본 연구는 배추 무사마귀병의 생물학적 방제를 위해 수행되었다. 배추 무사마귀병균 Plasmodiophora sp외 길항미생물은 낙엽부식토양에서 분리한 350여 종의 토양미생물 중에서 가장 길항력이 높은 방선균 AC-3균주를 이용하였고, AC-3 균주는 16S rDNA 염기서열분석방법으로 Streptomyces sp.로 동정되었다. Streptomyces sp. AC-3은 배양액 $m\ell$당 9.3 units의 chitinase를 생산하였다. 그 결과 배추 무사마귀병균 Plasmodiophora sp.의 배양액에 Streptomyces sp. AC-3을 접종하고 배양하면 Plasmodiophora sp.의 균체가 팽윤되거나 세포벽이 용해된 모습이 관찰되었다. Streptomyces sp. AC-3은 전딘도 배추 무사마귀병이 만연했던 포장에서 재배 시험하기 위해 제형화시키고 유기질비료에 첨가하여 이용하였다. 미생물제제를 첨가하지 많고 제조한 유기질비료(H-1)(대조구)와 미생물제제 첨가하여 제조한 유기질비료(H-2)(처리구)에 의한 포장시험에서 배추의 생육은 재배 40일 까지는 거의 차이를 나타나지 않았으나 재배 60일에는 다소 차이를 나타내었다. 배추의 병 발생율을 조사한 결과 무사마귀병은 H-1 비료 처리구에서는 36.17% 병이 발생되었으나 H-2 비료 처리구에서는 18.28% 발병되어 약 50%의 방제효과를 나타내었으며, 균핵병, 잎마름병, 그루썩음병 등에서도 길항효과를 나타내어 생물학적 방제가 가능한 균주로 확인되었다.
FK506, a widely used immunosuppressant, is a 23-membered polyketide macrolide that is produced by several Streptomyces species. FK506 high-yielding strain Streptomyces sp. RM7011 was developed from the discovered Streptomyces sp. KCCM 11116P by random mutagenesis in our previous study. The results of transcript expression analysis showed that the transcription levels of tcsA, B, C, and D were increased in Streptomyces sp. RM7011 by 2.1-, 3.1-, 3.3-, and 4.1-fold, respectively, compared with Streptomyces sp. KCCM 11116P. The overexpression of tcsABCD g enes in Streptomyces sp. RM7011 gave rise to approximately 2.5-fold (238.1 μg/ml) increase in the level of FK506 production compared with that of Streptomyces sp. RM7011. When vinyl pentanoate was added into the culture broth of Streptomyces sp. RM7011, the level of FK506 production was approximately 2.2-fold (207.7 μg/ml) higher than that of the unsupplemented fermentation. Furthermore, supplementing the culture broth of Streptomyces sp. RM7011 expressing tcsABCD genes with vinyl pentanoate resulted in an additional 1.7-fold improvement in the FK506 titer (498.1 μg/ml) compared with that observed under non-supplemented condition. Overall, the level of FK506 production was increased approximately 5.2-fold by engineering the supply of allylmalonyl-CoA in the high-yielding strain Streptomyces sp. RM7011, using a combination of overexpressing tcsABCD genes and adding vinyl pentanoate, as compared with Streptomyces sp. RM7011 (95.3 μg/ml). Moreover, among the three precursors analyzed, pentanoate was the most effective precursor, supporting the highest titer of FK506 in the FK506 high-yielding strain Streptomyces sp. RM7011.
Cystocin을 생산하는 Streptomyces sp GCA0001균주를 screenig하였으며, Streptomyces sp GCA0001를 배양하고 분리 정제를 통하여 흰색 분말의 Cystocin을 얻을 수 있었다. Cystocin은 Streptomyces alboniger에서 생산되는 Puromycin과 매우 유사한 구조의 항생물질로 확인되었다. Cystocin은 Puromycin과 마찬가지로 단백질 합성시 폴리펩티드 사슬의 elongation을 조기 종결함으로써 생체내에서 항박테리아, 항종양 및 항바이러스 활성을 나타낸다
Studies on the glucose isomerase produced by alkalophilic Streptomyces sp. B-2. Glucose Isomerase (E. C. 5.3.1.5) which reversibly catalyzes reaction between D-glucose and D-fructose was demonstrated in cell free extracts of alkalophilic Streptomyces sp. B-2 isolated form soil. The maximum enzyme activity was found at glucose concentration 4(g/$\ell$) , xylose concentration 6(g/$\ell$), magnesium ion 1.0(g/$\ell$), yeast extract concentration 2.0(g/$\ell$), peptone concentration 3(g/$\ell$).
