The triploid Pacific oyster, which is produced by mating tetraploid and diploid oysters, is favored by the aquaculture industry because of its better flavor and firmer texture, particularly during the summer. However, tetraploid oyster production is not feasible in all oysters; the development of tetraploid oysters is ongoing in some oyster species. Thus, a method for ploidy verification is necessary for this endeavor, in addition to ploidy verification in aquaculture farms and in the natural environment. In this study, a method for ploidy verification of triploid and diploid oysters was developed using multiplex polymerase chain reaction (PCR) panels containing primers for molecular microsatellite markers. Two microsatellite multiplex PCR panels consisting of three markers each were developed using previously developed microsatellite markers that were optimized for performance. Both panels were able to verify the ploidy levels of 30 triploid oysters with 100% accuracy, illustrating the utility of microsatellite markers as a tool for verifying the ploidy of individual oysters.
The purpose of this study is to examine fluctuating asymmetry of eye diameter, maxilla length, operculum length, and the number of pectoral fin ray and pelvic fin ray between ploidy and sex in diploid and triploid marine medaka, Oryzias dancena. In all experimental groups, eye diameter and maxilla length showed no significant difference between left side and right side (p>0.05). Results of operculum length in triploid male group and pectoral fin ray's number in diploid male group showed similarity ones with results of operculum length in triploid female group and pectoral fin ray's number in diploid female group (p<0.05). However, the operculum length in diploid male group and pectoral fin ray's number in triploid male group showed consinderable difference with those of operculum length in diploid female group and pectoral fin in triploid female group. Findings of pelvic fin ray's number in all groups were similar to those of pectoral fin ray's number in all groups (p<0.01).
유도된 3배체 미꾸라지 Misgurnus mizolepis의 자, 치어를 재료로 시원생식세포의 출현, 생식 융기 및 원시생식소 형성 및 발달 과정을 조사하여 2배체와 비교하였다. 2배체와 3배체 모두 시원생식세포는 부화후 2일, 체후부의 중신관과 장관사이의 섬유성 간충직을 따라 식별되었다. 생식 융기는 부화후 4-5일 체벽 상피로부터 복강으로 돌출되기 시작하였고 원시 생식소는 부화후 8일의 후기자어에서 식별되어, 부화후 20-25일까지 시원생식세포들의 분열 증식과 풍부한 섬유성 결체조직의 형성과 함께 앞쪽으로 신장되어 가는 선상의 생식소로 나타나 두 실험군 모두 동일한 조직학적 특성을 보였다. 시원생식세포의 형태는 2배체와 3배체 모두 원반형에서 타원형 내지 구형으로 발달되었고 크기의 차는 없었으나, 원시생식소의 길이는 2배체가 3배체에 비해 길게 나타났다.
We cytogenetically analyzed a triploid King-Nupchi strain of the olive flounder Paralichthys olivaceus to define the simplest, most rapid, and most effective method of ploidy analysis in aquaculture farms. Female triploidy of the flounder King-Nupchi strain was induced by cold shock (3 min post-fertilization at 2-4℃ for 45 min). Triploid induction was confirmed by erythrocyte measurement (nuclear volume, 29.15±2.10 μm3); flow cytometry (2.14±0.03 pg/cell); chromosome count (3N=72); Ag-NOR banding; and silver staining. Silver staining of finned cells obtained using a solid tissue technique was the most effective method of ploidy verification.
Park, In-Seok;Gil, Hyun Woo;Lee, Tae Ho;Nam, Yoon Kwon;Kim, Dong Soo
한국발생생물학회지:발생과생식
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제20권4호
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pp.305-314
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2016
The marine medaka, Oryzias dancena is a suitable sample as a laboratory animal because it has a small size and clearly distinguishes between female and male. Data on the growth and maturity of the diploid and triploid sea cucurbit species suitable for laboratory animals are very useful for studying other species. Triploidy was induced in the marine medaka by cold shock treatment ($0^{\circ}C$) of fertilized eggs for 45 min, applied two minutes after fertilization. The diploid and triploid male fish were larger than their female counterparts (P<0.05), and the concentrations of thyroid stimulating hormone (TSH) and thyroxine (T4) were higher in the induced triploids over 1 year (P<0.05). In both the diploid and tri-ploid groups the concentrations of TSH and T4 were higher in the male fish than in the females (P<0.05), while the testo-sterone and estradiol-$17{\beta}$ concentrations in the induced triploids were lower than in the diploids (P<0.05). The gonadosomatic index (GSI) of the triploid fish was lower than that for the diploids, and the GSI for females in each ploidy group were higher than that for the males. For both groups the GSI was highest at 4 months of age, and decreased thereafter to 12 months. Analysis of the gonads of one-year-old triploid fish suggested that the induction of triploidy probably causes sterility in this species; this effect was more apparent in females than in males.
