• 한국미생물·생명공학회지
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• 제38권1호
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• pp.24-31
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• 2010

본 연구는 제주 연안 해수로부터 분리된 항산화물질을 생산하는 해양 방선균의 천연해양항산화물질에 관한 연구이다. 균주 ACT-18은 16S rDNA 염기서열, 전자현미경을 이용한 형태학적 분석, 생리학적, 생화학적 특성 및 세포 지방산분석을 통하여 동정되었다. 분리균주 ACT-18은 Gram 양성, 호기성, 비운동성 포자, 배지상에서 substrate mycelia의 색이 어두운 초록색, aerial mycelia는 노란색의 회색을 나타내였다. 세포사이즈는 약 $0.5{\sim}1.0\;{\mu}m$였다. 16S rDNA 염기서열 분석결과 Gram 양성박테리아인 Streptomyces 종들과 그룹을 형성하였다. 지방산분석결과 주요 지방산은 $C_{15:0}$ anteiso(39.33%), $C_{16:1}$ cis 9(11.96%), $C_{16:0}$ (13.08%)과 $C_{17:0}$ anteiso(10.99%)로 분석되었다. Streptomyce sp. ACT-18의 배양액 메탄올 추출물의 항산화 활성은 electron spin resonance (ESR) spectrometer에 의한 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), hydroxyl, alkyl 라디컬 소거활성을 측정하여 나타내었다. 그 결과 배양액 메탄올 추출물의 DPPH 라디컬 소거활성은 0.1 mg/mL의 농도에서 46%의 라디컬 소거활성을 보였으며, Hydroxyl 라디컬 소거활성은 0.1 mg/mL에서 63%, alkyl 라디컬 소거활성은 0.1 mg/mL에서 39%의 소거 활성을 보였다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제11권6호
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• pp.1011-1017
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• 2001

Streptomyces sp. Y-110 cytochrome P-450, induced by the addition of compactin -Na into the culture medium, was purified from the cell extract to apparent homogeniety, mainly by DEAE-Sepharose, hydroxyapatite, and Mono Q column chromatyography. The sepcific activity of purified enzyme on its substrate, compactin-Na, was determined to be 15 nmol of pravastatin per mg protein. The molecular mass of this enzyme on SDS-PAGE was $37{\pm}0.5$ kDa, pI was 4.5, and its CO difference spectrum showed maximum absorption peaks at 452 and 550nm, respectively. The N-terminal amino acid sequence was determined to be Met>Thr>Cys>Thr>Pro>Val>Thr>Val>The>Gly>Ala>Ala>Gly>Gln>Ile>Gly>Tyr>Ala>Leu. Its apparent $K_m$ on compactin-Na was $1.294{\mu}M{\cdot}min^-1,\;and\;V_{max}\;was\;1.028{\mu}M{\cdot}min^-1$. The maximum substrate concentration ($K_s$) for reaction was $270 {\mu}M$and thus $1/[K_s]$ was $3.7{\mu}M$. These physicochemical characteristics and kinetic behavior of this enzyme were compared and shown to be different from those of Streptomyces cytochrome P-450 enzymes reported, suggesting that this enzyme may be an additional member of the Streptomyces cytochrome P-450 family.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제11권1호
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• pp.39-45
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• 1983

세포외 효소를 분필하는 Bacillus amyloliquefaciens의 생육을 선택적으로 저해하는 항생물질을 분리하고저 대구 근교의 토양시료 100여점을 채취하여 Streptomyces sp. KM-48주를 최종 선별하였다. 이 균주의 Nutrient Broth 배지에서의 배양00으로부터 활성성분을 acetone 유출, $Al_2$O$_3$, chromatography, avical TLC를 하여 UV 조사하에서 청록색 형광을 나타내는 단일물질로 정제하였다. 이 물질은 주로 그람양성균과 균모, 곰팡이 등에 강한 항균효과를 나타내었으며 Bacillus amyloliquefaciens에 대한 50% 생육저해농도가 18$\mu\textrm{g}$/$m\ell$이었다. 이 물질은 열에 비교적 약하였으며 산에는 강하게 그 활성이 유지되었다. 균주의 형태 및 배양성에서 Stretommces tsusimaensis의 유이균으로 동정되었다.

