• Molecules and Cells
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• 제27권5호
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• pp.577-582
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• 2009

The development of a high-throughput functional genomic screening provides a novel and expeditious approach in identifying critical genes involved in specific biological processes. Here we describe a cell-based cDNA screening system to identify the transcription activators of BiP, an endoplasmic reticulum (ER) chaperone protein. BiP promoter contains the ER stress element which is commonly present in the genes involved in unfolded protein response (UPR) that regulates protein secretion in cells. Therefore, the positive regulators of BiP may also be utilized to improve the recombinant protein production through modulation of UPR. Four BiP activators, including human UDP-glucose:glycoprotein glucosyltransferase 1 (HUGT1), are identified by the cDNA screening. Overexpression of HUGT1 leads to a significant increase in the production of recombinant erythropoietin, interferon ${\gamma}$, and monoclonal antibody in HEK293 cells. Our results demonstrate that the cDNA screening for BiP activators may be effective to identify the novel BiP regulators and HUGT1 may serve as an ideal target gene for improving the recombinant protein production in mammalian cells.

• 한국산업보건학회지
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• 제25권2호
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• pp.126-133
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• 2015

연구목적: 이 연구는 노동부의 보건진단 명령에 의해 유리섬유 강화플라스틱(FRP)을 이용한 이중벽 탱크 제조 사업장의 적층 공정 근로자들을 대상으로 스티렌 노출 특성을 평가하기 위해 수행되었다. 연구방법: 스티렌의 주요발생원 파악을 위해 불포화 폴리에스테르 수지(UPR), 경화제, 조색제, 세척액 등의 원료 내 스티렌 함유량을 가스크로마토그래피 질량분석기(GC-MS)를 이용하여 분석하였다. FRP 적층 공정에 근무하는 작업자들을 대상으로 NIOSH 1501 공정시험법에 의해 공기 중 스티렌 노출 농도에 대한 개인노출 평가를 실시하였고, 생물학적 노출 지표로 뇨 중 만델릭산을 채취한 후 고성능액체크로마토그래피(HPLC)로 분석하였다. 또한 각 직무 특성과 단위작업 중심으로 스티렌에 대한 단시간 노출평가를 수행하였다. 연구결과: 스티렌의 함유량이 가장 많은 주요 원료는 중량비율로37%의 스티렌이 함유된 UPR이었다. 적층 공정의 FRP분무 작업자와 보조 작업자들 모두 스티렌의 8시간 가중평균 노출기준(20 ppm)을 초과하였다. 단시간 노출평가 결과 FRP분무 작업자의 경우 45.9 ppm에서 86.1 ppm 수준으로 FRP를 사용하지 않는 작업보다 통계적으로 유의하게 높은 수준이었다(P<0.01). 가장 높은 수준의 스티렌에 노출되는 단위작업은 FRP를 이용하여 1차 코팅 하는 작업으로 특별한 관리가 필요하였다. 결론: 보건진단을 위해 실시한 이중벽 탱크 제조 사업장의FRP 적층 공정 작업자의 스티렌 노출수준은 노출기준을 초과할 정도로 높은 수준이었다. 그러나 탱크를 천장에 매달고 돌리면서 적층작업을 수행하기 때문에 적절한 국소환기 시스템을 구축하는데 어려움이 있다. 따라서 적절한 방독마스크 착용으로 스티렌 노출 예방이 필요하였다.

• Membrane and Water Treatment
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• 제2권4호
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• pp.251-266
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• 2011

This work deals with the use of High Resolution Scanning Electron Microscopy (HRSEM) to verify ultrafiltration membrane selectivity at the end of the production line as well as membrane ageing. The first part of this work is focused on new membranes. It is shown that it is better to use sputtering metallization than vacuum deposition, as this latter technique entails thermal damage to the skin layer. Moreover, the impact of the metallization layer on the determination of the membrane pore size is studied and it is observed that no impact of the metallization step can be clearly defined for a metallization layer ranging from 3 to 12 nm. For example, an average pore size of 16.9 nm and a recovery rate of 6.5 % are observed for a 150 kDa cellulose acetate membrane. These results are in agreement with those given by the manufacturer: pore size ranging from 10 to 15 nm and recovery rate ranging from 5 to 10 %. The second part of this work focuses on the study of membrane ageing. A PVDF hollow fibre membrane is studied. It is shown that a 65 % decrease in the permeate flux can be linked to a decrease in the number of pores at the surface of the membrane and a decrease in the recovery rate. In conclusion, a mapping of the pores is performed for several new hollow fibre membranes used to produce drinking water, made of different materials, with different geometries and molecular weight cut-off. These results provide reference data that will help better understand the phenomena of membrane fouling and membrane ageing.

