Kyung Ok Lee;Sung Hoi Hong;Moom Ju Oh;Kyung In Kim;Min Jung Kim
Biomedical Science Letters
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v.2
no.2
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pp.223-229
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1996
HLA-B27 gene, one of the HLA-class I molecule, is strongly associated with ankylosing spondylitis. It has been most frequently used as a disease-correlated HLA gene by clinicians. In most laboratories, conventional HLA-B27 typing is still performed by cell cytotoxicity tests or fluorescence serology with specific antibodies. In this study, DNA typing method for HLA-B27 was developed by using group specific Polymerase Chain Reaction (PCR). Four HLA-B27 cell lines (HOM-2, JESTHOM, WT24 and BTB) and fifty six B27 Korean individuals defined by serology were used. The results of control cell and B-27 positive individual samples were correlated well with the data which was performed by serological method. All of B27 positive PCR products gave positive signals on Southern blot hybridization with B27 specific probe. This study shows that the HLA-B27 DNA typing is a relatively simple, fast and practical tool for the determination of the HLA-B27 gene in routine clinical laboratory work.
Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) causes paratuberculosis or Johne's disease, an intestinal granulomatous infection in domestic and wild animals. The study aimed to develop and evaluate a panel of multiplex quantitative real-time polymerase chain reaction (mqPCR) assay for simultaneous detection of three MAP-specific genes (IS900, F57 and ISMAP02 genes). The analytic sensitivity (i.e., limit of detection, expressed as cells per 1 ml) was 150 for IS900, 1500 for F57, and 50 for ISMAP02. The specificity of the method was determined by testing 152 bovine fecal samples. Based on the test, it showed that the assay simultaneously detected the target genes in short period of time and at lower cost compared to laboratory routine tests. The test agreement between the assay and routine test was 94%. The discrepancy in the results was due to samples that were tested positive by the panel but negative by the routine tests, suggesting that the assay has higher sensitivity than the routine tests. In conclusion, the mqPCR assay could be a rapid and accurate testing tool for investigating paratuberculosis or Johne's disease cases in domestic and wild animals.
Copper nano particles have been considered as the materials for conductive ink due to its good thermal, electrical conductivity and low cost. However, copper nanoparticles oxidize easily, decreasing dispersion stability and electrical conductivity. Therefore, it is important to develop a method to minimize oxidation of copper nano particles to improve its dispersion stability property in copper nano ink. In this study, copper nano particles were coated with 1-Octanethiol VSAM(Vaporized Self Assembled Multilayers) to prevent oxidation and coated copper powders were dispersed in conductive ink successfully by studying its relationship of different chain length of solvents to 1-Octanethiol coating layer to fabricate nano ink. Various alcohol solvents, such as 1-Hexanol, 1-Octanol, and 1-Decanol were used. The coating layer was observed using FESEM and TEM. Furthermore, dispersion of copper nano particles in nano inks, was characterized using Turbiscan analyzer, viscometer, and contact angle measurement tool.
The 6-DOF parallel manipulator is a closed-kindmatic chain robot manipulator that is capable of providing high structural rigidity and positional accuracy. Because of its advantage, the parallel manipulator have been widely used in many engineering applications such as vehicle/flight driving simulators, rogot maniplators, attachment tool of machining centers, etc. However, the kinematic analysis for the implementation of a real-time controller has some problem because of the lack of an efficient lagorithm for solving its highly nonliner forward kinematic equation, which provides the translational and orientational attitudes of the moveable upper platform from the lenght of manipulator linkages. Generally, Newton-Raphson method has been widely sued to solve the forward kinematic problem but the effectiveness of this methodology depend on how to set initial values. This paper proposes a hybrid method using genetic algorithm(GA) and Newton-Raphson method to solve forward kinematics. That is, the initial values of forward kinematics solution are determined by adopting genetic algorithm which can search grobally optimal solutions. Since determining this values, the determined values are used in Newton-Raphson method for real time calcuation.
A microchip electrophoresis (ME) method was developed using a programmed field strength gradients (PFSG) for the single nucleotide polymorphism (SNP) based fast identification of cattle breeds. Four different Korean cattle (Hanwoo) and Holstein SNP markers amplified by allele-specific polymerase chain reaction were separated in a glass microchip filled with 0.5% poly(ethyleneoxide) ($M_r$ = 8 000 000) by PFSG as follows: 750 V/cm for 0 - 14 s, 166.7 V/cm for 14 - 31 s, 83.3 V/cm for 31 - 46 s, and 750 V/cm for 46 - 100 s. The cattle breeds were clearly distinguished within 45 s. The ME-PFSG method was 7 times and 5 times faster than the constant electric field ME method and the capillary electrophoresis- PFSG method, respectively, with a high resolving power ($R_s$ = 5.05 - 9.98). The proposed methodology could be a powerful tool for the fast and simultaneous determination of SNP markers for various cattle breeds with high accuracy.