As a series of systematic classification for Korean common liver fluke, Fasciola sp., karyotype was investigated by means of the modified air-drying technique and of the regular Giemsa staining. Also, C-staining method was applied for detailed karyological analysis from the germ cells of the fluke. The following is a brief summary of the leading facts gained through the experiment. 1. Korean Pasciola sp. was classified into three types based on their chromosomal complements; individuals with 20 or 30 chromosomes and with a 20/30 mosaic constitution. Worms having 30 chromosomes represent a triploid form with 3 sets of 10 basic chromosomes, while those with 20 chromosomes were diploid and mosaic individuals were 2n/3n mixoploid. 2. The frequency of the individual type calculated is as follows; 67.45% of 212 flukes examined was of diploid, 10.85%, triploid, and the rest, 21.7%, mixoploid, respectively. In many cases, two or three types were found in the peculiar bovine host while single type inhabitant was about 20% out of 52 cases. 3. The twenty chromosomes consisted of 1 pair of large metacentrics, 4 pairs of medium-sized subtelocentrics, and 5 pairs of small submetacentrics, while constitution of the thirty chromosomes was nearly interpreted as a triploid form with 3 sets of 10 basic chromosomes. The high centromeric indexes of both types are the first Pairs among all the examined, and 37.93% was of diploid and 47.93%, triploid, respectively. 4. In mixoploid individuals, constitution of the chromosomes of diploid or triploid cells was the same as that of diploid or triploid individuals. 5. All the chromosomes of the germ cells in both types showed C-band around the centromeric region and especially the chromosomes no's 3,7, and 8 showed a remarkable C-band distinguished from other chromosomes. 6. The variance for the sizes of the worms and the eggs were not parallel with three different genotypes in Korean common liver fluke.
일반양식어(2배체)에 비해 사료효율이 높고, 성장율이 좋은 3배체잉어에 대한 식품학적 기초자료를 얻고자 비산란기 2배체잉어와 3배체잉어의 식품성분을 비교$\cdot$검토하였으며 아울러 산란기 2배체잉어와도 비교하였다. 일반성분은 비산란기 2배체잉어 및 3배체잉어가 산란기 2배체잉어에 비하여 수분함량은 낮았으며 조지방은 오히려 높았다. 배쪽육 및 등쪽육의 총유 리아미노산함량은 비산란기 2배체잉어가 각각 363.0mg/100g, 357.8mg/100g으로 가장 많았고, 다음으로 3배체잉어 (346.1mg/100g, 333.4mg/100g), 산란기 2배체잉어(329.5mg/100g, 326.0mg/100g)의 순이었다. 시료어 및 근육의 종류에 관계없이 함량이 많은 유리 아미노산으로는 histidine, taurine, Iysine 및 glycine 등이었고, 이들은 전체의 $77.5\~83.2\%$를 차지하였으며, 그 중에서도 특히 histidine 함량이 많았다. 핵산관련물질함량은 시료어 및 근육의 종류에 관계없이 IMP함량($179.4\~198.4mg/100g$)이 가장 많았고, 다음으로 ATP함량이 많았으며, ADP, AMP, inosine 등은 미량 검출되었다. 시료어 및 근육의 종류에 따른 핵산관련물질함량의 차이는 거의 없었다. 총creatinine함량은 근육종류에 관계없이 거의 유사하였으나, 시료어간에 있어 서는 비산란기 2배체잉어가 함량이 가장 많았고, 다음으로 3배체잉어, 산란기 2배체잉어의 순이었다. betaine함량은 $63.5\~66.1mg/100g$으로 시료간에 거의 차이가 없었으며 TMAO는 모든 시료구에서 미량 검출되었다. 함량으로 미루어 보아 3배체 잉어의 맛에는 유리아미노산, 핵산관련물질 및 총creatinine의 순으로 관여하리라 생각된다. 3배체잉어의 총구성아미노산함량은 근육의 종류에 관계없이 비산란기 및 산란기 2배체잉어에 비하여 약간 적었으나 큰 차이는 없었다. 무기질에 있어서는 3배체잉어가 비산란기 2배체잉어에 비하여 인 및 철의 함량은 약간 적었으나 칼슘의 함량은 오히려 많았다. 이상의 결과로부터 3배체잉어는 비산란기 2배체잉어와 비교하여 볼 때 맛성분 및 영양성분에 약간 적었지만 큰 차이는 없었고, 산란기 2배체잉어보다는 그 함량이 많아 성(性)적 성숙기 및 산란기가 없는 3배체잉어는 식품원료학적으로 가치 있다는 결론을 얻었다.
