In this study we tried to transform an antimicrobial peptide gene (Shiva) under the promoter of tomato phenylalanine ammonia-lyase (tPAL5) into tobacco and potato plants. Antimicrobial peptide gene was isolated originally from giant silk moth (Hyalophora cecropia) and modified ie nucleotide sequence to increase antimicrobial activity. Transgenic tobacco plants were regenerated and their seeds were tested on the media containing kanamycin (500 mg/L). The results of PCR amplification and genomic Southern blot hybridization confirmed the integration of construct (tPAL5 promoter-Shiva-NOS-GUS-NOS) into chromosome. We observed that one of the transgenic tobacco plants showed chromosome rearrangement when integrated. In case of potato transformation, the efficiency of regeneration was maximized at the medium containing Zeatin 2mg/L, NAA 0.01mg/L, GA$_3$ 0.1mg/L. We also observed the high expression of GUS (${\beta}$-glucuronidase) enzyme which was located next to the terminator sequence of nopaline synthase gene (NOS) in the vascular tissue of stem, leaves of transgenic potatoes. This result suggested that a short sequence of Shiva gene (120 bp) and NOS terminator sequence might be served as a leader sequence of transcript when translated.
Park, Kyung-Seok;Kloepper, Joseph W.;Ryu, Choong-Min
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.18
no.6
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pp.1095-1100
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2008
The role of exopolysaccharides (EPSs) from a plant growth-promoting rhizobacterium, Burkholderia gladioli IN26, on elicitation of induced systemic resistance was investigated. A purified EPS induced expression of PR-1a::GUS on tobacco and elicited induced resistance against Colletotrichum orbiculare on cucumber. The maximum level of disease protection was noted when seeds were soaked in 200 ppm of the EPS. Our results indicate that EPS from specific rhizobacteria can elicit induced resistance and suggest that bacterial EPS might be a useful elicitor of resistance under field conditions.
In order to study the mechanism of the parts of omiza (Schizandra chinensis baillon) on metabolism in normal rats, the metabolites and enzyme activities both in serum and liver were determined. The rats were treated with water extract of the parts of omiza and the results showed a significant decrease of GOT, Glucose (excepted for water extract of fruits), Urea nitrogen, and increase of LDH in serum. Free fatty acid level tended to decrease in serum of rats treated with water extracts of fruits and endocarps and increase in seeds extract treated group. Serum GPT level was unchanged. The level of hapatic metabolites and enzyme activity showed a significant increase, but Pyruvate level was not significantly decreased.
Cotton Glutathione S-Transferase (GST: EC 2.5.1.18) was cloned and overexpressed in tobacco (Nicotiana tabacum) plants. Northern blot analysis confirmed the successful transformation of cotton gst gene in tobacco plant. Type I and Type ll transcript patterns were identified in transgenic tobacco plants and only Type I transcripts were discussed in this paper, The activity of GST in the type II transgenic plants was about 1.5-fold higher than those of the wild type and non-expresser by using 1-chloro-2,4-dinitrobenzene (CDNB) and reduced glutathione as the substrate. The expression of cotton GST in tobacco plants proved that Gh-5 could be translated into functional protein. Type II transgenic plants produced functional GST in the cells. The effects of cotton GST in the seedlings was evaluated by growing the control and transgenic seedlings at $15^{\circ}C$ in the growth chamber in the light. Overexpressors were grown well compared to the control plants (non-expressors). lo test far tolerance to salinity, seeds of Gh-5 overexpressors and the wild type Xanthi seedlings were grown at 0, 50, 100, 150, and 200 mM NaCl solution. Gh-5 transgenic seedlings showed higher growth rate over control seedlings on 50 and 100 mM NaCl solution. There was no difference in growth rate at 150 and 200mM NaCl concentration.
Kim, Soo-Jung;Lee, Jee-Young;Kim, Chung-Ho;Choi, Yang-Do
Applied Biological Chemistry
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v.38
no.5
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pp.387-392
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1995
To study the regulatory expression mechanism of soybean glycinin gone, Gy2, the 5' upstream region of the gene was searched for the presence of putative regulatory elements by nucleotide sequencing. It revealed various kinds of regulatory sequence elements commonly found in plant storage protein genes. There were canonical promoter sequences, TATA box (TATAAT) and AGGA box (GAAT) which are common in the 5' upstream region of the plant genes. The embryo factor binding sequence, RY repeat, CACA sequences, ${\alpha}$-conglycinin enhancer-like sequences were also found. To delineate the function of these sequences, 5' upstream deletion mutants of Gy2 were prepared and fused to the ${\alpha}$-glucuronidase (GUS) gene. Each chimeric construct was transferred into soybean protoplasts for transient assay, which led to the identification of the sequences between -281 and -223, -170 and -122, of Gy2 promoter as negative regulatory elements, and the sequences between -223 and -170, -122 and -16 as positive regulatory elements. These results are consistent in transformed tobacco plants as well. The serially deleted promoter fragments fused to the GUS were transformed into Nicotiana tabacum by Agrobacterium tumefaciens using the binary vector system. GUS activity of Gy2 promoter deletion constructs was detected only in seeds but not in leaves with different levels of expression as in transient assay. These results suggest that the glycinin Gy2 promoter drives a tissue-specific expression in transgenic tobacco plants.