• 한국식품과학회지
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• 제26권5호
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• pp.633-637
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• 1994

퇴비에서 maltotetraose 생산성 아밀라제를 분비하는 세균 KSM-35를 분리하여 그의 형태적, 생화학적 특성을 고려하여 Steptomyces albus로 잠정 동정 하였다. 이 균주가 생산하는 아밀라제는 유안침전 분획, DEAE-Toyo pearl 및 2회의 sephadex-100 크로마토그라피로 44.5배 정제하며 27.1%의 활성을 회수할 수 있었다 이 효소의 등전점은 4.3이었으며 SDS-PAGE로 분석한 결과 분자량은 약 50,000이었다. 이 균주의 아밀라제를 2% 전분과 26시간 반응시킨 후 생성된 올리고당류를 HPLC로 조사한 결과 56%가 maltotetraose로서 주산물이었고 maltose와 maltoriose가 각각 20% 및 16%를 차지하였으며 기타 소량의 glucose, maltopentaose가 검출되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제20권3호
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• pp.335-343
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• 1992

미생물이 생산하는 대사길항물질을 screening한 결과 최소검정배지에서 Gram 양성균에 항균활성을 나타내고 L-leucine에 의하여 그 항균활성이 길항당하는 182-27 물질을 생산하는 방선균을 토양에서 새로이 분리하였다. 본 생산균을 분류 동정한 결과, 유연균을 찾아볼 수가 없고 신 균종으로 동정하기에는 많은 type culture와의 비교분류를 하여야만 하므로 여기서는 다만 기균사의 포자형성과 세포벽 성분의 조성, 형태학적 성상 등으로 보다 Streptomyces sp.로만 동정하였다. 182-27 균주의 배양조건을 검토하고 최적조건에서 대량 배양하여 그 배양여액으로부터 이온교환수지, silica gel column chromatography 등에 의하여 활성 물질을 분리 정제하였으며 배양액 약 20$\ell$에서 약 20mg의 백색분말을 얻었다. 182-27 물질은 그의 이화학적 성질로 보아 아미노산 유연물질로 추정할 수가 있으나 그의 화학구조는 아직 밝히지 못했다. 생물학적 성질은 최소검정배지상에서 Gram 양성균에 항균력을 나타냈고 이러한 항균력은 L-leucine의 첨가에 의해 저해 당했다.

• KSBB Journal
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• 제14권2호
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• pp.174-180
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• 1999

Cholesterol oxidase(EC.1.1.3.6)는 cholesterol을 산화 또는 이성화시키는 효소로, 혈중 cholesterol이 측정 등의 임상진단용 시약에 이용되고 있으며, 여려종류의 미생물에서 분리, 연구되어 왔다. 현재에는 농업 및 식품 등에도 응용이 기대되고 있는 매우 유용한 효소이다. 본 실힘은 토양에서 분리한 방선균으로부터 cho1esterol oxidase생산능이 우수한 균주를 선발하여 속의 동정, 효소의 생산조건 및 효소학적 특성을 조사하였다 . 본 분리균주는 배양학적, 형태학적 생리학적 특성 및 현미경 검정을 통하여 Streptomyces sp으로 동정하였다. 본 효소의 생산조건을 조사한 결괴 탄소원으로 1% soluble starch, 질소원으로 2% corn steep liquor가 효소생산에 우수하였으며, 이들 탄소원, 질소원이의 0.1% $NaNO_3$, 0.1% $KH_2PO_4$, 0.05% $MgSO_4$가 함유된 배지를 생산 최적 배지로 사용하였다. 본 효소의 특성을 검토한 결과, 최적온도와 최적pH는 각각 $37^{\circ}C$, pH 6.5~7.5이었으며. 효소와 안정성은 온도 $30-40^{\circ}C$에사 80% 이상 활성이 유지되었으며, pH 6.0~9.0의 범위까지 안정한 것으로 나타났다. 본 효소의 등전점은 multichambered electrofocusing unit를 사용하여 측정한 결과 pH 6.0-6.5인 것으로 추정되었다.

• 생물환경조절학회지
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• 제16권3호
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• pp.252-257
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• 2007

전남 서남부지역의 참다래 과수원에서 발생하는 과숙썩음병원균(fruit rot, Botryosphaeria dothidea)에 대한 항균작용이 우수한 세균성 균주를 선발하기 위하여 참다래 과수원 토양으로부터 단일균주를 분리하였으며, 과숙썩음병원균(Botryosphaeria dothidea)에 대한 생물적 제어 능력을 검정하고 균주 동정을 실시하였다. 참다래 과수원에서 분리한 총 250여종의 단일균주 중에서 참다래에서 발생하는 과숙척음병원균에 대하여 길항작용이 우수한 균주를 1차적으로 6종 선발하였고, 이 중에서 참다래 과숙썩음병원균에 대하여 길항 작용이 96.0% 정도로 우수한 Strain #120을 최종적으로 선발하였다. 길항균 #120의 포자배열은 rectiflexibles 하였고, 포자표면은 smooth형이었으며, 분리균 세포벽내 LL-type이 DAP를 갖는 wall chemotype I 이었다. 길항균 #120의 균주 형태학적 특성, 생리 생화학적 그리고 화학 분류학적 특성 등을 종합하여 볼 때 길항균 #120은 Streptomyces sp. #120으로 동정되었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제12권1호
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• pp.71-76
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• 2002

