Antimicrobial activities were assayed through the hot-water extracts from 41 species of medicinal plants against Helicobacter pylori which is known as the ulcerogenic phathogen. Opuntia ficus-indica, Houttuynia cordata, Sinomenium acutum, and Coptis japonica showed the MIC at the concentrations less than 100 ppm, Pulsatilla koreana, Forsythia koreana, Rheum undulatum, and Perilla frutescens less than 200 ppm, Belamcanda chinensis, Arctium lappa, Cassia tora, Citrus tachibana, Siegesbeckia orientalis, and Caesalpinia sappan less than 300 ppm by the 2-fold dilution method. In disc method only three of them were confirmed to have antimicrobial activities which were increased in the order Perilla frutescens, Coptis japonica, Caesalpinia sappan. Three extracts were partitioned with chloroform, ethyl acetate and butanol in sequence and examined for the activity to inhibit H. pylori. The major ativities were observed in ethyl acetate fraction of Caesalpinia sappan, butanol fraction of Perilla frutescens, butanol and chloroform fraction of Coptis japonica. The partitioned fractions were found to have increased antimicrobial activities in all extracts. The experiments in which the extracts were added into urea R broth containing the crude urease derived from H. pylori resulted in the increase of pH and optical density at 560 nm to 8.15 and 1.7 respectively. Urease activity of H. pylori was inhibited over 80% by Caesalpinia sappan, Perilla frutescens, and Coptis japonica, of which Caesalpinia sappan suppressed up to 95%.
This study was carried out to investigate the characteristics of FOST (fermented omija sugar treatment extracts) using Lactobacillus brevis HLJ59. Antioxidant activities of FOST were evaluated through viable cell number of L. brevis HLJ59, DPPH radical scavenging activity, reducing power and SOD-like activity, compared to non-FOST(non-fermented omija sugar treatment extracts). Also it was to evaluate Angiotensin Converting Enzyme (ACE) and Urease inhibitory activity of FOST. The viable cell number of L. brevis was about $2.05{\pm}0.21{\times}10^8$, $6.31{\pm}0.56{\times}10^{11}$, and $8.14{\pm}0.14{\times}10^9$ at ${\times}2$, ${\times}5$, and ${\times}10$ dilution, respectively. DPPH radical scavenging activity of FOST was about 60.3%, 71.8%, and 44.5% at ${\times}2$, ${\times}5$, and ${\times}10$ dilution, respectively. The reducing power of FOST was about 0.92, 1.19, and 0.73 (OD at 700 nm) at ${\times}2$, ${\times}5$, and ${\times}10$ dilution, and SOD-like activity of FOST was about 50.4%, 53.7%, and 33.4% at ${\times}2$, ${\times}5$, and ${\times}10$ dilution, respectively. ACE and Urease inhibitory activity by FOST was about 47.4%, 78.2%, 56.4% and 58.1%, 83.4%, 63.2% at ${\times}2$, ${\times}5$, and ${\times}10$ dilution, respectively. The results indicated that the fermentation of omija sugar treatment extracts using Lactobacillus brevis HLJ59 increased the antioxidant activities campared to the non-fermented omija sugar treatment extracts.
Urease plays an important role in the urea metabolism and the effect of urease activity on human and environment is enormous. For instance, urease acts as a virulence factor of the urinary and gastrointestinal tracts infections in human and animal, being involved in kidney stone formation, catheter encrusatation, pyelonephritis, ammonia encephalopathy, hepatic coma, and urinary tract infections. Widespread urease activity in soil induces a plant damage due to ammonia toxicity and pH increase. Therefore, urease activity regulation through urease inhibitors would lead to an enhanced efficiency of urea nitrogen uptake in plants and to the improved therapeutic strategies for ureolytic bacterial infections. To search for new inhibitory compounds on urease activity from herbs, MeOH extracts of herbs were screened. Among of them, the MeOH extracts of Areca catechu exhibited an excellent inhibitory effect on urease activity. Two compounds were isolated from the ethyl acetate fraction by the activity guided fractionation. Their chemical structures were identified as (+)-catechin(compound I) and allantoin(compound II) by spectroscopic evidence, respectively. Compound I showed a stronger inhibitory effect on urease activity than compound II.
