• Biomolecules & Therapeutics
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• 제20권6호
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• pp.562-568
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• 2012

Cytochrome P450 BM3 (CYP102A1) from Bacillus megaterium is a self-sufficient monooxygenase that consists of a heme domain and FAD/FMN-containing reductase domain (BMR). In this report, the reduction of 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) and 5-cyano-2,3-ditolyl tetrazolium chloride (CTC) by BMR was evaluated as a method for monitoring BMR activity. The electron transfer proceeds from NADPH to BMR and then to BMR substrates, MTT and CTC. MTT and CTC are monotetrazolium salts that form formazans upon reduction. The reduction of MTT and CTC followed classical Michaelis-Menten kinetics ($k_{cat}=4120\;min^{-1}$, $K_m=77{\mu}M$ for MTT and $k_{cat}=6580\;min^{-1}$, $K_m=51{\mu}M$ for CTC). Our continuous assay using MTT and CTC allows the simple, rapid measurement of BMR activity. The BMR was able to metabolize mitomycin C and doxorubicin, which are anticancer drug substrates for CPR, producing the same metabolites as those produced by CPR. Moreover, the BMR was able to interact with CYP1A2 and transfer electrons to promote the oxidation reactions of substrates by CYP1A2 and CYP2E1 in humans. The results of this study suggest the possibility of the utilization of BMR as a surrogate for mammalian CPR.

• 한국작물학회지
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• 제59권2호
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• pp.188-193
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• 2014

Seed viability testing provides valuable information for assessing seed lot germinability. However, most testing methods require destruction of seed prior to test. Because the dissected seeds for viability test cannot be used further evaluation, the nondestructively X-ray photography technique that can be applied for the evaluation of seed quality has been developed. In order to know the validity and accuracy of X-ray photography technique in seed evaluation test that conducted to remove the abnormal seed from a seed lot, we have compared the results from tetrazolium viability test, germination test and X-ray contrast method in cotton. Metallic salts treatment increased the efficiency of X-ray photographic method by enhancing the penetration of X-ray in abnormal or damaged seeds rather than normal seeds that have strong and well-organized tissues in seed. Cotton seeds presoaked for 16 hr in distilled water followed by soaking into metallic salt solution (5% NaI in water) for 60 min were easily classified seeds into dead seed and viable seed based on the radiography images obtained by X-ray radiation. We concluded that soft X-ray photography was reliable to find out the various defective characters due to heat and mechanical damage of seeds.

• 한국군사과학기술학회지
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• 제25권3호
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• pp.285-291
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• 2022

In order to use the liquid rocket fuel, 1,5-diamino-4-methyltetrazolium azide, [DMT]⁺[N₃]^- and 1,5-diamino-4-methyltetrazolium cyanide, [DMT]⁺[CN]^- were synthesized and prepared the ionic liquid rocket fuel after dissolving the synthesized solid-type energetic chemicals in hydrazine, respectively. The thermal decomposition temperatures(T_d) and densities(d) of the prepared ionic liquid rocket fuels were about 200 ℃ and above 1.0 g/cm³ respectively. The ignition delay times(I_dt) of the ionic liqud rock fuels with [DMT]⁺[N₃]^- and [DMT]⁺[CN]^- were in a range of 26.6 - 82.5 ms and the 44.0 - 98.5 ms, respectively. These results mean that the synthesized tetrazolium salts could be used as an ionic liquid rocket fuels. The viscosities of the ionic liqud rock fuels with [DMT]⁺[N₃]^- and [DMT]⁺[CN]^-, which were dissolved in mixture solution of hydrazine/2-hydroxyethylhydrazine were to be 1.34 - 101 cP, and 1.29 - 80.5 cP, respectively. The synthesized ionic liquid rocket fuels in this study could be used as rocket fuel because the [I_dt(100 ms or less), T_d(150 ℃ or more), d(1.00 g/cm³ or more), and η(40.0~ 100 cP)] were achieved to satisfy the range of the used liquid rocket fuels.

• 치위생과학회지
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• 제14권2호
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• pp.101-106
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• 2014

본 연구는 저 출력 초음파 장치를 이용하여 osteoblastlike MG-63 세포에 1 MHz, 3 Mz 강도의 초음파 처리 후 조골세포의 변화를 관찰하였다. 3 MHz 강도의 주파수를 osteoblast-like MG-63 세포에 처리한 결과 7일 후 성장률이 대조군보다 증가하였다. 저 출력 초음파가 골의 치유에 영향을 미치는 인자를 확인하였을 때 ALP, osteocalcin, VEGF, colla 1A1의 증가를 확인하였으며, 1 MHz 주파수 처리시 integrin alpha 2의 발현이 대조군과 유사하게 발현되는 것을 확인하였다. 반면에, osteonectin, osteopontin, fibronectin, MMP 2 등은 변화가 없음을 확인하였다. 그러므로 본 연구는 저 출력 초음파 장치는 뼈 치유 촉진 단백질들의 발현을 증가시켜 구강 내 외과적 수술 시 골 치유 촉진 효과에 대한 가능성을 제시하였으며 임상에서 골 치유 촉진을 위한 장비로서의 사용 가능성을 제시하였다고 생각된다.

