Object : This study was earned out to examine the effect of Bupleuri Radix on experimental cholestasis, and make clear a part of this mechanism. Methods : Two models of common bile duct ligation group and taurocholate load group after common bile duct ligation were induced, and Bupleuri Radix extract was taken orally for 14 days. In the 1, 2, 4, 7 and l4days after treatment, cytosolic, mitochondrial and microsomal catechol-O-methyltransferase(COMT) activities in liver were measured. Results : The activities of cytosolic, mitochondrial and microsomal COMT increased in the Blupleuri Radix treated group after common bile duct ligation and after taurocholate load and common bile duct ligation. The activities of cytosolic and mitochondrial COMT increased particularly in Blupleuri Radix treated group after taurocholate load and common bile duct ligation. Conclusions : According to the result, it is considered that Blupleuri Radix not only improves cholestatis in liver, but also decreases a genetic synthesis of taurocholic acid.
The effect of butylated hydroxytoluene (BHT) and its major metabolite, 3, 5-di-tert-butyl-4-hydroxybenzoic acid (BHT-acid) on the uptake of taurocholate into hepatocytes was studied using the primary culture of rat hepatocytes. Hepatocyte were isolated by an in situ collagenase perfusion technique and maintained as a monolayer in serum-free meadia for 24 hours before use. The uptake of taurocholate was saturable with an apparent Km of 12.8+2.8 MuM and Vmax of 0.18+0.01 nmol/mg/min. Both BHT and BHT-acid inhibited the hepatocellular uptake of taurocholate when they were added to the culture.
Object : This study was carried out to examine the effect of Bupleuri Radix on experimental cholestasis, and make clear apart of this mechanism. Methods : Two models of common bile duct ligation group and taurocholate load group after common bile duct ligation were induced, and Bupleuri Radix extract was taken orally for 14 days. In the 1, 2, 4, 7 and 14 days after treatment, the mitochondrial and microsomal monoamine oxidase(MAO) A and B activities in liver were measured. Results : The mitochondrial MAO A and B activities increased in both Blupleuri Radix treated group after common bile duct ligation and Blupleuri Radix treated group after taurocholate load and common bile duct ligation. MAO A increased in Blupleuri Radix treated group after taurocholate load and common bile duct ligation, and MAO B increased in Blupleuri Radix treated group after common bile duct ligation. The microsomal MAO A activities increased in both Blupleuri Radix treated group after common bile duct ligation and Blupleuri Radix treated group after taurocholate load and common bile duct ligation. Conclusion : According to the result, it is consider that Blupleuri Radix not only improves cholestatis in liver, but also decreases a genetic synthesis of taurocholic acid.
To investigate bile salt hydrolase activities of the bacterial strains isolated from fermented milk products, 21 strains of Lactobacillus were tested for their abilities to produced cholic acid from taurocholic and glycocholic acids. The production of cholic acid was measured by HPLC analysis during the growth in broth media for 24hrs. All strains of Lactobacillus acidophilus and L. plantarum deconjugated both taurocholate and glycocholate, whereas none strains of L. delbrueckii subsp. bulgaricus, L. casei subsp. casei, L. casei subsp. rhamnosus, L, reuteri did. L. acidophilus stains isolated from yogurts had the higher decojugation activities on glycocholate than taurocholate, however, L. acidophilus 1009 isolated from the human intestine showed the similar deconjugation activities on both taurocholate and glycocholate.
The issue of whether or not the presence NOx (NO and oxidized metabolites) in the hepatocytes at pathological levels affects the functional activity of transport systems within the sinusoidal membrane was investigated. For this purpose, the effect of the pretreatment of isolated hepatocytes with sodium nitroprusside (SNP), a spontaneous NO donor, on the sinusoidal uptake of tributylmethylammonium (TBuMA) and triethylmethyl ammonium (TEMA), representative substrates of the organic cation transporter (OCT), and taurocholate, a representative substrate of the $Na^+$/taurocholate cotransporting polypeptide (NTCP), was measured. The uptake of TBuMA and TEMA was not affected by the pretreatment, as demonstrated by the nearly identical kinetic parameters for the uptake ($i.e., V_{max}, K_{m} and CL_{linear}$). The uptake of mannitol into hepatocytes was not affected, demonstrating that the membrane integrity remained constant, irregardless of the SNP prutreatment. On the contrary, the uptake of taurocholate was significantly inhibited by the pretreatment, resulting in a significant decrease in V_{max}$, thus providing a clear demonstration that NOx preferentially affects the function of NTCP rather than OCT on the sinusoidal membrane. A direct interaction between NOx and NTCP or a decrease in $Na^+/K^+$ ATPase activity as the result of SNP pretreatment might be responsible for this selective effect of NOx.
