본 연구에서는 Ardisia arborescens 에탄올 추출물(AAEE)의 항산화능과 항염증 생리활성을 in vitro assay system 및 cell culture model system을 이용하여 분석하였다. 먼저 AAEE의 항산화능을 DPPH radical 소거능으로 분석한 결과 양성 대조군으로 사용한 ascorbic acid와 유사한 정도의 높은 활성을 보여 매우 강한 항산화능을 보유함을 확인하였다. 또한 RAW 264.7 세포주를 이용한 $H_2O_2$ 및 LPS의 유도에 의해 생성된 ROS에 대한 소거능을 분석한 결과에서도 농도의존적인 강한 소거능을 보였다. 뿐만 아니라 대표적인 항산화효소로 천연물에 의한 항산화능 활성에 의해 발현이 유도되는 HO-1, TrxR1 및 그 전사 인자인 Nrf2의 단백질 발현이 AAEE의 처리에 의해 농도의존적으로 증가됨을 보였으며 이러한 HO-1, TrxR1 및 Nrf2의 발현 변화는 상위신호전달계인 MAPKs에 의해 조절될 가능성을 보였다. 한편 AAEE가 LPS에 의해 유도된 NO 생성에 미치는 영향을 분석한 결과 세포독성 없이 농도의존적인 NO 생성 저해능을 보였으며 이는 NO 생성 단백질인 iNOS의 발현 저해에서 기인함을 확인하였다. 이와 같은 AAEE의 NO 생성 억제 효과는 염증 상위신호전달계인 NF-${\kappa}B$ 및 AP-1의 조절을 통해 일어날 가능성을 보였다. 이러한 결과를 통해 AAEE의 높은 항산화능과 항염증 활성을 처음으로 확인하였으며 향후 기능성 소재로서 유용하게 활용될 수 있을 것으로 판단된다.
본 연구에서는 식물자원으로부터 생리활성을 보유한 새로운 기능성 소재를 찾고자 하였다. 이를 위해 수종의 중국 자생 식물을 분석하여 강한 항산화능을 보유한 3종(Malus hupehensis, Ophiorrhiza cantonensis, 그리고 Psychotria rubra)을 선별하고, 각 추출물의 항산화능과 항염증 생리활성을 분석하였다. 먼저 각 추출물의 항산화능을 DPPH radical 소거능을 통해 분석한 결과 모두 양성 대조군으로 사용한 ascorbic acid와 유사한 정도의 높은 활성을 보여 각 소재가 매우 강한 항산화능을 보유함을 확인하였다. 또한 RAW 264.7 세포주에서 $H_2O_2$ 및 LPS에 의해 유도된 ROS에 대한 각 추출물의 소거능을 분석한 결과에서도 농도의존적인 강한 소거능을 보였다. 뿐만 아니라 대표적인 항산화효소 중 하나로 항산화능 보유 천연물에 의해 발현이 유도되는 HO-1 및 그 전사 인자인 Nrf-2의 단백질 발현이 각 추출물의 처리에 의해 증가됨을 보였다. 한편 각 소재가 LPS에 의해 유도된 NO 생성에 미치는 영향을 분석한 결과 모두 농도의존적인 NO 생성 저해능을 보였으며 이는 NO 생성 단백질인 iNOS의 발현 저해에서 기인함을 확인하였다. 이와 같은 각 소재의 NO 생성 및 iNOS 발현 억제 효과는 염증 상위신호 전달계인 NF-${\kappa}B$ 및 AP-1의 조절을 통해 일어날 가능성을 보였다. 이러한 결과를 통해 중국 자생 식물 3종의 높은 항산화능과 항염증 활성을 처음으로 확인하였으며 향후 기능성 소재로서 유용하게 활용될 수 있을 것으로 판단된다.
In the present study, we first examined whether the changes in the DNA binding activities of the transcription factors, cAMP response element binding protein (CREB) and activator protein-1 (AP-1) mediate the long-term effects of morphine in differentiated SH-SY5Y human neuroblastoma cells. The increases in CREB and AP-1 DNA binding activities were time-dependent up to 6 days of morphine treatment (1, 4, and 6 days). However, the significant reduction in the DNA binding activities of CREB and AP-1 was observed after 10 days of chronic morphine $(10\;{\mu}M)$ administration. Secondly, we examined whether the changes of CREB and AP-1 DNA binding activities could be modulated by dopamine and haloperidol. Dopamine cotreatment moderately increased the levels of the CREB and AP-1 DNA binding activities induced by 10 days of chronic morphine treatment, and haloperidol cotreatment also resulted in a moderate increase of the CREB and AP-1 DNA binding activities. However, dopamine or haloperidol only treatment showed a significant increase or decrease of the CREB and AP-1 DNA binding activities, respectively. In the case of acute morphine treatment, the CREB and AP-1 DNA binding activities were shown to decrease in a time-dependent manner (30, 60, 90, and 120 min). Taken these together, in differentiated SH-SY5Y cells, morphine tolerance seems to involve simultaneous changes of the CREB and AP-1 DNA binding activities. Our data also suggest the possible involvement of haloperidol in prevention or reversal of morphine tolerance at the transcriptional level.