• Radiation Oncology Journal
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• 제19권2호
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• pp.163-170
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• 2001

목적 : 방사선조사후 세포의 생존 분획은 세포집락 측정기법으로 확인하는 것이 표준이나 많은 비용과 시간이 소요되는 단점을 갖고 있다. 이에 생존 세포의 tetrazolium염의 자색 formazan 침전물로의 환원시키는 능력에 그 기반을 둔 MTT 기법을 사용하여 세포집락 측정기법을 대체하기 위한 기법으로서의 유용성과 그 실행상의 최적조건을 규명하고자 하였다. 방법 : PCI-1, SNU-1066, NCI-H630, RKO등의 세포주에 0, 2, 4, 6, 8, 10 Gy의 방사선을 조사한 후 세포집락 측정 기법과 MTT기법으로 세포 생존 분획을 조사하였다. 세포집락 측정기법은 $25\;cm^2$ 폴리스티렌 배양 플라스크에 방사선량에 따라 다른 수의 세포를 분주한 후 24시간 동안 배양 후 방사선을 조사하였고 이를 $10\~14$일 동안 배양 후 염색하여 생성된 세포집락의 수를 측정하였다. MTT기법은 침전물의 용해과정이 필요없는 Premix WST-1 시약을 이용하여 시행하였다. MTT기법은 각각의 세포주에서 세포수와 흡광도간의 선형관계와 최적 실험조건을 확인한 이후 시행하였다. 이 기법은 방사선을 조사받은 세포에서는 지수적 성장을 회복한 이후와 방사선을 조사받지 않은 세포는 4회 이상의 세포분열을 거친 후에 시행하였다. 세포집락 측정기법 및 MTT기법을 통하여 얻은 세포 생존율을 구한 후 이를 지표로 비교하였다. 결과 : 각 기법으로 얻은 세포 생존율의 표준편차는 $5\%$ 내외였다. 2가지 방법으로 구한 세포 생존율은 t-test로 비교하였을 때 $0\~4\;Gy$에서는 통계적으로 유의한 차이가 없었으며 회귀분석 결과는 선형적 관계가 있었다$(R^2=0.975-0.992)$. MTT 기법의 시행에 최적인 세포수는 배양효율에 따라 다른 것으로 나타났는데, 배양효율이 $30\%$ 이상이면 300개 이하가, $30\%$ 미만인 경우는 $500\~1,000$개가 적당한 것으로 확인되었다. MTT기법은 6 배가시간 경과 이후에 시행하는 것이 세포집락 측정기법과 가장 근접하였으며 적어도 4 배가시간 이후에 시행하는 것이 필요할 것으로 사료되었다. 이에 따르면 배가시간이 3일 이하인 세포주가 세포 민감성 측정방법으로서 MTT 기법이 세포 집락 측정 기법을 대체하여 사용하기에 적합한 것으로 사료되었다. 결론 : 이상에서, MTT기법을 이용하여 방사선조사 후의 세포생존을 측정하기 위해서는 예비실험을 통해 각 세포주에서의 최적의 조건을 찾는 것이 필수적이며 이 조건하에서 MTT기법을 시행해야만 방사선에 의한 세포 민감성 측정에 이용될 수 있음을 확인하였다.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제53권6호
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• pp.583-595
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• 2020

본 연구에서는 괭생이 모자반 추출물의 소포체 스트레스 억제 효능을 연구하기 위하여 HepG2 간세포에 PA를 처리하여 소포체 스트레스를 유발한 후 추출물을 처리하여 UPR 관련 인자 발현 정도를 측정하였다. PA 750 μM 처리 시 UPR 관련 인자 (p-IRE1α, p-eIF2α, CHOP)의 단백질 발현이 가장 높게 나타나 소포체 스트레스를 효과적으로 유도함을 확인하였고 PA 750 μM를 12시간 처리 시 UPR 관련 인자 (p-IRE1α, p-eIF2α, CHOP)의 단백질 발현이 가장 높음을 확인하였다. 괭생이 모자반 처리 시 PA에 의해 상향 조절된 UPR 관련 인자의 mRNA 및 단백질 발현이 감소하여 PA로 유도된 소포체 스트레스에 대한 억제 효능이 있음을 보여주었다. 또한, 괭생이 모자반은 SIRT2, SIRT6 및 SIRT7의 mRNA의 발현을 증가시킴으로써 괭생이 모자반의 소포체 스트레스 억제 효능이 SIRT에 의한 것으로 확인되었다. 이러한 결과는 괭생이 모자반이 다양한 소포체 스트레스 관련 질병의 예방과 치료에 활용가능성이 있음을 시사한다.