Lim, Sang Gu;Han, Hyeng Keun;Goo, In Bon;Gil, Hyun Woo;Lee, Tae Ho;Park, In-Seok
한국발생생물학회지:발생과생식
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제21권1호
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pp.55-62
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2017
We used flowcytometry to ploidy verification after that investigate difference between diploid and spontaneous triploid through the truss dimension and classical dimension at crucian carp, Carassius auratus, crucian carp C. cuvieri and common carp, Cyprinus carpio collected from Hangang river, Hantangang river, Imjingang river, Geumgang river, Yeongsangang river and Nakdonggang river, Korea. There were significant differences among the three species for the truss dimensions anterior origin of dorsal fin $(2){\times}$ anterior origin of anal fin (5), $2{\times}$ anterior origin of pelvic fin (6), $2{\times}$ origin of pectoral fin (7), posterior origin of dorsal fin $(3){\times}5$, $3{\times}6$, and $3{\times}7$ (P<0.05). There were no significant differences among the three species in the truss dimensions dorsal fin length ($2{\times}9$) and eye diameter (ED)(P>0.05). On the other hand, there were no significant differences in the several classical dimensions of each species (P>0.05). Three classical dimensions, most anterior extension of the head $(1){\times}2$, $1{\times}6$ and $2{\times}$ most posterior scale in lateral line (4) did not differ between the C. auratus diploid and spontaneous triploid (P>0.05). Two classical dimensions, $1{\times}6$ and longest length between most anterior extension of the head and gill cover ($1{\times}8$) did not differ between the C. cuvieri diploid and spontaneous triploid (P>0.05). One classical dimensions, $1{\times}2$ did not differ between the common carp diploid and spontaneous triploid (P>0.05). There were significant differences in the each diploid and triploid species (P<0.05). These results suggest that the classification of each species and classification between diploid and spontaneous triploid morphometrical parameters used in this study are useful indices of morphometrical status in the each species from major river of Korea.
낙동강 상류의 여러 수계에서 거의 암컷으로 구성된 Cobitis sinensis - longicorpus complex 2배체와 3배체 집단이 높은 빈도로 출현하였다. 그 가운데, 수컷의 C. sinensis (2n=48) 및 C. longicorpus (2n=50)와 암컷 3배체 C. sinensis - longicorpus (3n=73)를 실험실내에서 인공 교잡 실험을 하였다. 그 결과 각 조합에서 얻은 자손의 체측 반문에는 부계 형질이 발현되었고 그들의 염색체는 모두 부계의 haploid genome이 포함된 diploid form (2n=48,49)이었다. 이상의 결과로 볼때 3배체 암컷인 Cobitis sinensis - longicorpus complex는 제 1 감수분열에서 uneven genome을 배제하고 제 2감수분열에 의한 반수체 ovum을 형성하는 독특한 생식 양상을 갖는 것으로 사료된다.
기름종개와 왕종개로부터 기원한 단성생식집단인 Cobitis hankugensis-Iksookimia longicorpa complex는 대부분 암컷으로만 구성되어 있으며 최근에 1종류의 2배체와 2종류의 3배체집단이 확인되었다. 이들의 난막구조를 조사한 결과 3가지 종류로 구분될 수 있었다. 융모형은 이들의 부모종인 왕종개에서 확인되었으며, 과립형은 기름종개와 3배체집단, 그리고 과립을 가진 융모형은 2배체집단에서 나타났다. 특히 과립형을 가지는 3집단에서는 그들의 길이와 밀도에서 서로 차이를 보였다. 이러한 구조들은 cobitid complex에서 처음 보고될 뿐 아니라 2배체, 3배체 complex집단을 분류하는 데 이용될 수 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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