The balance of microbial populations in the gastrointestinal (GI) tract of all warm-blooded animals is critical to the maintenance of health and resistance to disease. The composition of the populations can be altered by diet and environment, making the host animal susceptible to disease, and reducing growth rate and feed efficiency. Some feed additives including antimicrobial agents, prohiotics or yucca extract have been used to promote growth and feed utilization. There is evidence that part of growth-promoting effect of those feed additives results from the suppression of microbial urease activity or ammonia production in the GI contents of animals. Over 200 microbial species have been known to produce urease and the product of urea hydrolysis, ammonia, is toxic to animals. Carefully tested probiotics or other urease-suppressing agents can be a possible alternative to antimicrobial agents including antibiotics as growth promotants used for animals feeds.
This study was performed to evaluate the potentiality of Reynoutria elliptica Migo., being used as a folk remedy and a herb medicine for urethritis, cystitis, etc., on growth inhibition of Helicobacter pylori which is known as the ulcerogenic pathogen. The minimum inhibitory concentration (MIC) value of methanol extract from Reynoutria elliptica Migo, was determined to be 120 ppm for H. pylori and urease activity derived from H. pylori was inhibited over 80% by the extract at 2 mg/mL in urea broth. Among various solvent fraction of the methanol extract, the hexane fraction showed a significant inhibitory effect on the growth of H. pylori reducing both its growth and urease activity. Scanning and transmission electron micrographs of H. pylori treated with the methanol extract at 2 mg/mL for 3 hr showed that the cell walls and membranes were disrupted so that the cytoplasmic components were leaked from the body. These results suggest that Reynoutria elliptica Migo. possesses a therapeutic potential on the gastric disease caused by H. pylori.
For physiological function of aloe concentrate by ultrafiltration (UF) process, jack bean urease inhibitory activity and bentonite flocculating activity of UF aloe concentrate was investigated and compared with fresh aloe gel. Urease inhibitory activity of UF aloe concentrate ranged from 87 to 90% in 1 mL sample. Also, urease inhibitory activity of UF aloe concentrate increased about 10% by heat treatment showing the heat stability. From Lineweaver-Burk plot for UF aloe concentrate, urease inhibition pattern indicated general non-competitive inhibition. From flocculation test of UF aloe concentrate about 1% (w/v) bentonite suspension, maximum flocclulating activity of 97% was obtained at 0.5 mL addition of UF aloe concentrate/ 5 ml bentonite suspension. However, flocculating activity of 81% was obtained at 1 mL addition of UF aloe concentrate/ 5 mL bentonite suspension, which was typical flocculating behavior of polymers with re-dispersion at overdose area. FT-IR spectra of UF aloe concentrate showed the characteristic patterns of $\beta$-binding polysaccharide and less deacetylation indicating higher level of bioactive polysaccharide content.
