Tomato (Lycopersicon esculentum Mill) seedlings exposed to various concentrations of $CdCl_2(0{\sim}100{\mu}M)$ in a nutrient solution for up to 9 days were analyzed with respect to the thiol changes and oxidative stress. The Cd exposure increased total non-protein thiols (NPT) and cysteine in both leaves and roots, total glutathione in leaves, and the ratios of oxidized glutathione (GSSG)/reduced glutathione (GSH) in both leaves and roots, but decreased the ratio of dehydroascorbate (DASA)/ascorbate(ASA) in leaves. Our results suggest that the Cd-induced GSH depletion due to thiol synthesis and oxidation alters the antioxidant activity of seedlings for $H_2O_2$, and the subsequent $H_2O_2$ accumulationand oxidative stress result in phytotoxicity.
Rumen bacterial amino acids in sheep on urea diet were monitored to assess a possible change in amino acid synthesis as a long term response to high rumen ammonia environment. A sheep was fed a semipurified diet with soybean meal, followed by a diet with urea as a main nitrogen source. Mixed rumen bacteria were harvested from ruminal fluid taken 3 h after feeding (twice in soybean meal feeding and 6 times in urea feeding) and fractionated as cell wall, proteins and protein-free cell supernatant of monitor amino acids in each fraction. Ruminal ammonia concentration at the sampling ranged from 5.7 to 39.5 mgN/dl. Cell wall and protein fractions of mixed rumen bacteria were stable in their amino acid composition regardless of nitrogen sources of diet and the feeding duration. However, protein-free cell supernatant fraction showed a higher alanine proportion with urea feeding (18.6 and 28.2 molar % of alanine for samples from sheep fed soybean meal and urea, respectively) and its duration (20.6 and 32.9 molar % for samples from sheep on urea diet for 1 and 65 days, respectively). Total free amino acid level of bacteria was depressed in the initial period of urea feeding but restored on 65th day of the feeding. These results suggest that an alanine synthesizing system may develop in rumen bacteria as urea feeding becomes longer.
In an attempt to evaluate the function of MAP kinase in porcine oocytes and to develop a method of the assessment of its activity, myelin basic protein (MBP) was used as a substrate to detect the MAP kinase activity of porcine oocytes which had undergone maturation in vitro. The existence of MAP kinase and MAP kinase kinase (MAPKK) was verified in immature porcine germinal vesicle (GV) oocytes at 0 h culture via Western blotting. Porcine oocytes exhibited a low level of MAP kinase activity during the first 20 h of culture, which increased at 25 h, during which time a breakdown in the nuclear membrane occurred. Significantly higher increases (p<0.05) of MAP kinase activity were detected at 30 h of culture. Using the gel phosphorylation method, MBP was phosphorylated at two positions corresponding to mammalian MAP kinase-extracellular signal-regulated kinase (ERK 1) (44 kDa) and ERK 2 (42 kDa). The absolute levels of those proteins did not increase during 40 h of culture, suggesting that the detected increase in MAP kinase activity was the result of phosphorylation rather than changes in the total amount of protein. MAPKK and MAP kinase were dephosphorylated in first-stage (MI) meiotic oocytes by the addition of cycloheximide, a protein synthesis inhibitor. These results of this study indicate that the MAP kinase cascade does exists in porcine oocytes and that its activation leads to oocyte maturation.
Woo, Seon-Ock;Son, Sung-Hee;Park, Hong-Seog;Vulpe, Chris D.;Ryu, Jae-Chun;Yum, Seung-Shic
Molecular & Cellular Toxicology
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제4권4호
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pp.293-299
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2008
To screen the differentially expressed genes in cadmuim-exposed marine medaka fish (Oryzias javanicus), a candidate marine test fish for ecological toxicity, the differential display polymerase chain reaction (DD-PCR) was carried out, since the genome-wide gene expression data are not available in this fish species yet. A total of 35 clones were isolated from cadmium-exposed fish and their nucleotide sequences were analyzed. The differentially expressed gene candidates were categorized to response to stimulus (3); ion binding (3); DNA binding (1); protein binding (6); carbohydrate binding (1); metabolic process (4); biological regulation (3); cellular process (2); protein synthesis (2); catalytic activity (2); sense of sight (1); immune (1); neurohormone (1); signaling activity (1); electron carrier activity (1) and others (3). For real-time quantitative RT-PCR, we selected catalase, glucose-6-phosphate dehydrogenase, heat shock protein 70, and metallothionein and confirmed that cadmium exposure enhanced induction of these four genes.