본 연구는 Streptomyces sp. BH-405의 배양액으로부터 유기용매로 추출하여 지질과 산화에 대한 항산화 효과를 실험하였다. Streptomyces sp. BH-405의 배양액을 ethylether로 추출한 후 silica gel column(100$\times$10 cm) chromatography로 분획한 획분을 POV로 측정한 결과 fraction 3에서 향산화 활성이 가장 높았다. 항산화 활성이 높은 fraction 3 획분을 다시 preparative TLC와 column chromatography로 더욱 정제하여 band 2를 얻었다. Band 2의 항산화 효과를 알아보기 위해 기존의 항산화제와 비교한 결과 이-$\alpha$-tocopherol, BHA보다 산화억제 효과가 높았으며 DPPH에 의한 수소 공여능은 실험결과가 우수하였다. 한편 band 2는 쥐 간의 microsome에 있어서 유리기의 소거기능이 있었고 NADPH 및 Fenton 시액에 위한 효소적 과산화 지질의 생성을 억제하였다. 그리고 mitochondria와 리놀산의 과산화 유도계에서도 지질의 과산화 과정에 생성하는 유리기의 형성을 차단하였다. 결론적으로 Streptomyces sp. BH-405의 배양액에서 얻은 획분인 band 2는 산화를 억제하는 활성이 있었다.
항진균 활성 관련 단백질을 찾기 위해 미역류로부터 Streptomyces sp. SAR01을 분리하고, FAME (fatty acid methyl ester)분석으로 동정하였다. 감마선(sup $({60}^Co)$)조사를 이용하여 항진균 활성 결핍 돌연변이체(SAR535)를 유도한 후, 이차원전기영동으로 단백질을 분석한 결과 SAR01에만 존재하는 6종의 단백질을 확인할 수 있었다. 이중 10 kDa chaperonin cpn10 (GroES)과 96%의 상동성을 가진 10 kDa의 단백질을 클로닝하였으며, E. coli Ml5에서 과대 발현됨을 확인하였다. 또한 SAR535에 형질전환시킨 결과 SAR01과 유사한 항진균 활성이 나타났다. 이것으로 볼 때 groES는 Streptomyces sp. SAR01의 항진균 활성에 관련된 것으로 사료된다.
본 실험에서는 GI 활성이 높은 alkalophilic Streptomyces sp.를 사용하여 2% $ extsc{k}$-carrageenan에 균체를 고정화 균체의 효소학적 특성을 살펴보았다. pH stability는 pH가 7.5~8.5에서 GI 활성이 가장 높았으며, reaction temperature는 7$0^{\circ}C$, Co2+는 10-3M, Mg2+는 10-3M일 때 GI 활성이 가장 높은 것으로 나타났다.
호알칼리성 방선균 Streptomyes sp. B-2를 Glucose Isomerse 생성을 위해 토양에서 분리했다. Glucose Isomerase(G.I)는 high fructose glucose syrup과 fructose의 생산을 위해서 식품 공업에서 아주 중요시되고 있는 효소이다. 호알칼리성 방선균 Streptomyces sp. B-2가 생성하는 glucose isomerase(G.I.)를 정제하였다. G.I.는 (NH$_4$)$_2$So$_4$분획, DEAE-cellulose, Sephadex G-200 chromatography하여 순수 분리 하였다. 순수분리된 G.I.는 electrophoresis에 의해 확인을 했다. SDS-acrylamide gel electrophoresis에 의해 정제된 효소는 single band를 보여주었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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