다수계 품종인 남풍, 밀양 23호와 일반계 품종인 화성, 진홍을 현미, 백미 그리고 겨로 구분한 12가지 시료에 대하며 불용성 식이섬유와 용해성 식이섬유로 구분하여 측정하였고 이를 합하여 총 식이섬유로 하였다. 한편 남풍, 밀양 23호, 화성 그러고 진흥 현미를 정백률 92%로 도정하는 과정에서 얻어진 겨로부터 neutral detergent fiber(NDF)를 분리하였다. 이 식이섬유의 특성을 측정하고자 수분 결합력(water-binding capacity, WBC), pH 변화에 따른 철분과의 결함정도. 담즙염과의 결합 정도를 측정 하였다. 이상의 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 현미, 백미 그리고 겨의 총 식이섬유 함량은 각각 6.44%, 3.22%그리고 22.24%였으며, 현미는 백미에 비해 2배 정도의 식이섬유를 공급할 수 있다. 2. Neutral detergent fiber(NDF)의 특성 실험에서 수분 결합력 (WBC)은 평균 $5.60{\pm}0.87g\;H_2O/g$ NDF로 수분 결합력이 커서 장관에서 물이나 작은 분자들을 흡수하여 팽창하며 궁극적으로 bulk flow에 영향을 미치게 된다. 3. 철분과의 결합력은 pH 5.0에서는 평균 24.63%, pH 6.0에서 19.64%, pH 7.0에서 48.98%로 pH에 따른 결합정도의 차이가 켰으며, 이러한 성질로 인해서 무기질의 흡수를 저해하므로 음식물 증에 식이섬유 함량이 높을 때 무기질의 흡수문제를 고려하여야 한다. 4. 식이섬유와 담즙염과의 결합정도는 $100{\mu}M$ sodium taurocholate의 농도에서 평균 $31.02{\pm}2.15%$가 결합 되었다. 식이성유의 이러한 기능으로 콜레스테롤의 재 흡수와 배설에 영향을 미쳐 혈장 콜레스테롤 농도를 낮추는 효과가 있는 것으로 추정된다. 의한 보호효과를 보면 전분과 자당을 동시첨가한 자당첨가동시보호구가 무보호 갈변경우에 비하여 20.5%정도 증가하였다. Fructosyl-lysine의 함량은 전분 첨가에 관계없이 갈변에 의하여 10배 이상 증가하였고 전분 첨가에 의한 보호효과를 보면 보호 방법에 관계없이 보호구가 무보호 갈변구에 비하여 $12.6{\sim}15.8%$ 정도 감소하였다. 진공포장함으로서 저장중 지질산패, 갈변 등 품질저하를 억제시킬 수 있었다.>가 20mM, $Na_2SO_3{\cdot}7H_2O$가 15mM 그리고 $NaHSO_3$가 25mM로 나타났다., 수원(水原)19호(號)와 제천옥(堤川玉)에서는 linoleic acid가 가장 높게 나타났다. 8) 당지질(糖脂質)의 구성지질성분(構成脂質成分)은 MGS, MGC 그리고 MGDG를 함유(含有)하며, MGS와 MGC는 진주옥(晋州玉)에서 가장 높은 반면에, 횡성옥(橫城玉)과 제천옥(堤川玉)에서는 가장 낮게 나타났다. 9) 총지질(脂質)의 지방산조성(脂肪酸組成)은 oleic, palmitic, linoleic그리고 heptadecanoic acid가 주성분(主成分)을이루고, 진주옥(晋州玉)에서 oleic acid가 가장 높은 반면에 heptadecanoic acid는 가장 낮게 나타났고, 제천옥(堤川玉)에서는 이와 반대(反對) 경향(傾向)을 보였다. 10) 순지질(燐脂質)의 구성지질성분(構成脂質成分)은 PI 및 PC를 함유(舍有)하며, 횡성옥(橫城玉)과 황옥(黃玉) 3호(號)에서 PI가 가장 낮게 나타났다. 11) 순지질(燐脂質)의 지방산조성(脂肪酸組成)은 palmitic, heptadecanoic 그리고 oleic acid가 주성분(主成分)을 이루고, 횡성옥(橫城玉)에서 oleic acid가 가장 높은 반면에, heptadecanoic acid는 가장 낮게
숙성된 갓김치에서 분리된 유산균을 pH 2.5에서 2시간 반응시킨 후 0.3% oxgall 존재 하에서 3시간 배양시킨 결과 MLK11, MLK22, MLK27, MLK41 및 MLK67 균주들은 $10^5$ CFU/ml 이상의 균수를 유지하여 높은 저항성을 보인 반면, MLK53 균주는 대부분의 균수가 사멸되어 매우 민감한 것으로 나타났다. 담즙산에 대한 내성이 강한 균주들 대부분은 복합 담즙산의 탈포합능이 있었으며, MLK22와 MLK67 균주는 sodium glycocholate로부터 3.5 mM 이상의 cholic acid을 유리시켜 가장 높은 탈포합능을 보인 반면, MLK13과 MLK41은 각각 1.35와 1.16 mM 정도 낮은 양의 cholic acid를 유리시켰다. 특히, MLK22와 MLK67의 탈포합능은 sodium taurocholate 혹은 포합담즙산 혼합물 보다는 sodium glycoholate 존재 하에서 더 높게 나타났다. 게다가 sodium glycocholate와 sodium taurocholate으로부터 MLK22와 MLK67이 생산하는 bile salt hydrolase (BSH)의 활성은 정지기 초기에 최대를 이르렀고 MLK67 보다는 MLK22의 BSH 활성이 다소 높았다. 한편, 실험 균주들의 콜레스테롤 제거능은 5.22-39.16 ${\mu}g$/ml로 균주별 유의적인 차이가 있었으며(p<0.05), 그 중에서 MLK67 균주는 0.3% oxgall, cholic acid 및 taurocholic acid로부터 가장 높은 콜레스테롤 동화능을 나타내었다. 따라서 실험 균주 중 높은 내산성과 내담즙성을 가지며, 담즙산 탈포합능 및 콜레스테롤 동화능이 유의하게 높은 MLK67 균주는 probiotic 균주로서의 가능성이 있는 것으로 간주되어 이를 생화학적 특성과 당분해능 및 염기서열 분석에 의해 동정한 결과 Pediococcus pentosaceus MLK67로 확인되었다.
