본 연구에서는 CRISPR/CAS9을 이용하여 S. cerevisiae의 ACC1, ELO1, OLE1 유전자의 프로모터를 TEF1으로 교체하여 그 발현량을 증가시키고 그에 따른 에탄올에 대한 저항성과 생산량 변화를 확인하였다. 18% 에탄올이 함유된 YPD 배지에서 control을 제외하고 유전자 과발현을 일으킨 mutant 균주 모두가 24시간까지 viable하게 생존하는 것을 확인하였다. 에탄올 발효에서는 유전자 과발현 균주 모두가 에탄올 수율에서 ACC1 과발현 균주가 428.18 ± 0.29 mg/g, ELO1 과발현 균주는 416.15 ± 4.3 mg/g, OLE1 과발현 균주는 430.55 ± 6.00 mg/g에 도달하였으며, 이는 control의 수율인 400.26 ± 0.42 mg/g 보다 높은 수준에 도달하였다. 이 결과는 높은 농도의 에탄올에서 탄소 사슬이 긴 불포화지방산의 비율이 증가한다는 연구결과가 역 또한 성립한다는 것을 증명하였다. ELO1의 과발현은 elongation of fatty acid protein의 생산 증가를 불러 일으킨다. 또한 OLE1도 acylCoA desaturase 효소의 활성을 증대시킨다. TEF1이라는 strong promoter를 이용한 이번 실험에서 ELO1 과발현 균주가 OLE1 과발현 균주보다 S. cerevisiae의 에탄올 저해 감소와 발효에 긍정적인 영향을 미침을 확인하였다.
Purpose: In dental clinical fields, various periodontal membranes are currently used for periodontal regeneration. The periodontal membranes are categorized into two basic types: resorbable and non-resorbable. According to the case, clinician select which membrane is used. Comparing different membranes that are generally used in clinic is meaningful. For this purpose, this study evaluates histological effects of various membranes in canine one wall intrabony defect models and it suggest a valuation basis about study model. Material and Method: The membranes were non-resorbable TefGen $Plus^{(R)}$, resorbable Gore Resolut $XT^{(R)}$ and resorbable $Osteoguide^{(R)}$. One wall intrabony defects were surgically created at the second and the mesial aspect of the fourth mandibular premolars in either right or left jaw quadrants in two dogs. The animals were euthanized 8 weeks post-surgery when block sections of the defect sites were collected and prepared for histological evaluation. Results: 1. While infiltration of inflammatory cells were observed in control, TefGen $Plus^{(R)}$ and Gore Resolut $XT^{(R)}$, it was not observed in $Osteoguide^{(R)}$. 2. TefGen $Plus^{(R)}$ had higher integrity than others and $Osteoguide^{(R)}$ was absorbed with folding shape. Gore Resolut $XT^{(R)}$ was divided everal parts during resorbtion and it was also absorbed from inside. 3. Quantity of new bone and new cementum was not abundant in all membranes. 4. For histologic evaluation of membranes we should consider infiltration of inflammatory, migration of junctional epithelium, integrity of membrane, quantity of new bone and new cementum, connective tissue formation and aspect of resorption. Conclusion: This histologic evaluation suggests that $Osteoguide^{(R)}$ provides periodontal regenerative environment with less inflammatory state. It is meangful that this study model suggests a valuation basis about other study model.
대략 2 kb의 크기를 가진 Pichia pastoris phosphoglycerate kinase gene (PGK1)의 프로모터부분을 266bp의 작은 크기로 최소화하여 P. pastoris에 있어 episomal의 새로운 항시적 발현벡터를 제조하였다. P. pastoris의 새로운 항시적 발현벡터를 개발하기 위하여 기존의 Pichia발현벡터인 pGABZB의 GAP프로모터부분을 연속적으로 일정 부분이 절단된 PGK1프로모터에 beta-galactosidase유전자가 결합된 부분으로 치환하였다. LacZ유전자를 reporter유전자로 사용하였을 때에 PGK1프로모터의 발현세기는 다른 항시적 프로모터인 GAP프로모터 보다는 낮았지만 TEF1프로모터 보다는 높았다. 본 논문에서 PGK1 프로모터의 불필요한 부분을 제거함으로서 Pichia에서 외래발현을 위한 새로운 episomal발현벡터인 pPGKZ-E를 제조하였으며 이 것은 P. pastoris에 있어 발현세기를 선택할 수 있는 발현벡터선택의 폭을 넓게 하였다.