옥수수의 원뿌리(primary root)를 재료로 외부에서 처리한 에탄올이 알데히드 산화효소의 활성을 변화시키는 현상을 관찰하였다. 에탄올의 촉진 효과는 처리된 에탄올의 농도에 따라 다르게 나타나 알데히드 산화효소는 0.2-0.4% 에탄올 처리 구간에서 대조구에 비하여 낮은 활성을 나타내었으며 0.8-1.0% 에탄올 처리 구간에서는 대조구에 비하여 높은 활성을 나타내었다. 에탄올에 의하여 알데히드 산화효소의 활성이 증가하는 조건에서도 두 개의 알데히드 산화효소 유전자 AO1과 AO2 의 전사 수준에는 변화가 없었다. 그러나 에탄올 처리는 알데히드 산화효소의 단백질 함량을 현저히 증가시켰으며, 이는 에탄올이 알데히드 산화효소 활성을 증가시키는 조절작용이 번역(translation) 단계에서 이루어진다는 사실을 보여주었다. 에탄올, 메탄올 그리고 이소프로판올을 처리한 실험 결과 에탄올에 의해서만 알데히드 산화효소의 활성 증가가 유도되었다. 에탄올은 식물체의 뿌리가 저산소 조건에서 에너지 확보를 위하여 발효를 진행하는 경우 자연적으로 식물체내 농도가 증가하는 물질이다. 따라서 에탄올 처리시에 알데히드 산화효소의 활성이 증가하는 현상은 알코올에 대한 일반적인 반응이 아니라 식물체의 뿌리가 생리적으로 경험할 수 있는 에탄올에 대하여 특이적으로 나타내는 반응이라는 결론을 얻었다.
Antidiabetic activity and mechanism of Supungsungihyan(SPSGH) were examined in db/db mice, which is a spontaneously hyperglycemic, hyperinsulinemic and obese animal model. SPSGH and acarbose were administered orally for 4 weeks. Fasting and non-fasting serum glucose, glycated hemoglobin and trig-lyceride of SPSGH treated group were all reduced when compared with those of db/db control group. At 12th week after birth, SPSGH increased an insulin secretion although statistic significance was not seen. Total activities of sucrose, maltase and lactase in SPSGH treated group were not significantly different from those in db/db control. On the other hand, sucrase and maltase activities in acarbose treated groups were increased. Effect of SPSGH on mRNA expression of glucose transporter(GLUT-4) was also examined by RT-PCR and in vitro transcription with co-amplification of rat $\beta$-actin gene as an internal standard. Muscular GLUT-4 mRNA expression in SPSGH treated group was increased significantly. These results may suggest that SPSGH lowered blood glucose ascribing to upregulation of muscular GLUT-4 mRNA expression.
Farooqi, Ammad Ahmad;Qureshi, Muhammad Zahid;Coskunpinar, Ender;Naqvi, Syed Kamran-Ul-Hassan;Yaylim, Ilhan;Ismail, Muhammad
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제15권5호
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pp.1909-1912
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2014
It is becoming progressively more understandable that between transcription and translation there lies another versatile regulator that quantitatively controls the expression of mRNAs. Identification of miRNAs as key regulators of wide ranging signaling cascades and modulators of different cell-type and context dependent activities attracted basic and clinical scientists to study modes and mechanisms in details. In line with this approach overwhelmingly increasing in vivo and in vitro studies are deepening our understanding regarding miR-421, mir-155 and miR-650 mediated regulation of cellular activities. We also attempt to provide an overview of long non coding RNAs.
Kim, Jin-Hong;Lee, Min Hee;Kim, Ji Hong;Moon, Yu Ran;Cho, Eun Ju;Kim, Ji Eun;Lee, Choon-Hwan;Chung, Byung Yeoup
Rapid Communication in Photoscience
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제1권1호
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pp.21-24
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2012
Influence of gamma rays on the cyanobacterium Synechocystis sp. PCC 6803 cells was investigated in terms of a bidirectional hydrogenase, which is encoded by hoxEFUYH genes and responsible for biohydrogen production. Irradiated cells revealed a substantial change in stoichiometry of photosystems at one day after gamma irradiation at different doses. However, as evaluated by the maximal rate of photosynthetic oxygen evolution, maximal photochemical efficiency of photosystem II, and chlorophyll content, net photosynthesis or photosynthetic capacity was not significantly different between the control and irradiated cells. Instead, transcription of hoxE, hoxH, or lexA, which encodes a subunit of bidirectional hydrogenase or the only transcriptional activator, LexA, for hox genes, was commonly enhanced in the irradiated cells. This transcriptional enhancement was more conspicuously observed immediately after gamma irradiation. In contrast, hydrogenase activities were found to somewhat lower in the irradiated cells. Therefore, we propose that transcription of hox genes should be enhanced by gamma irradiation in a LexA-mediated and possibly photosynthesis-independent manner and that this enhancement might not induce a subsequent increase in hydrogenase activities, probably due to the presence of post-transcriptional and/or post-translational regulatory mechanisms.
