The evolutions of defects under various temperatures were similar. However, the higher temperature was found to increase the peak number, peak time, final time and recombination efficiency while decreasing the final number. With regard to clusters, isolated point defects and little clusters were common clusters and the fraction of point defects increased with temperature for vacancy clusters, whereas it did not appear in the interstitial clusters. Finally, at each temperature, the number of Ga interstitial atoms was larger than that of N and besides that, there were other different results of specific types of split interstitial atoms.
Three-dimensional thermoluminescence(TL) spectra of LiF: Mg, Cu, Na, Si TL material based on temperature, wavelength and intensity were measured and analyzed. The glow curves were obtained by integration of luminescence intensity for wavelength at each temperature, and various trapping parameters related to the trap formation were determined by analyzing these curves. Computerized glow curve deconvolution(CGCD) method which based on general order kinetics(GOK) model were used for the glow curve analysis. The glow curves of LiF:Mg, Cu, Na, Si TL material were deconvoluted to six isolated glow curves which have peak temperature at 333 K, 374 K, 426 K, 466 K, 483 K and 516 K, respectively. The 466 K main glow peak had an activation energy of 2.06 eV and a kinetic order of 1.05. This TL material was also found to have three recombination centers, 1.80 eV, 2.88 eV and 3.27 eV by TL spectra analysis based on Franck-Condon model. It showed that 2.88 eV is the dominant center, followed by 3.27 eV level, and 1.80 eV center is ascertained as emission center of this material even though its very weak emission intensity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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