It failed occasionally to take a reasonable emergence rate since tobacco (Nicotiana tabacum L.) seeds were planted on late Jan. showing lowest temperature. This experiment was done to measure the effect of GA3 (concentration ; period) , light quality (red ; white ; dark) during or after its treatment, daily irradiation hours( 0 ; 8 ; 12 ;16) and germination termperature (20 or 10 $^{\circ}C$ ocnstant ; 20/1$0^{\circ}C$ alternating) on the germination rate. Red and white light given during grmination showed no differences between the other daily irradiation hours except that 8 hours red light delayed germination although their 12 hours irradiation had the gratest rate. The rate was increased with increased concentration to GA3 0.01 mM or increased imbibition period to 3 days although the rate of cv. NC 82 was less than that of cv. Burley 21 in the case of dark imbibition of GA3 but daily 12 hours irradiation during germination. Light quality forced during GA3 imbibition eliminated such effect of GA3 shown in the darkness so that only light quality pretreatment and termperature during germinition were affected on the rate. The germination rate of thecultivars was decreased in the order of red, white light, darkness meaning that it was highly influenced by the light quality during GA3 treatment. Regardless of GA3 or light quality treatment,on the other hand, the rate was greater in 20 $^{\circ}C$ constat than 1$0^{\circ}C$ constant and 20/1$0^{\circ}C$ alternating germination temperature having similar germinative patterns.
The present researches were carried out to classify the species of ginseng by electrophoretic methods with isozyme patterns of LAP. esterase, GOT, phosphatase, peroxidase and proteins. All variants of Korean and Japanese ginseng had identical band patterns of the investigated enzymes in roots as well as in seeds. However, American ginseng had different patterns from those of Korean or Japanese.
To get the basic information about ginseng seedling production, yields of ginseng seedling and soil physico-chemical components in 32 fields of Yang-Jik and 19 fields of Ban-Yang-Jik nursery were investigated. Germination rate is $78.5{\pm}3.0%$, $77.8{\pm}2.8%$ in Yang-Jik and Ban-Yang-Jik. Rate of number of mature seedlings to number of seeds planted is $62{\pm}13.5%$, $53{\pm}12.6%$ in Yang-Jik and Ban-Yang-Jik. Rate of number of available seedlings to number of seeds planted (Rate of available seedling) is $42{\pm}12.5%$, $26{\pm}12.1%$ in Yang-Jik and Ban-Yang-Jik. The number of available seedlings per Kan (Kan means $180{\times}90cm$ area) is $627{\pm}187$, $368{\pm}182$ in Yang-Jik and Ban-Yang-Jik. Rate of number of unusable seedlings to number of mature seedlings is 34%, 51% in Yang-Jik and Ban-Yang-Jik. It showed the negative correlation between amount of coarse sand and stem height, and central leaf length, on the other hand, possitive correlation between amount of extremely fine sand, and stem height, and central leaf length respectively. Rate of available seedling was positively correlated with amount of medium, fine and extremely fine sand, whereas negatively correlated with amount of coarse sand in Yang-Jik. Root weight per seedling was positively correlated with amount of medium, fine and extremely fine sand. Contents of organic matter, available phosphate and potassium in Ban-Yang-Jik were higher than those of Yang-Jik, but content of lime was higher in Yang-Jik compared to that of Ban-Yang-Jik. Possitive correlations were showed between leaf area per seedling and content of organic matter, and between stem height and content of lime in Yang-Jik. Root weight per seedling was positively correlated with content of organic matter and magnesium in Ban-Yang-Jik, but there is no correlation between any of soil chemical components and root weight in Yang-Jik.
This study was conducted to investigate the utility and agronomic characteristics and use of cytoplasmic. male-sterile (CMS) haploid plants derived from interspecific cross between (male-sterile NC82$\times$burley21) F$_1$ plant (Nicotiana tabacum L.) and Nicotiana africana. Abundant seeds of high germinability were obtained when Nicotiana tabacum (cytoplasmic male-sterile F$_1$ plants) is pollinated by Nicotiana africana. Most of seedlings died at the cotyledonary stage. The remaining seedlings are viable F$_1$ hybrids or maternal haploids that can be easily distinguished. Number of interspecific Fl hybrids and matermal haploids per capsule obtained from the interspecific cross between cytoplasmic male-sterile tobacco F$_1$ plants and N.africana yielded 2.2 and 0.5 plants, respectively. Out of 149 CMS haploid plants obtained from interspecific cross, 102 plants showed green type while the others were yellow type for leaf and stem. This results agreed with the genetic ratios expected among haploid plants from the F$_1$ hybrids heterozygous for two recessive genes of yellow color of burley tobacco plant. Out of 83 CMS haploid plants inoculated with TMV, 48 plants showed resistant, while the others was susceptible. It agreed with the expected genetic ratios for a single dominant gene of TMV resistance. CMS haploid plant will be useful as a source material for breeding of CMS doubled haploid lines
Water content and its seasonal change in reprodltctive organs were reviewed in relation to cultivation practice s. Precipitati on and humidity under shade roof were reviewed in relation to shading ,jystem and environmental factors. High water content of reproductive organs suggests vulnerability to water stress during reproductive growth stage. Watering during dehisconce treat menu seems to keep optimum temperature but cnoventional practice seems to be too often In watering. Information effe on water physiology of seeds is too rare to develop seed storing method and ctive seed use. Dehiscent mechanism was considered in terms of water absorption of embryo. Precipitation rate of conventional shade roof reaclled to 38% and at line level 50% and varied with shade patterns. Precipitation rate under shade has been investigated for itself but should be investigated in relation to light intensity and soil moisture content Relative humidity under shade depends mainly on air humidity and soil moisture, considerably on shade materials and lithe on pole height, bed width or plant density. Since relative humidity was lower in afternoon it was often less than 50% even in summer with high temperature suggesting possible disorder of phi biological function especially in photosynthesis. More information was needed on optimum humidity for productive physiological function of leaf.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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