That different mechanisms are involved in the secretory processes by the liver and the kidney of various dyes has been indicated by Sporter (1959), Kim and Hong (1963). Andrews (1958). suggested that a striking difference in the dye-secretory mechanism existed even in the same organ from species to species. Hence, the attempt has been made to study in the rabbit the secretory processes by the live. and the kidney of either phenol red (PSP), bromsulfalein (BSP) or green in the presence of Na-acetate, Na-taurocholate, P-Aminohippurate (PAH) or Benemid. In 37 rabbits, weighing about 2kg., anesthetized with ether, a dye was administered in such 8 manner that the plasma concentration was kept at a relatively constant level throughout the whole experimental period. Hepatic bile sad urine samples were quantitatively collected through the canulae which were previously inserted into the common bile duct (with the cystic duct ligated) and the urinary bladder, respectively, while arterial samples were taken from a femoral artery. After 50 min from the onset of dye administration, these samples were obtained every 10 mit for a period of 40 min. This was followed by the administration of either Na-acetate, Na-tauro-cholate, PAH or Benemid with a repetition of the same sample collecting procedures just stated. The results may be summarized as follows: 1) Na·acetate augmented urinary clearance of PSP by nearly 300 per cent, but lowered urinary BSP clearance by about 50 per cent. It enhanced biliary BSP clearance by 40% and had no effect on biliary psp clearance. 2) Na-taurocholate lowered biliary and urinary clearance of PSP by 10 per cent and 30 per cent respectively, and had no effect on both biliary and urinary clearance of BSP. 3) PAH lowered both biliary and urinary excretion of BSP and PSP, while it lowered the biliary excretion of indocyanine green which was excreted only in the bile. 4) Benemid suppressed BSP excretion by the liver and the kidney. 5) raper chromatographic analysis of PSP and of BSP in the bile and urine samples gave the following results: a) PSP Ivas excreted in the urine and bile only in free forms, and no modification in the excretory pattern was brought about by Na-taurocholate. b) BSP was excreted in the urine in 4 different conjugated froms and in the bile in both 3 different conjugated forms and in a free form. Na-taurocholate modified the excretory pattern of the urinary BSP.
Canalicular liver plasma membrane vesicles (cLPM) were prepared according to two different methods (Inoue method and Meier method), and were evaluated for their protein yield, enzyme activity and transport characteristics. No difference was found between the methods in the protein yield (i.e., $0.14{\pm}0.031$ and $0.15{\pm}0.050$ mglg liver for Inoue method and Meier method, respectively). The activity of alkaline phosphatase, a marker enzyme of canalicular membrane, was significantly (P<0.05) higher in the vesicles of Meier method $(3.52{\pm}0.91\;mmol/mg/hr)$than in the vesicles of Inoue method ($2.28{\pm}0.94$ mmol/mg/hr) indicating that more purified cLPM were obtained from Meier method compared with Inoue method. ATP-dependent vesicular uptake of taurocholate and tributylmethylammonium (TBuMA) was observed for vesicles of both methods, and the kinetic parameters responsible for the transport were similar between the vesicles of both methods (for example, $V_{max}:$ 9.72 nmol/mg protein/30sec and $K_m:$ 0.63 mM for Inoue method; $V_{max}:$ 10.1 nmol/mg protein/30sec and $K_m:$ 0.70 mM for Meier method). A pH gradient dependent counter transport of TBuMA was also observed for both vesicles with similar kinetic characteristics. Either the uptake of taurocholate in the absence of ATP or that of TBuMA in the absence of pH gradient, which may represent passive diffusion of respective compound into the vesicles, was more rapid for the vesicles of Meier method than for the vesicles of Inoue method. For example, passive diffusion rate constants $(K_d)$ for TBuMA uptake into the vesicles were 0.00030 and 0.00052\;{\mu}l/mg$ protein/min for the vesicles of Inoue method and Meier method, respectively. It may indicate that more leaky vesicles are obtained form the Meier method compared with the Inoue method. These aspects together with the time necessary to prepare the vesicles (i.e., 8 hr for Inoue method and 23 hr for Meier method) should be considered before selecting an appropriate method for the preparation of cLPM.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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