Marine fungus, Thraustochytrium aureum ATCC 34034, was incubated in artificial sea water media in order to produce docosahexaenoic acid(DHA). Cultures were performed at $24^{\circ}C$ in light for 3 days with orbital shaker at 200rpm. Maximum cell productivity of 1.34g/L and DHA yield of 41.4 mg/L were obtained by using this method, which is almost the twice level of DHA yield obtained for the strains reported previously. This strain did not produce DHA in YM media and YPG media. The results indicate that salinity influenced cell growth and production of DHA.
It has been known that Δ-desaturase (TAD5) in the biosynthetic pathway of long chain polyunsaturated fatty acids of Thraustochytrium aureumis responsible for the conversion of di-homo-${\gamma}$-linolenic acid (C20:4) into arachidonic acid (C20:4). The genetic sequence analysis on TAD5 of Thraustochytrium aureum ATCC34304 used in this study showed that it has two amino acid changes when compared to that of Thraustochytrium aureum TAD5 first reported in 2003. Accordingly, Thraustochytrium aureum ATCC34304 TAD5 was named TAD5_1. TAD5_1-inserted methylotropic Pichia pastoris was prepared and then cultured with a precursor fatty acid, di-homo-${\gamma}$-linolenic acid. GC analysis confirmed that a certain amount of the precursor fatty acid was converted into arachidonic acid. In this study, not only a recombinant Pichia pastoris with the typical activity of ${\Delta}5$-desaturase which plays an essential role in the biosynthesis of LCPUFAs was successfully made but also the preparationpotential of a recombinant Pichia pastoris strain which may synthesize eicosapentaenoic acid (EPA) and docosahexaenoic acid (DHA) that are important in maintaining and improving human's brain function was proposed.
The heterotrophic marine algae Thraustochytrium aureum ATCC 34304 produces substantial amount of polyunsaturated fatty acids (PUFAs), especially docosahexaenoic acid (DHA). In this study, changes in the lipid and fatty acid compositions of Thraustochytrium aureum ATCC 34304 were investigated according to the growth stage. The major lipids of Thraustochytrium aureum ATCC 34304 were found to be composed of triacylglyceride (TAG), phospholipid (PL), and sterol (ST). The content of triacylglyceride increased during the exponential phase of cell growth, but the content of phospholipid decreased. The composition of total polyunsaturated fatty acids decreased from 60.3% to 45.3% and that of docosahexaenoic acid from 42.1% to 33.9% in the triacylglyceride. The composition of total saturated fatty acids, however, increased from 24.9% to 27.8%. The content of total polyunsaturated fatty acids decreased greatly from 48.0% to 17.5% but the decrease in the content of saturated fatty acids was slight in phospholipid.
Hur Byung-Ki;Cho Dae-Won;Kim Ho-Jung;Park Chun-Ik;Suh Hyung-Joon
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.7
no.1
/
pp.10-15
/
2002
Environmental and medium factors were investigated as basic data for optimizing DHA production when using Thraustochytrium aureum. To study the effect of environmental conditions, the rotation speed and culture temperature were changed. Plus the trend of the growth characteristics, lipid content in the biomass, and DHA content in lipids were evaluated according to various initial glucose concentrations. The biomass, lipid, and DHA analyses showed that the physiological characteristics of T. aureum were closely related with the environmental and medium conditions, as in the case of other marine microorganisms. For example, a low rotation speed of 50 rpm lowered the cell growth rate as well as the DHA content in the lipids. A low temperature had a negative effect on the cell growth, yet a positive effect on the lipid content in the biomass. Different initial glucose concentrations had no effect on the lipid content in the biomass or DHA content in the lipids, yet did affect the cell growth. Accordingly, these results show that environmental and medium factors must be synthetically considered in order to optimize DHA production when using T. aureum.
Park, Gyeong-Won;Park, Cheon-Ik;Jo, Dae-Won;Heo, Byeong-Gi
한국생물공학회:학술대회논문집
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2000.11a
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pp.273-276
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2000
Marine fungus, Thraustochytrium aureum ATCC 34034, was incubated in artificial sea water media in order to produce docosahexaenoic acid(DHA). Cultures were performed at $24^{\circ}C$ in light for 13 days with orbital shaker at 100rpm. Maximum cell productivity of 1.34g/L and DHA yield of 41.4 mg/L were obtained by using this method, which is almost the twice level of DHA yield obtained for the strains reported previously. This strain did produce much more DHA after sporangium disruption.
The effects of initial sugar concentration and the various nitrogen sources on the fermentation characteristics of Thraustochytrium aureum were investigated. The sugar conversion ratios decrease with increase in the initial sugar concentration regardless of the kinds of nitrogen sources. The specific growth rate, the biomass yield, and the DHA yield also decreased but approached constant values higher than the concentration of 30g/L. The sugar conversion ratios and the specific growth rate showed the highest values in case of using the yeast extract as nitrogen source. It was difficult to conclude that the variation of nitrogen source had some effects on the biomass yield. However, the initial sugar concentration had a rather effects on the biomass yield for the sugar concentration of 40 g/L showed 0.27. The nitrogen source that showed the greatest yield of DHA was sodium glutamate.
Kim Won-Ho;Park Seung-Hye;Song Sang-Kyu;Bae Kyung-Dong;Hur Byung-Ki
KSBB Journal
/
v.20
no.4
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pp.266-270
/
2005
The effect of the weight ratio of carbon source to nitrogen source on the growth and the composition change of fatty acids of Thraustochytrium aureum ATCC 34304 was investigated. The cell concentration of 5 days' culture increased and then decreased according to the increase of C/N, The ratioes for the maximum biomass were unique respectively and distributed between 1 and 4 with the initial sugar concentration in the range of 5 g/L to 25 g/L. The biomass yield, $Y_{x/s}$ decreased along with the increase of C/N, but maintained a constant value 0.35 between 10 and 20. The composition of myristic acid $(C_{14:0})$, one component of the lipid synthesized by T. aureum, was not affected with the change of C/N, but the composition of palmitic acid $(C_{16:0})$ was around $20\%$ below 4 of C/N and decreased to $15\%$ according to C/N about 4. The compositions of oleic acid $(C_{18:1})$ and linoleic acid $(C_{18:2})$ increased from 0 to $20\%\;and\;7\%$ respectively. The composition of $\gamma-linoleic$ acid $(C_{18:3})$, however, reduced from $5\%\;to\;2\%$. EPA $(C_{20:5})$ and DPA $(C_{22:5})$ showed a tendency of reduction in the weight composition according to the increase of C/N, but DHA $(C_{22:6})$ had a trend maintaining an approximately constant value, around $40\%$, irrespective of the change of C/N.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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