Kim, Hyung-Woo;Kim, Gye-Yeop;Jeon, Byung-Gwan;Choi, Jeong-Sik;Jeong, Hyun-Woo;Cho, Su-In
대한한방내과학회지
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제28권2호
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pp.377-384
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2007
Objective : Immune potentiation including activation of T cells, B cells, macrophages, and dendritic cells is known to play a key role in prevention and treatment of patients with cancer. In this study, we investigated the effects of Acanthopanax sessiliflorus (AR) on the immune system, especially on thymocytes, splenocytes, and macrophages. Methods : We investigated the effects of AR on proliferation of splenocytes in normal mice, and the effects on proliferation of splenocytes and thymocytes in tumor-bearing mice. In addition, the effect of AR on NO production using macrophages was investigated. Results : Treatment with AR accelerated proliferation of splenocytes in vitro. AR also accelerated thymocyte proliferation, but did not affect splenocytes proliferation in normal mice. In contrast, AR accelerated proliferation of splenocytes and thymocytes significantly in tumor bearing mice. In addition, NO production level from macrophages was elevated by treatment with AR. Conclusion : These results demonstrate that AR has anti-cancer activities and related mechanisms are involved in immune potentiation such as acceleration of immune cell proliferation and elevation of NO production level in macrophages. In addition, we also demonstrate the possibilities of AR as complementary and alternative medicine to standard anti-cancer drugs.
This study was performed to investigate the potential of pear (Pyrus pyrifolia) as a immune-modulating functional food by assay of splenocytes proliferation and induction of cytokines (IFN-${\gamma}$, IL-4) in vitro. When mouse splenocytes were exposed to various concentration (0.16, 0.31, 0.63, 1.25, 2.50 mg/ml) of pear methanol extracts (P-M) without mitogens, splenocytes proliferation (SP) was significantly increased. Also, SP to mitogens, concanavalin A (Con A) and lipopolysaccharide (LPS) were significantly increased by P-M when compared with controls. When splenocytes were cultured with P-M in the presence of Con A, cytokine (IFN-${\gamma}$, IL-4) levels in culture supernatant were significantly enhanced in a dose-dependent manner except 2.5 mg/ml when compared with control group. Therefore, our study suggest that the pear has the potential of being an immune-modulating functional food.
We investigated the effects of ${\beta}$-glucan purified from Paenibacillus polymyxa JB115 on the viability and proliferation of splenocytes. Splenocytes play a critical role in host immunity. MTT assays and trypan blue exclusion tests revealed that ${\beta}$-glucan significantly promoted the viability and proliferation of splenocytes over a range of concentrations. However, there was no specific subset change. ${\beta}$-glucan protected splenocytes from cytokine withdrawal-induced spontaneous cell death. For further mechanistic studies, ELISA assay revealed that ${\beta}$-glucan enhanced the expression of anti-apoptotic molecules and interleukin 7 (IL-7), a cytokine critical for lymphocyte survival. We also investigated the IL-2 dependency of ${\beta}$-glucan-treated splenocytes to determine if treated cells could still undergo clonal expansion. In flow cytometric analysis, ${\beta}$-glucan induced increased levels of the activation marker CD25 on the surface of splenocytes and ${\beta}$-glucan-treated splenocytes showed higher proliferation rates in response to IL-2 treatment. This study demonstrates that ${\beta}$-glucan can enhance the survival of splenocytes and provides valuable information to broaden the use of ${\beta}$-glucan in research fields.
The immunomodulating effect of Salicornia herbacea polysaccharides on BALB/c mice splenocytes was investigated. Crude (CS) and fine polysaccharide (PS) extracts with potential biological activity were prepared from S. herbacea. For in vitro experiments, splenocytes and separated T cells were treated with CS and PS (0.5, 1, 2, and 4 mg/mL). For in vivo experiments, the CS and PS were orally administered to BALB/c mice every day for 2 weeks. For basic data analysis, physiological parameters were recorded. Cell proliferation of splenocytes and T cells was used as an index for immunomodulating activity. The proliferation of splenocytes and separated T cells was 3.2 and 3.5 times higher than the control, respectively. Moreover, when splenocytes were treated with mitogen, the highest proliferation rate was observed in splenocytes cultured with PS. Interestingly, the stimulative activity of PS was more strongly exerted through $CD4^+$ T cells than through $CD8^+$ T cells.