Metabolizable protein (MP) supply and amino acid balance in the intestine were manipulated through selection of highly digestible rumen-undegradable protein (RUP) sources and protected methionine (Met) supplementation. Four ruminallycannulated, multiparous Holstein cows averaging 193${\pm}$13 days in milk were used in a 4${\times}$4 Latin square design to assess N utilization and milk production responses to changes in RUP level, post-ruminal RUP digestibility and protected Met supplementation. Treatments were A) 14.0% crude protein (CP), 8.0% rumen degradable protein (RDP) and 6.0% RUP of low intestinal digestibility (HiRUP-LoDRUP); B) 14.1% CP, 8.1% RDP and 6.0% RUP of high intestinal digestibility (HiRUP-HiDRUP); C) 13.1% CP, 7.9% RDP and 5.2% RUP of high intestinal digestibility (LoRUP-HiDRUP), and D) 13.1% CP, 7.9% RDP and 5.2% RUP of high intestinal digestibility plus rumen escape sources of Met (LoRUP-HiDRUP+Met). Experimental diets were formulated to have similar concentrations of RDP, net energy of lactation ($NE_L$), neutral detergent fiber (NDF), acid detergent fiber (ADF), calcium, phosphorus and ether extract using the NRC model (2001). Results showed that dry matter intake (DMI), production of milk fat and protein were similar among treatments. Milk production was similar for diet HiRUP-LoDRUP, HiRUP-HiDRUP and LoRUP-HiDRUP+Met, and significantly higher than diet LoRUP-HiDRUP. Milk fat and protein percentage were higher for cows receiving HiDRUP treatments, with the greatest increases in the diet LoRUP-HiDRUP+Met. There was no significant change in ruminal pH, $NH_3g-N$ and volatile fatty acid (VFA) concentration among all treatments. Apparent digestibility of dry matter (DM), CP, NDF and ADF and estimated bacterial CP synthesis were similar for all treatments. Nitrogen intakes, blood and milk urea-N concentrations were significantly higher for cows receiving HiRUP diets. Urine volume and total urinary N excretion were significantly lowered by LoRUP diets. Lowering dietary RUP level while supplementing the highly digestible RUP source with rumen escape sources of Met resulted in similar milk production, maximal milk fat and protein concentration and maximum N efficiency, indicating that post-ruminal digestibility of RUP and amino acid balance in the small intestine can be more important than total RUP supplementation.
Niu, Huaxin;Xu, Zhongjun;Yang, Hee Eun;McAllister, Tim A;Acharya, Surya;Wang, Yuxi
Animal Bioscience
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제34권4호
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pp.584-593
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2021
Objective: The objective of this study was to compare fenugreek (FG) with alfalfa (Alf) in ruminal fermentation and methane (CH4) production in vitro. Methods: Whole-plant FG harvested at 11- and 15-wk and Alf harvested at early and mid-bloom maturities, alone or as 50:50 mixture of FG and Alf at the respective maturity, were assessed in a series of 48-h in vitro batch culture incubations. Total fermentation gas and methane gas production, dry matter (DM) disappearance, volatile fatty acids, microbial protein and 16S RNA gene copy numbers of total bacteria and methanogens were determined. Results: Compared to early bloom Alf, FG harvested at 11-wk exhibited higher (p<0.05) in vitro DM and neutral detergent fibre disappearance, but this difference was not observed between the mid-bloom Alf and 15-wk FG. Regardless plant maturity, in vitro ruminal fermentation of FG produced less (p<0.001) CH4 either on DM incubated or on DM disappeared basis than that of Alf during 48-h incubation. In vitro ruminal fermentation of FG yielded similar amount of total volatile fatty acids with higher (p<0.05) propionate percentage as compared to fermentation of Alf irrespective of plant maturity. Microbial protein synthesis was greater (p<0.001) with 11-wk FG than early bloom Alf as substrate and 16S RNA gene copies of total bacteria was higher (p<0.01) with 15-wk FG than mid-bloom Alf as substrate. Compared to mid-bloom Alf, 15-wk FG had lower (p<0.05 to 0.001) amount of 16S RNA methanogen gene copies in the whole culture during 48-h incubation. Conclusion: In comparison to Alf, FG emerges as a high quality forage that can not only improve rumen fermentation in vitro, but can also remarkably mitigate CH4 emissions likely due to being rich in saponins.