2014년부터 2016년까지 국내 콩 재배 포장에서 시들음 증상을 보이는 시료에서 진균을 분리한 결과, Fusarium spp., Colletotrichum spp., Rhizoctonia spp., Macrophomina sp., Phytophthora spp., Calonectria ilicicola가 분리되었고, Fusarium균이 79.1%로 가장 많이 분리되었다. 53개의 Fusarium균을 균학적 특성에 의해 동정한 결과, F. solani, F. oxysporum, F. graminearum, F. fujikuroi 등 4개의 종 복합체(species complex)로 동정되었다. 염기서열분석을 통한 종 동정을 위해 translation elongation factor 1 alpha (TEF) 유전자 부위를 계통분석한 결과, F. solani, F. oxysporum, F. commune, F. asiaticum, F. fujikuroi 등 5종으로 확인되었다. 44개 Fusarium균주의 병원성을 확인하기 위하여 콩 3개 품종을 대상으로 유묘 침지 접종한 결과, F. asiaticum은 병원성이 없거나 미미한 것으로 나타났다. 병원성이 있는 10개 균주를 선발하여 기주범위를 조사한 결과, F. solani, F. oxysporum, F. commune은 콩에만 병원성이 있었고, F. fujikuroi는 콩, 강낭콩, 황동부콩, 흑동부콩 및 팥에 병원성을 보였다. 또한 13개 콩 품종을 대상으로 저항성 검정을 수행한 결과, F. commune과 F. fujikuroi는 모든 품종에 병을 일으켰다. 장기콩, 풍산나물콩, 소청자콩은 Fusarium에 의한 시들음병에 비교적 저항성이 것으로 나타났고, 황금올콩, 참올콩은 감수성 품종으로 확인되었다.
Rony Lizana, Riveros;Rosiane, de Sousa Camargos;Marcos, Macari;Matheus, de Paula Reis;Bruno Balbino, Leme;Nilva Kazue, Sakomura
Animal Bioscience
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제36권1호
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pp.75-83
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2023
Objective: The objective of this study was to describe a methodological procedure to quantify the heat production (HP) partitioning in basal metabolism or fasting heat production (FHP), heat production due to physical activity (HPA), and the thermic effect of feeding (TEF) in roosters. Methods: Eighteen 54-wk-old Hy Line Brown roosters (2.916±0.15 kg) were allocated in an open-circuit chamber of respirometry for O2 consumption (VO2), CO2 production (VCO2), and physical activity (PA) measurements, under environmental comfort conditions, following the protocol: adaptation (3 d), ad libitum feeding (1 d), and fasting conditions (1 d). The Brouwer equation was used to calculate the HP from VO2 and VCO2. The plateau-FHP (parameter L) was estimated through the broken line model: HP = U×(R-t)×I+L; I = 1 if t<R or I = 0 if t>R; Where the broken-point (R) was assigned as the time (t) that defined the difference between a short and long fasting period, I is conditional, and U is the decreasing rate after the feed was withdrawn. The HP components description was characterized by three events: ad libitum feeding and short and long fasting periods. Linear regression was adjusted between physical activity (PA) and HP to determine the HPA and to estimate the standardized FHP (st-FHP) as the intercept of PA = 0. Results: The time when plateau-FHP was reached at 11.7 h after withdrawal feed, with a mean value of 386 kJ/kg0.75/d, differing in 32 kJ from st-FHP (354 kJ/kg0.75/d). The slope of HP per unit of PA was 4.52 kJ/mV. The total HP in roosters partitioned into the st-FHP, termal effect of feeding (TEF), and HPA was 56.6%, 25.7%, and 17.7%, respectively. Conclusion: The FHP represents the largest fraction of energy expenditure in roosters, followed by the TEF. Furthermore, the PA increased the variation of HP measurements.
Purpose: Esophageal atresia (EA) with or without tracheoesophageal fistula (TEF) is a congenital anomaly that can cause frequent digestive and nutritional problems, even after repair. The most common complication is anastomotic stricture, for which reoperation or balloon dilatation is performed. This study aimed to evaluate the postoperative complications of EA and the role of endoscopic balloon dilatation (EBD) in cases of anastomotic stricture. Methods: We retrospectively analyzed patients diagnosed with EA with or without TEF between January 2000 and February 2021. Patients' baseline characteristics, associated anomalies, and postoperative complications were reviewed. Results: Among 26 patients, 14 (53.8%) were male, 12 (46.2%) had coexisting anomalies, and the median follow-up was 6.1 years (range, 1.2-15.7 years). In univariate analysis, prematurity, low birth weight, and long-gap EA were associated with postoperative complications in 12 (46.2%) patients. Among the 10 (38.5%) patients with anastomotic stricture, nine (90.0%) required EBD. Regarding the first EBD, it was performed at a median of 3.3 months (range, 1.2-7.6 months) post-repair, while the average patient weight was 4.6 kg. The mean diameter ranged from 3.3 to 9.1 mm without major complications. In univariate analysis, long-gap EA alone was significantly associated with EBD. Conclusion: Approximately half of the patients experienced complications after EA repair. In particular, patients with a long-gap EA had a significantly increased risk of complications, such as anastomotic strictures. EBD can be safely used, even in infants.