• 생명과학회지
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• 제17권6호통권86호
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• pp.847-858
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• 2007

ER-Golgi 분비 경로를 통해서 정확한 구조를 가지면서 post-translational modification 과정을 거친 재조합 단백질의 발현을 최대화하는 것은 ER stress반응에 대한 연구의 중요한 계기가 된다. 세포가 스트레스를 받지 않는 상태라도 ER stress signaling은 재조합 단백질의 생산량을 제한하고 품질을 떨어뜨리는 여러 가지 조건을 만들게 된다. ER stress signaling을 막는 여러 가지 방법들이 제시되고 있으며 표 2는 이러한 방법들 중 일부를 나타내고 있다. 일반적으로는 pro-survival 경로에 관련되어 있는 인자를 촉진하고 pro-apoptosis에 관련되어 있는 인자를 억제하는 것들이다. 그러나 ER stress 반응은 매우 복잡하고 적응과 사멸 기작(adaptation and elimination mechanism)의 중간 역할을 하기 때문에 ER stress에 관련된 주요 인자를 산업적으로 응용하기 위해선 이들의 기능에 대해 보다 깊은 연구가 이루어져야 한다. 현재까지 재조합단백질의 생산량을 최대한으로 높이는 방법은 ER stress 반응이 생기지 않도록 fed-batch process를 개선하고 세포 사멸 기작을 조절하며 단백질의 glycosylation 처리를 하는 것이다.

• Journal of Veterinary Science
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• 제25권2호
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• pp.21.1-21.15
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• 2024

Background: Peste des petits ruminants (PPR) is a contagious and fatal disease of sheep and goats. PPR virus (PPRV) infection induces endoplasmic reticulum (ER) stress-mediated unfolded protein response (UPR). The activation of UPR signaling pathways and their impact on apoptosis and virus replication remains controversial. Objectives: To investigate the role of PPRV-induced ER stress and the IRE1-XBP1 and IRE1-JNK pathways and their impact on apoptosis and virus replication. Methods: The cell viability and virus replication were assessed by 3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide assay, immunofluorescence assay, and Western blot. The expression of ER stress biomarker GRP78, IRE1, and its downstream molecules, PPRV-N protein, and apoptosis-related proteins was detected by Western blot and quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction, respectively. 4-Phenylbutyric acid (4-PBA) and STF-083010 were respectively used to inhibit ER stress and IRE1 signaling pathway. Results: The expression of GRP78, IRE1α, p-IRE1α, XBP1s, JNK, p-JNK, caspase-3, caspase-9, Bax and PPRV-N were significantly up-regulated in PPRV-infected cells, the expression of Bcl-2 was significantly down-regulated. Due to 4-PBA treatment, the expression of GRP78, p-IRE1α, XBP1s, p-JNK, caspase-3, caspase-9, Bax, and PPRV-N were significantly downregulated, the expression of Bcl-2 was significantly up-regulated. Moreover, in PPRV-infected cells, the expression of p-IRE1α, p-JNK, Bax, and PPRV-N was significantly decreased, and the expression of Bcl-2 was increased in the presence of STF-083010. Conclusions: PPRV infection induces ER stress and IRE1 activation, resulting in apoptosis and enhancement of virus replication through IRE1-XBP1s and IRE1-JNK pathways.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제32권3호
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• pp.341-348
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• 2024

Endoplasmic reticulum (ER) stress plays a crucial role in liver diseases, affecting various types of hepatic cells. While studies have focused on the link between ER stress and hepatocytes as well as hepatic stellate cells (HSCs), the precise involvement of hepatic macrophages in ER stress-induced liver injury remains poorly understood. Here, we examined the effects of ER stress on hepatic macrophages and their role in liver injury. Acute ER stress led to the accumulation and activation of hepatic macrophages, which preceded hepatocyte apoptosis. Notably, macrophage depletion mitigated liver injury induced by ER stress, underscoring their detrimental role. Mechanistic studies revealed that ER stress stimulates macrophages predominantly via the PERK signaling pathway, regardless of its canonical substrate ATF4. hnRNPA1 has been identified as a crucial mediator of PERK-driven macrophage activation, as the overexpression of hnRNPA1 effectively reduced ER stress and suppressed pro-inflammatory activation. We observed that hnRNPA1 interacts with mRNAs that encode UPR-related proteins, indicating its role in the regulation of ER stress response in macrophages. These findings illuminate the cell type-specific responses to ER stress and the significance of hepatic macrophages in ER stress-induced liver injury. Collectively, the PERK-hnRNPA1 axis has been discovered as a molecular mechanism for macrophage activation, presenting prospective therapeutic targets for inflammatory hepatic diseases such as acute liver injury.