To gain insight on the role of pro-inflammatory cytokines in the pathogenesis and treatment of rheumatoid arthritis (RA), the phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)-induced IL-6 gene expression and the effect of caffeic acid phenethyl ester (CAPE) on the PMA-induced IL-6 gene expression were investigated in human fibroblast-like synoviocytes (FLSs). Synovial tissue samples were obtained from rheumatoid arthritis patients, and FLSs were isolated. The cells were stimulated with PMA (100 nM) for 6 hrs to induce IL-6 gene. The cells were pretreated with CAPE (20, 50, $100{\mu}M$) prior to PMA treatment. PMA increased IL-6 RNA expression, binding activities of transcription factors ($NF-{\kappa}B$, AP-1) to IL-6 promoter, and IL-6 promoter activity. However, CAPE inhibited PMA-induced IL-6 mRNA expression in dose-dependent manner, and also inhibited the increased binding activities of transcription factors to IL-6 promoter and IL-6 promoter activity. These results suggest that CAPE might regulate PKC-mediated IL-6 expression and inflammatory reactions in RA.
Elkady, Ayman I;Hussein, Rania A;El-Assouli, Sufian M
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제16권17호
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pp.7943-7957
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2015
Background and Aims: Colorectal cancer is one of the leading causes of death in the world. The aim of this study was to investigate the growth-suppression potentiality of a crude saponin extract (CSENS) prepared from medicinal herb, Nigella sativa, on human colon cancer cells, HCT116. Materials and Methods: HCT116 cells were subjected to increasing doses of CSENS for 24, 48 and 72 h, and then harvested and assayed for cell viability by WST-1. Flow cytometry analyses, cell death detection ELISA, fluorescent stains (Hoechst 33342 and acridine orange/ethidium bromide), DNA laddering and comet assays were carried out to confirm the apoptogenic effects of CSENS. Luciferase reporter gene assays, quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction and Western blot analyses were performed to assess the impact of CAERS and CFEZO on the expression levels of key regulatory proteins in HCT116 cells. Results: The results demonstrated that CSENS inhibited proliferation and induced apoptosis. Apoptosis was confirmed by flow cytometry analyses, while CSENS-treated cells exhibited morphological hallmarks of apoptosis including cell shrinkage, irregularity in cellular shape, cellular detachment and chromatin condensation. Biochemical signs of apoptosis, such as DNA degradation, were observed by comet assay and gel electrophoresis. The pro-apoptotic effect of CSENS was caspase-3-independent and associated with increase of the Bax/Bcl-2 ratio. CSENS treatment down-regulated transcriptional and DNA-binding activities of NF-${\kappa}B$ and AP-1 proteins, associated with down-regulation of their target oncogenes, c-Myc, cyclin D1 and survivin. On the other hand, CSENS up-regulated transcriptional and DNA-binding activities of Nrf2 and expression of cytoprotective genes. In addition, CSENS modulated the expression levels of ERK1/2 MAPK, p53 and p21. Conclusions: These findings suggest that CSENS may be a valuable agent for treatment of colon cancer.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Sageretia thea is traditionally used as a medicinal herb to treat various diseases, including skin disorders, in China and Korea. This study evaluated the inhibitory effect of Sageretia thea fruit on melanogenesis and its underlying mechanisms in B16F10 mouse melanoma cells. The active chemical compounds in anti-melanogenesis were determined in Sageretia thea. MATERIALS/METHODS: Solvent fractions from the crude extract were investigated for anti-melanogenic activities. These activities and the mechanism of anti-melanogenesis in B16F10 cells were examined by determining melanin content and tyrosinase activity, and by performing western blotting. RESULTS: The n-hexane fraction of Sageretia thea fruit (HFSF) exhibited significant anti-melanogenic activity among the various solvent fractions without reducing viability of B16F10 cells. The HFSF suppressed the expression of tyrosinase and tyrosinase-related protein 1 (TRP1). The reduction of microphthalmia-associated transcription factor (MITF) expression by the HFSF was mediated by the Akt/glycogen synthase kinase 3 beta ($GSK3{\beta}$) signaling pathway, which promotes the reduction of ${\beta}-catenin$. Treatment with the $GSK3{\beta}$ inhibitor 6-bromoindirubin-3'-oxime (BIO) restored HFSF-induced inhibition of MITF expression. The HFSF bioactive constituents responsible for anti-melanogenic activity were identified by bioassay-guided fractionation and gas chromatography-mass spectrometry analysis as methyl linoleate and methyl linolenate. CONCLUSIONS: These results indicate that HFSF and its constituents, methyl linoleate and methyl linolenate, could be used as whitening agents in cosmetics and have potential for treating hyperpigmentation disorders in the clinic.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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