Pediatric solid tumors have many histologic similarity. These tumors contained small round cell types, and cause frequent diagnostic problems in pediatric pathology. An important advance in the differentiation of these small round cell tumors has been the identification of consistent chromosomal translocations associated with several types of tumors. Eighteen patients with soft tissue sarcoma were available for review. Seventeen cell lines were also included in this study. The RNA from the specimens were analyzed by reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR). PAX3-FKHR fusion was present in four of five alveolar rhabdomyosarcoma and PAX7-FKHR fusion was detected in one of five alveolar rhabdomyosarcoma. None of the specimens expressed more than one chimeric transcript. EWS-FLI1 or EWS-ERG fusions were detected in all seven Ewings' sarcoma. No specimens showed EWS-WT1 fusion. These results corresponded well to the histopathologic diagnosis. There were no differences in the histologic appearances of tumors with the more frequent PAX3-FKHR or EWS-FLI1 fusions compared with those containing the variant PAX7-FKHR or EWS-ERG fusions. RT-PCR assay for chimeric transcript is a useful tool for rapid and objective diagnosis of pediatric solid tumors. Through these tools, we can approach genetically to the differential diagnosis of undifferentiated small round tumors.
The triploid Pacific oyster, which is produced by mating tetraploid and diploid oysters, is favored by the aquaculture industry because of its better flavor and firmer texture, particularly during the summer. However, tetraploid oyster production is not feasible in all oysters; the development of tetraploid oysters is ongoing in some oyster species. Thus, a method for ploidy verification is necessary for this endeavor, in addition to ploidy verification in aquaculture farms and in the natural environment. In this study, a method for ploidy verification of triploid and diploid oysters was developed using multiplex polymerase chain reaction (PCR) panels containing primers for molecular microsatellite markers. Two microsatellite multiplex PCR panels consisting of three markers each were developed using previously developed microsatellite markers that were optimized for performance. Both panels were able to verify the ploidy levels of 30 triploid oysters with 100% accuracy, illustrating the utility of microsatellite markers as a tool for verifying the ploidy of individual oysters.
Lim, Mi Young;Jana, Sonali;Sivanesan, Iyyakkannu;Park, Hyun Rho;Hwang, Ji Hyun;Park, Young Hoon;Jeong, Byoung Ryong
Horticultural Science & Technology
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v.31
no.3
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pp.322-327
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2013
The genetic diversity and phylogenetic relationships of eleven herbaceous peonies grown in Korea were analyzed by random amplified polymorphic DNA (RAPD). Twenty-four decamer RAPD primers were used in a comparative analysis of these Korean peony species. Of the 142 total RAPD fragments amplified, 124 (87.3%) were found to be polymorphic. The remaining 18 fragments were found to be monomorphic (12.7%) shared by individuals of all 11 peony species. Cluster analysis based on the presence or absence of bands was performed by Jaccard's similarity coefficient, based on Unweighted Pair Group Method with Arithmetic Averages. Genetic similarity range was 0.39 to 0.90 with a mean of 0.64. This study offered a rapid and reliable method for the estimation of variability among different peony species which could be utilized by the breeders for further improvement of the local peony species. Also, the results propose that the RAPD marker technique is a useful tool for evaluation of genetic diversity and relationship amongst different peony species.
Concerns about food safety continue to rise and under this situation, governments of some countries have reinforced their regulations more strictly for food safety. In order to prevent food safety incidents or, at least to minimize the impact, the preparedness is very important. As a consequence of this, traceability system has become an essential tool for food safety. Recently, it requires more prevention-based food safety control system. One of the most generally used systems for food safety control is Hazard Analysis and Critical Control Point (HACCP). Both traceability and HACCP systems can be integrated through Electronic Product Code (EPC) Sensor Network technologies which have four value propositions. In this paper, we will introduce the concept of product and process traceability system (P2TS) through the integration of three systems to improve food safety management. The final aim is to find out the added values of the P2TS.
Listeria spp. were isolated from a total of 402 naturally contaminated domestic ready-to-eat (RTE) vegetable samples by the conventional Food and Drug Administration protocol and confinned by API-Listeria kit. Also, the susceptibility to 12 antibiotics, polymerase chain reaction (PCR) assay for virulence gene of pathogenic Listeria monocytogenes isolates, and in vitro virulence assay using myeloma and hybridoma cells from murine and human sources were tested. Among the samples, 17 samples (4.2%) were found to be contaminated with Listeria species. Among the 17 strains of Listeria spp. isolates, only 2 strains (11.8%) of L. monocytogenes and 15 strains (88.2%) of L. innocua were identified. Antibiotic susceptibility test showed that the Listeria spp. isolates were very susceptible to the antibiotics tested, except for nalidixic acid. Among 17 strains of Listeria spp., PCR analysis showed that 2 strains of L. monocytogenes isolates proved to have a virulence hly gene, but none of L. innocua had the hly gene. Also, hybridoma Ped-2E9 cells assay showed that only L. monocytogenes isolates killed approximately 95-99% hybridoma cells after 6 h, but L. innocua isolates had about 0-5% lethal effect. These results indicate that PCR assay with hly primer or hybridoma Ped-2E9 cells assay could be used as a good monitoring tool or in vitro virulence test for L. monocytogenes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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