Tracheoesophageal fistula without esophageal atresia (H-type TEF) is a congenital anomaly that is characterized by a fistula between the posterior wall of the trachea and the anterior wall of the esophagus, not accompanied by esophageal atresia. The purpose of this study is to investigate the clinical characteristics, diagnostic time, the side of cervical approach and short term result after surgery by searching medical records of patients treated for H-type TEF. The search was done at University of Ulsan, Department of Pediatric Surgery of Asan Medical Center, and the total number of patients from May 1989 to December 2010 was 9 with M:F ratio of 1:2. The median gestational age was $39^{+6}$ ($32^{+6}{\sim}41^{+0}$) wks. Seven out of nine patients were born at term and the other two were born premature. The clinical presentation was aspiration pneumonia, difficulty in feeding, chronic cough, vomiting, abdominal distension and growth retardation. The symptoms presented right after birth. The diagnosis was made with esophagography and the median time of diagnosis was 52 days of life. The majority of surgical corrections were performed within two weeks of diagnosis (median; 15d, range; 1d - 6m). Six patients had associated anomalies, and cardiac anomalies were most common. The cervical approach was utilized in all cases (right 2, left 7). Transient vocal cord palsy and minor esophageal leakage complicated two cases. Although the diagnosis of H-type TEF was difficult and often delayed, we had a good short term result. The left cervical approach was preferred.
Trichoderma (Hypocreaceae) is one of the most ubiquitous genera worldwide. This genus has an excellent ability to adapt to diverse environments, even under poor nutritional conditions, such as in freshwater. However, little is known about the diversity of Trichoderma species in freshwater environments. In this study, we isolated diverse fungal strains from algae, plant litter, and soil sediment in streams in Korea. The strains were identified based on molecular phylogenetic analyses of internal transcribed spacer (ITS) rDNA and translation elongation factor 1 ($TEF1{\alpha}$) sequences. We also investigated their morphological characteristics by microscopic observation and determination of cultural features on different media. As a result, six Trichoderma species were found in Korea: T. afroharzianum, T. capillare, T. guizhouense, T. paraviridescens, T. reesei, and T. saturnisporum. Interestingly, T. paraviridescens showed both cellulose activity and hypoxia stress tolerance phenotypes, indicating its role as a decomposer in freshwater ecosystems. Our study revealed that freshwater environment could be a good candidate for investigating the species diversity of Trichoderma.
Hosung Jeon;Jung Wook Yang;Donghwan Shin;Donggyu Min;Byung Joo Kim;Kyunghun Min;Hokyoung Son
The Plant Pathology Journal
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제40권2호
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pp.106-114
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2024
Fusarium head blight (FHB), predominantly caused by Fusarium graminearum and F. asiaticum, is a significant fungal disease impacting small-grain cereals. The absence of highly resistant cultivars underscores the need for vigilant FHB surveillance to mitigate its detrimental effects. In 2023, a notable FHB outbreak occurred in the southern region of Korea. We assessed FHB disease severity by quantifying infected spikelets and grains. Isolating fungal pathogens from infected samples often encounters interference from various microorganisms. We developed a cost-effective, selective medium, named BGT (Burkholderia glumae Toxoflavin) medium, utilizing B. glumae, which is primarily known for causing bacterial panicle blight in rice. This medium exhibited selective growth properties, predominantly supporting Fusarium spp., while substantially inhibiting the growth of other fungi. Using the BGT medium, we isolated F. graminearum and F. asiaticum from infected wheat and barley samples across Korea. To further streamline the process, we used a direct PCR approach to amplify the translation elongation factor 1-α (TEF-1α) region without a separate genomic DNA extraction step. Phylogenetic analysis of the TEF-1α region revealed that the majority of the isolates were identified as F. asiaticum. Our results demonstrate that BGT medium is an effective tool for FHB diagnosis and Fusarium strain isolation.
Seo, Ju-Hee;Kim, Do-Yeon;Kim, Ai-Rhan;Kim, Dae-Yeon;Kim, Seong-Chul;Kim, In-Koo;Kim, Ki-Soo;Yoon, Chong-Hyun;Pi, Soo-Young
Clinical and Experimental Pediatrics
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제53권6호
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pp.705-710
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2010
Purpose: To determine the clinical manifestations and outcomes of patients with tracheoesophageal fistula (TEF) and esophageal atresia (EA) born at a single neonatal intensive care unit. Methods: A retrospective analysis was conducted for 97 patients with confirmed TEF and EA who were admitted to the neonatal intensive care unit between 1990 and 2007. Results: The rate of prenatal diagnosis was 12%. The average gestational age and birth weight were $37^{+2}$ weeks and $2.5{\pm}0.7kg$, respectively. Thirty-one infants were born prematurely (32%). Type C was the most common. The mean gap between the proximal and distal esophagus was 2 cm. Esophago-esophagostomy was performed in 72 patients at a mean age of 4 days after birth; gastrostomy or duodenostomy were performed in 8 patients. Forty patients exhibited vertebral, anorectal, cardiac, tracheoesophageal, renal, limb (VACTERL) association with at least 2 combined anomalies, and cardiac anomaly was the most common. The most common post-operative complications were esophageal stricture followed by gastroesophageal reflux. Balloon dilatation was performed for 1.3 times in 26 patients at a mean age of 3 months. The mortality and morbidity rates were 24% and 67%, respectively, and the most common cause of death was sepsis. The weight of approximately 40% patients was below the 10th percentile at 2 years of age. Conclusion: Mortality and morbidity rates of patients with TEF and EA are high as compared to those of infants with other neonatal surgical diseases. Further efforts must be taken to reduce mortality and morbidity and improve growth retardation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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