• 생명과학회지
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• 제24권10호
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• pp.1039-1045
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• 2014

본 연구의 목적은 마우스 레이디히 세포인 mLTC-1 세포에 사람 융모성 성선자극호르몬인 hCG를 처리하여 유도되는 소포체 스트레스가 IRE1/XBP1 경로를 통하는지 분석하는 것 이다. 이전 연구에서 hCG처리에 의해 레이디히 세포는 소포체 스트레스 매개의 세포자멸사가 유도될 뿐만 아니라 ATF6경로를 조절함으로써 UPR이 성호르몬 합성효소의 발현에 중요한 역할을 하는 것을 증명하였다. UPR 경로는 또한 IRE1/XBP1 경로를 통하여 조절되는 것이 알려져 있지만 레이디히 세포에서 hCG에 의한 소포체 스트레스에 의해 IRE1/XBP1 경로의 활성화가 유도되는지에 대해서는 거의 알려져 있지 않다. mLTC-1세포에서 hCG 처리 후 IRE1/XBP1경로의 활성을 조사하기 위하여, 인산화된 IRE1 단백질 확인하기 위한 western blot, XBP1 mRNA splicing 확인하기 위한 RT-PCR을 수행하였다. 또한 우리는 IRE의 활성을 관찰하기 위하여 소포체 스트레스-활성 표지자(ERAI) construct를 이용하고 이를 형광현미경과 flow cytometry를 이용하여 분석하였다. 결과적으로, hCG 처리에 의해 인산화된 IRE1 단백질의 발현 수준이 두드러지게 증가하였다. F-XBP1-venus/F-$XBP1{\Delta}DBD$-venus가 도입된 mLTC-1 세포에서, hCG 처리에 의해 녹색 형광을 띄는 세포들이 유도되었고 각각 핵/세포질에서 발현하는 것을 확인할 수 있었다. 게다가 hCG 처리 후에 XBP1 mRNA의 splicing 또한 상당히 증가되는 것을 확인 할 수 있었다. 이 결과들을 통하여 종합해 볼 때 레이디히 세포에서 hCG 처리에 의해 유도되는 소포체 스트레스가 IRE1/XBP1 경로의 활성을 유발하는 것을 확인 할 수 있었다.

• 항공우주정책ㆍ법학회지
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• 제20권1호
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• pp.255-272
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• 2005

본 논문은 민간항공 운송 여객기의 사용을 중심으로 국가공역의 효율적이고도 경제적인 활용을 위한 국제민간항공운송사회의 노력과 공역의 설계, 관리 및 규제요인을 고찰하고 선진항공국가의 공역관리정책과 운영 관리 설태를 분석하였으며, 국내의 특수목적 공역활용을 전제로, 기능적인 공역봉쇄개념의 도입을 통한 군. 빈 공역사용자 집단의 화합과 형평성 보장을 통해, 국가공역체계의 운영을 활성화하기 위한 정책방향을 제시하였다.

• 대한의생명과학회지
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• 제13권2호
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• pp.157-160
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• 2007

Endoplasmic reticulum (ER) plays formation of disulfide bonds and proper folding of secretory proteins. Cellular responses to ER stress enhances the stress-activated kinase pathway and the induces a lot of immediate-early genes. Among of them, the early growth response-1 (Egr-1), a transcription factor, which plays an important role in cell growth, development, differentiation, apoptosis and various types of injury. For that reason, we have tested the expression of Egr-1 against ER stress inducible drugs (tunicamycin, DTT, A23187 and BFA) to understand what kind of aspect occurred by ER stresses.

• 대한의생명과학회지
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• 제16권1호
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• pp.65-67
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• 2010

The endoplasmic reticulum (ER) is a multifunctional intercellular organelle in which several posttranslational modification steps occurred such as protein folding, lipid biosynthesis, calcium storage and release. Perturbations that disrupt ER homeostasis lead to the misfolding of proteins in the ER lumen and up-regulation of ER signaling pathway called the unfolded protein response (UPR). Here, we have demonstrated that ageing changes the expression of ER chaperone and associated ER membrane kinases of IRE1, ATF6 and PERK.