뇌 유구낭미충증의 진단에는 혈청뿐만 아니라 뇌척수액내 특이 IgG항체가도 측정하여 혈청학적 진단의 민감도를 약 10% 높일 수 있다. 이 경우 뇌척수액내 특이 IgG항체가 그 환자의 혈청에서 혈관-뇌 장벽을 넘어 이전된 것인지 또는 두개강내 병변에 형성된 육아종에서 생성한 것인지를 결정하는 일은 뇌척수액내 특이 IgG항체가 측정의 의미를 부여하는 데에 중요하다. 이 연구는 그 기원을 찾기 위하여 실시하였다. 확진된 뇌 유구낭미충증 환자 82례와 기타 신경계질환 환자 및 건강대조인 45례에서 오은 혈청과 뇌척수액에서 각각 총단백질, 알부민 및 IgG 농도를 측정하였다. 그리고 Tourtellotte and Ma (1978)의 공식에 의하여 뇌척수액내 IgG농도를 여출(濾出, transudation; 혈관-뇌장벽이 정상인 상태에서 생리적으로 뇌척수액으로 이전된 것), 삼출(渗出, exudation; 혈관-뇌장벽이 파괴된 상태에서 병적으로 이전된 것) 및 두개강내 생사 등 세가지 기원으로 분리하였다. 고리고 혈청 및 뇌척수액내 특이 IgG항체가를 효소 면역측정법으로 측정하였다. 뇌척수액내 특이 Ig9G항체가와 각기원별 IgG량과의 관계를 통계학적으로 검정하였다. 그 결과를 요약하며 다음과 같다. 1. 뇌 유구낭미충증 환자 뇌척수액에는 총단백질, 알부민 및 IgG평균치가 상승되어 있었다. 각 단백질 농도는 혈청내 특이 IgG항체가와는 관계없이 뇌척수액내 IgG항체가 양성자에서 높았다. 2. 뇌 유구낭미충증 환자의 뇌척수액내 IgG량(14.0mg/dl)은 여출(4.52mg/dl), 삼출(2.94mg/dl) 및 두개강내 생산(6.88mg/dl)으로 구성되었다. 뇌척수액왜 특이 IgG항체가는 여출 및 삼출에 의한 IgG양과는 통계학적 유의성이 없는 관계이었으나 두개강내 생산량과는 유의한 관계가 있었다. 3. 제 4뇌실에 병 변이 화인된 뇌유구낭미충증 환자의 측뇌실에서 얻은 뇌척수액에는 총단백 질, 알부민 및 IgG량이 정상범위이었고 특이 IgG항체는 음성이 었다. 같은 환자의 요추천자로 얻은 뇌척수액에서는 각 단백질이 상승되어 있었고 특이 IgG항체가는 양성이었다. 4. 뇌 유구낭미충증 환자의 뇌척수액내 EgG량중 삼출에 의한 양이 증가된 예에서는 대부분 두개강내 IgG생산이 동반되고 있었다. 따라서 삼출에 의한 뇌척수액내 IgG 출현은 뇌유구낭미충증의 진행중 어느 시기에 특히 심한 것으로 추정된다. 이상의 결과에서 유구낭미충증 환자의 뇌척수액내 특이 IgG항체는 두개 강네 병변에서 생산된 것임을 알 수 있었다. 따라서 뇌척수액을 이용한 특이 IgG항체 측정은 진단에 도움이 된다고 생각된다.
Four, lactating dairy crossbreds ($50%{\times}50%$ Holstein Friesian${\times}$Native Zebu cattle) were randomly assigned according to a $2{\times}2$ factorial arrangement (two protein levels and two levels of mangosteen peel pellets (Mago-pel)) in a $4{\times}4$ Latin square design to receive four dietary treatments. All cows received concentrate at a proportion of 1 kg concentrate per 2 kg of milk yield, and urea-treated 5% rice straw (UTRS) was given ad libitum. It was found that total dry matter intakes, nutrient digestibility, ruminal pH and $NH_3$-N concentrations were not affected (p>0.05) by treatments. Concentrations of ruminal pH and $NH_3$-N were not affected by dietary treatments although the concentration of BUN varied significantly (p<0.05) between protein levels (p<0.05). The populations of rumen bacteria and fungal zoospores did not differ among treatments (p>0.05); however, the population of protozoa was decreased (p<0.05) when cows received Mago-pel supplementation. The composition of the population of bacteria, identified by real-time PCR technique, including total bacteria, methanogens, Fibrobacter succinogenes and Ruminococcus albus was similar (p>0.05) among dietary treatments (p>0.05); however, copy numbers of Ruminococcus flavefaciens was increased when protein level increased (p<0.05). Microbial protein synthesis, in terms of both quantity and efficiency, was enriched by Mago-pel supplementation. Milk yield was greatest in cows fed UTRS based diets with concentrate containing protein at 16% CP with Mago-pel, but were lowest without Mago-pel (p<0.05). In addition, protein level and supplementation of Mago-pel did not affect (p>0.05) milk composition except solids-not-fat which was higher in cows fed the diet with 19% CP. Therefore, feeding a concentrate containing 16% CP together with 300 g/hd/d Mago-pel supplementation results in changes in rumen fermentation and microbial population and improvements in milk production in lactating dairy crossbreds fed on UTRS.