Soil samples were screened for actinomycete strains capable of producing phospholipase D, and a strain, Streptomyces sp. YU100, showing a high transphosphatidylation activity was isolated. This strain secreted phospholipase D in a culture broth after 12 h of cultivation, and its productivity continued to increase for 36 h of fermentation. In addition, its transphosphatidylation rate of phosphatidylcholine to phosphatidylserine was almost $68\%$ within 1 h. The morphological and chemotaxonomical characteristics showed that this strain could be classified as a number of the Streptomycetaceae family, particularly due to the spiral form of its spore chain consisting of 60-70 smooth spores $(0.75{\times}1.0{\mu}m$) on an aerial mycelium, FA-2c type of fatty acid profile in the cell wall, and LL-DAP component in the cell wall peptidoglycan. A phylogenetic analysis of the 16S rDNA provided a clue that the strain YU100 was actually a member of the genus Streptomyces, because the determined sequence exhibited a higher homology with Streptomyes sp. ASB27, S. peucetius JCM9920, and S. griseus ATCC10137. A dendrogram based on the 16S rDNA sequences also showed a phylogenetic relationship between the strain YU100 and these strains. However, the strain YU100 has not yet been assigned to a particular species, because of absence of any other classified species with a high matching score.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제34권4호
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• pp.306-310
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• 2006

토양 미생물인 방선균의 배양액으로부터 그람양성균에 대해 항균활성을 가지는 항균성 물질을 탐색하였다. 2,500주의 방선균 배양액을 탐색하여 항균성 물질 생산균주 Streptomyces sp. G9l353을 분리하였고, 그로부터 생산된 항균성 물질인 A91353을 분리 정제하였다. A91353은 다양한 구조해석 연구에 의하여 N-acetyl-phenylalanine으로 동정되었으며 Sc. pyogenes 308A, Sc. pyogenes 77A 등과 같은 그람양성균에 대해 선택적이며, D-alanyl-D-alanine과 상호작용 하여 그람양성균의 세포벽 합성을 저해하는 것으로 사료된다. N-acetyl-phenylalanine의 최소생육저해 농도는 그람양성균에 대해서 $50{\mu}g/ml$ 이었으며, 그람음성균에 대한 활성은 나타나지 않았다.

• 생명과학회지
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• 제22권1호
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• pp.7-15
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• 2012

이전 연구에서 Streptomyces sp. M3 균주로부터 polyguluronate에 기질특이성을 가지는 알긴산분해효소를 cloning하고 활성을 연구하였다. 이번 연구에서는 pColdI vector에 들어있는 M3 알긴산분해효소 유전자를 돌연변이시켜 알긴산분해효소의 활성을 증진시키고자 하였으며, 점-돌연변이 또는 무작위-돌연변이 방법을 사용하여 돌연변이를 실시하였다. Ser25Arg, Phe99Leu, Asp142Asn, Val163Ala, Lys191Glu 및 Gly194Cys 등 6 종류의 돌연변이 단백질을 얻을 수 있었다. Phe99Leu 및 Lys191Glu 돌연변이 단백질은 알긴산을 분해하는 능력을 완전히 잃었으나 Gly194Cys 돌연변이 단백질의 활성은 원래 단백질에 비하여 10배 증가하였다. 또한 돌연변이된 M3 알긴산분해효소 단백질의 3차 구조는 Swiss-Model 자동모델러를 이용하여 생성하였으며 다른 알긴산분해효소의 결정구조와 비교하였다. 194 번째 아미노산인 글리신은 알긴산의 C-말단 보존서열인 YFKAGXYXQ의 Gly193과 Tyr195 사이에 위치한다. 이 연구에서 돌연변이된 글리신과 페닐알라닌 잔기들은 활성자리로부터 많이 떨어져있음에도 불구하고 돌연변이에 의하여 알긴산 분해활성이 강하게 영향을 받는 것으로 나타났다.