This study has been carried out to secretion antibodies for the purpose of preventing the infection of Helicobacter pylori and using them as a supplement for treatment. This experiments have been separated antigens from H. pylori and observed into antibody production and the agglutination of H. pylori for the separated antigens. As major antigenic proteins separated from H. pylori, the following could be verified: 12 kinds of band for whole cell (WC), seven kinds of band for outer membrane protein (OMP), three kinds of band for crude urease, and one kind of band for lipopolysaccharide (LPS). The IgG anti-H. pylori antibody of separated antigens showed $77.9{\pm}6.4{\mu}g/ml$ for we (L), $84.9{\pm}6.4{\mu}g/ml$ for OMP, and $123.8{\pm}2.9{\mu}g/ml$ for crude urease, at the same antigen concentration of $20{\mu}g/100ull$, which showed the most at the crude urease. And it turned out that the IgA antibodies were generated with $2.5{\pm}0.32{\mu}g/ml$ for WC (L), $2.0{\pm}0.43{\mu}g/ml$ for OMP, and $1.3{\pm}0.25{\mu}g/ml$ for crude urease, which demonstrated the most for WC (L) antigens. As a result of verifying the immunogenecity of antigenic protein through the Western blotting, major antigenic substances could be confirmed as follows: 10 kinds for WC, six kinds for OMP and three kinds for crude urease. The agglutination values on the H. pylori of the antibody were $2^5,\;2^5,\;2^6\;and\;2^7$ at the antigen serums of anti-WC (H), anti-WC (L), anti-OMP and anti-crude urease, respectively, which indicated the highest for the antigen serum of anti-crude urease. The urease activation-inhibiting absorbance of antigen serum created by each antigen was $0.14{\pm}0.01$ for WC (H), $0.16{\pm}0.01$ for WC (L), $0.18{\pm}0.03$ for OMP, and $0.18{\pm}0.04$ for urease, demonstrating a significant inhibiting effect, compared with $0.26{\pm}0.02$ of the control group.
The objective of this research was to characterize the effect of ammonium thiosulfate(ATS) on soil urease activity and the influence of temperature and soil pH on inhibition of urea hydrolysis by ATS. The results obtained are summarized as follows. 1. Percent inhibition of urea hydrolysis ranged from 1.5~14.3% with 5% addition of ATS to urea to 7.6~20.5% with 10% inclusion at $25^{\circ}C$, which levels were lower than that of thiourea. 2. The effect of ATS on urease inhibition was greater in low temperature han high temperature. The addition of 10% ATS resulted in 62.6% and 41.7% inhibition of urea hydrolysis at $10^{\circ}C$ and $15^{\circ}C$, respectively. 3. The inhibitory effects of ATS were found rapidly or slowly at different soil pH. The inhibition of urease activity was showed after 24 hours at pH 6.0 and 6.5, while the hydrolysis of urea was inhibited by ATS after 48 hourse at pH 5.0, 7.0 and 7.5. Urea hydrolysis inhibitions after 72 hours incubation were similar at all pH tested. Therefore effects of ATS did not correlate with soil pH.
Staphylococcus epidermidis is a coagulase-negative, gram-positive bacterium that normally inhabits the human skin. S. epidermidis is also known to be an opportunistic pathogen in infections of various indwelling medical devices. This report describes purification and characterization of the urease of S. epidermidis urease, which may act as a virulence factor. The urease from S. epidermidis was purified 1,127 fold by using DEAE-Sepharose, Phenyl-Sepharose, Mono-Q and Superdex HR200 column chromatography. The specific activity of the purified enzyme was 993.8 U/mg. Michaelis constant($K_m$) of the enzyme was estimated to be 8.5 mM urea by using Lineweaver-Burke double reciprocal plot. The native molecular weight of the urease was shown to be 255 kD by using Superose 6HR gel filtration chromatography and the purified enzyme contained 2.2 nickel ions per catalytic unit. The overall stoichiometry of the enzyme subunits appears to be $(\alpha\beta\gamma)_3$, which is consistent with the enzymes from other bacteria sources.
The effect of oyster shell meal, which is made of a simple crushing and alkaline calcium materials, on soil microbial properties, microbial biomass C, N and P contents, and enzyme activities were evaluated in silt loam soil. The oyster shell meal fertilizer was added at the rates of 0, 4, 8, 12 and $16Mg\;ha^{-1}$. Microbial biomass C, N and P contents were significantly increased with increasing application of oyster shell meal. Soil enzyme activities, such as urease, ${\beta}$-glucosidase and alkaline phosphomonesterase were increased significantly by shell meal application, due to increased soil pH towards neutral range and increased nutrient availability in soil. In particular, the increased microbial biomass P content and phosphomonoesterase activities were strongly correlated with available P content in soil. Conclusively, oyster shell meal fertilizer could be a good supplement to improve soil microbial activities.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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