International Journal of Internet, Broadcasting and Communication
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제15권2호
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pp.187-195
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2023
Sarcopenia is a phenomenon in which muscle function, including muscle strength, deteriorates as muscle mass decreases in the process of increasing age. The diagnosis of sarcopenia utilizes total muscle mass and limb muscle mass, and limb muscle mass is expressed as height squared, body weight, and BMI. Each divided value is used as an index, mainly less than 7.23 kg/m2 for men and less than 5.67 kg/m2 for women. Grip strength, standing up from a chair, and walking speed were mainly used as physical function factors, and grip strength less than 27 kg for men and less than 16 kg for women were used as indicators. The limb muscle mass showed a decreasing trend after peaking in the mid-20s in men, and maintaining a gradual peak in women from the mid-20s to the mid-40s, showing a more rapid decline in men. The rate of decrease in muscle mass and strength continues to increase after the age of 20, and muscle strength rapidly decreases after the age of 80. In Korean men, total muscle mass and limb muscle mass show a decreasing trend from the mid-30s, and a more markedly rapid decrease from the age of 60. For women, it remains constant from the age of 30 to the age of 50, then gradually decreases after the mid-50s, and shows a rather rapid decrease after the mid-70s, showing a more gradual decrease than that of men. Men show a sharp decrease from the mid-40s when limb muscle mass is divided by height squared, and women show a marked decrease after 70 years old when limb muscle mass is divided by height squared. Exercise for the prevention and treatment of sarcopenia results in an increase in protein assimilation hormone, an increase in antioxidant activity, a decrease in inflammation, an increase in muscle insulin sensitivity, and an increase in protein synthesis. Resistance exercise is basically used, and aerobic exercise and equilibrium A combination of exercises is effective. In addition, for a more efficient effect of sarcopenia through resistance exercise, it is necessary to supplement nutrition including protein.
The putative EPA synthesis gene cluster was mined from the entire genome sequence of Shewanella oneidensis MR-1. The gene cluster encodes a PKS-like pathway that consists of six open reading frames (ORFs): ORFSO1602 (multi-domain beta-ketoacyl synthase, KS-MAT-4ACPs-KR), ORFSO1600 (acyl transferase, AT), ORFSO1599 (multi-domain beta-ketoacyl synthase, KS-CLF-DH-DH), ORFSO1597 (enoyl reductase, ER), ORFSO1604 (phosphopentetheine transferase, PPT), and ORFSO1603 (transcriptional regulator). In order to prove involvement of the PKS-like machinery in EPA synthesis, a 20.195-kb DNA fragment containing the genes was amplified from S. oneidensis MR-1 by the long-PCR method. Its identity was confirmed by the methods of restriction enzyme site mapping and nested PCR of internal genes orfSO1597 and orfSO1604. The DNA fragment was cloned into Escherichia coli using cosmid vector SuperCos1 to form pCosEPA. Synthesis of EPA was observed in four E. coli clones harboring pCosEPA, of which the maximum yield was 0.689% of the total fatty acids in a clone designated 9704-23. The production yield of EPA in the E. coli clone was affected by cultivation temperature, showing maximum yield at $20^{\circ}C$ and no production at $30^{\circ}C$ or higher. In addition, production yield was inversely proportional to glucose concentration of the cultivation medium. From the above results, it was concluded that the PKS-like modules catalyze the synthesis of EPA. The synthetic process appears to be subject to regulatory mechanisms triggered by various environmental factors. This most likely occurs via the control of gene expression, protein stability, or enzyme activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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