Kim, H. J;K. Naruse;S. M. Chang;K. S. Im;Lee, S. H.;Park, C. S.;D. I. Jin
Korean Journal of Animal Reproduction
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v.27
no.4
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pp.333-338
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2003
Transgenic mice containing GH Receptor (GHR) gene fused to metallothionein promoter were analyzed to evaluate effect of GHR expression on growth in vivo. Three founder mice lines contained copies of GHR transgene and transmitted these genes into F$_1$ and F$_2$ progenies. The mRNA expression of transgene was identified using RT-PCR with GHR genes in tissues. To analyze the effects of transgenes on growth performance, body weights of pups were measured at 4, 10 and 14 weeks after birth. The body weight of transgenic mice was higher compared with that of non-transgenic control mice regardless of sex (P<0.05). Body weights between transgenic and non-transgenic mice were increased with aging. Overall, GHR transgenic mice tended to grow about 10 to 15 % faster than non-transgenic mice without any pathological defects.
This study was performed to test the cellulose digestibility using the transgenic pigs harboring cellulose degradation gene D (CelD). After delivered offsprings between normal pig and transgenic swine, DNA was isolated from piglets tail for PCR analysis. In first generation, five out of 65 piglets showed CelD positive. Unfortunately, four CelD-positive pigs were died during growing, but one survived pig was used as a transgenic founder to produce F$_1$ descendents. Among 3 F$_1$ transgenic pigs produced, one died and the remaining two pigs were used to test the fiber digest efficiency. An assorted feed was composite of 5% fiber with other ingredients. The feed of 3 kg per day was provided to the pigs including transgenic founders and littermate controls. The manure quantity was measured daily for a month, and all manures were dried for three days to analysis nitrogen, phosphate and fiber concentrations. The fiber digestion efficiencies of the transgenic F$_1$ pigs showed approximately 10% higher than those of control pigs. Fiber digestion was not greatly improved in transgenic pigs as it had been expected approximately 30%. Nitrogen concentration of transgenic pig's manure was slowly decreased compare to the control pigs. Because there were only two transgenic pigs tested, a large number of transgenic pigs may be necessary to obtain more reliable data. Breeding of animals to obtain sufficient transgenic pigs subjected for a further study is on progress. Taken together, this study demonstrated successful production of transgenic pigs with increase of cellulose digestibility in the porcine feed.
Blood test is a useful tool in establishing medical treatment for livestock. It provides information such as disease diagnosis, treatment effects, prognostic judgment, and health status. This study compared the value of erythrocytes and leukocytes among conventional, transgenic miniature, and transgenic conventional pigs aged six months to 24 months. Further, it analyzed the aspects of hematological value changes according to the pigs' ages. As a result, the number of red blood cells (RBC), which include hemoglobin, and hematocrit, and the number of white blood cells (WBC), which include neutrophils, and lymphocyte, were high among transgenic miniature pigs, compared with the conventional and transgenic conventional pigs. Conventional pigs showed similar values of RBC and WBC regardless of transgenesis. In comparing their age, the RBC decreased as the age increased compared with the pigs among all the three groups aged of 6~12 months. On the other hand, WBC and neutrophils showed no significant difference regardless of different ages among all the three groups. However, various counts in RBC and WBC were mostly found to be higher in each age in transgenic miniature pigs than in conventional and transgenic conventional pigs. The results of this study show that the values of RBC and WBC were generally higher in transgenic miniature pigs than in conventional and transgenic conventional pigs. Based on this research, hematological values can be widely used in diagnosing diseases or checking the health status of transgenic pigs that are used as disease models, organ transplant source and alike.
Electrical treatment has been widely used for porcine oocytes activation. However, developmental rates following electrical activation of porcine oocytes is relatively inefficient compared to other domestic animals. To investigate the effects of porcine oocytes on combined activation by both chemical and electrical treatment, in-vitro matured oocytes were activated by combined cycloheximide and electrical pulses treatment. Cumulus-free oocytes were exposed with NCSU-23 medium containing cycloheximide $(10{\mu}g/ml)$ for 0, 5, 10, 20, 30 min and then activated by electrical pulse treatment and cultured in PZM-3 for 8 days. Also effects of exposure to $6.25{\mu}M$ calcium ionophore for 2 min for cumulus-free oocytes were tested. The percentage of blastocyst formation in 10 min exposure to $10{\mu}g/ml$ cycloheximide and electrical pulse treatment was significantly increased (P<0.05) than in the control group. And exposure to $6.25{\mu}M$ calcium ionophore for 2 min with $10{\mu}g/ml$ cycloheximide for 10min and electrical pulse treatment significantly increased (P<0.05) the percentage of blastocyst developmental rates than the control group. In conclusion, activation by combined cycloheximide and electrical stimulation treatment promoted the subsequent development of porcine oocytes and improved the subsequence blastocyst development.
This study was carried out to investigate the effects of cryoprotectants, warming solution and removal of lipid on open pulled straw vitrification (OPS) method of porcine embryos produced by nuclear transfer (NT) of fetal fibroblasts. All solutions used during vitrification were prepared with holding medium consisting of 25 mM Hepes buffered TCM199 medium containing 20% fetal bovine serum (FBS) at $38.5^{\circ}C$. The blastocysts derived from NT with or without lipid were vitrified in each medium of different concentrations of dimethyl sulfoxide (DMSO) and ethylene glycol (EG). Also, blastocysts after cryopreservation were warmed into different concentrations of sucrose in warming solution. The optimal concentrations of cryoprotectants in vitrification solution were 10% DMSO + 10% EG in vitrification solution 1 (VS1) and 20% DMSO + 20% EG in vitrification solution 2 (VS2). The optimal concentrations of sucrose were 0.3 M sucrose in warming solution 1 (WS1) and 0.15 M sucrose in warming solution 2 (WS2). lipid removal from oocytes before NT enhanced the viability of NT embryos after vitrification. Our results show that use of the OPS method in conjunction with lipid removal provides effective cryopreservation of porcine nuclear transfer embryos.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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