Effects of zinc chloride (Zn) on the immune responses of lipopolysaccharide (LPS) were studied by using ICR mice. Mice were divided into 4 groups (10 mice/group), and Zn was given to the mice with i.p. injection at 0.3 mg/kg 5 times a week for 14 days, and 1 hr after Zn administration, LPS was given with i.p. injection at 5 mg/kg twice a week. Mice were immunized and challenged with sheep red blood cells (SRBC). Immunobiological responses were evaluated by humoral, cellular and nonspecific immunity. LPS treatment significantly increased the relative weights of spleen and thymus, hemagglutination titer (HA) and proliferation of splenocytes compared with those in controls, but significantly decreased the body weight gain. Zn treatment significantly increased proliferation of splenocytes and circulating leukocytes compared with those in controls. Combination of Zn and LPS significantly decreased the body weight gain and proliferation of splenocytes compared with those in controls. Combination of Zn and LPS significantly decreased HA and proliferation of splenocytes than in LPS alone. These findings indicate that zinc lowered the humoral immune responses of LPS.
함초(Salicornia herbacea)는 염습 지대에서 자생하는 명아주과에 속하는 일년초 식물로서 우리말로는 퉁퉁마디라고 불리우며, 식용과 약용으로 이용되고 있다. 건조된 함초로부터 열수 추출을 하여 조추출물(CSP)을 얻었으며, 조추출물을 한외 여과 및 gel 여과를 통해 다당체I(SP I)과 다당체 II(SP II)를 얻었다. 이렇게 얻은 함초 추출물들은 마우스 면역 조절 활성을 확인하는데 사용되었고, 실험은 시험관 내 실험과 생체 내 실험으로 나누어 진행되었다. 시험관 내 실험에서는 $7{\sim}8$주 된 Balb/c 마우스로부터 비장 세포와 T 세포를 분리하여 시료를 농도별(0.5, 1, 2, 4 mg/mL)로 처리한 후 일정 시간 배양하여 MTS assay를 통해 세포 증식능을 확인한 결과, 비장 세포와 T 세포에서 각각 4 mg/mL 농도로 24시간 배양한 경우 시료를 처리하지 않은 대조군에 비하여 SP I이 3.2, 3.5배로 유의적인 세포 증식 활성을 나타내었다. 생체 내 실험에서는 $7{\sim}8$주 된 Balb/c마우스를 대조군과 투여군으로 나누어 7일 동안 경구 투여를 실시하였는데, 실험 종료 후 비장 세포를 적출하여 mitogen을 이용한 세포 증식능을 확인한 결과, SP I을 경구 투석한 비장 세포가 가장 높은 세포 증식능을 보였다. 즉, 함초로부터 조추출물과 다당체를 획득하여 이들에 대한 면역 활성능을 확인한 결과, 조추출물과 다당체에서 면역 세포 활성 증강 효과를 보였는데, 조추출물보다 다당체에서 더 높은 활성을 보였다. 따라서 함초 다당체는 면역 증강 활성을 가진 바이오 헬스 소재로 개발될 수 있을 것으로 기대된다.
Objective : This Study was to investigate effects of Takli-San on the anti-cancer and proliferation of immunocytes, nitric oxide(NO) production of peritoneal macrophages. Methods : We used Takli-San extract(TLS) with freeze-dried, 8wks-old male mice and cancer cell lines(L120, Sarcoma-180) for this Study. The cytotoxicity and proliferation of cells were tested using a colorimetric tetrazoliun assay(MTT assay). Results : 1. TLS was significantly showed cytotoxicity on the L1210 cell lines. 2. TLS was significantly increased proliferation of thymocytes and splenocytes in vitro. 3. TLS was significantly increased proliferation of thymocytes by all-dosage, but proliferation of splenocytes by low-dosage in normal mice. 4. TLS was significantly increased NO production from peritoneal macrophages in normal mice. 5. TLS was significantly decreased proliferation of L1210 cells in L1210 cells transplanted mice. 6. TLS was significantly increase proliferation of thymocytes by all-dosage, but proliferation of splenocytes by low-dosage in L1210 cells transplanted mice. 7. TLS was significantly increased NO production from peritoneal macrophages in L1210 cells transplanted mice. Conclusions : The present author thought that TLS had action of anti-cancer by becoming immunocytes activity(NO production, proliferation of thymocytes).
To investigate the effect of bovine colostral whey fractions on in vitro proliferation of mouse splenocytes, polypeptide fractions were separated from acid whey into 3 fractions depending on molecular weight by ultrafiltration: Fraction I, which contains the polypeptide larger than 10,000 Da, Fraction n, which contains the polypeptide ranging from 1,000 Da to 10,000 Da and Fraction III, which contains the polypeptide smaller than 1,000 Da. Fraction II showed the highest proliferative effect of mouse splenocytes among the colostral whey fractions and this proliferative activity increased in dose dependent manner. Unheated Fraction II and Fraction III showed significantly (p<0.01) higher proliferative effects than others but heated Fraction II showed the highest enhancing effect of mouse splenocyte among heated whey fractions (p<0.01). The supplementation of Fraction II and Fraction m showed greater proliferative effect of mouse splenocytes stimulated by concanavalin A (Con A) than that of whole whey or Fraction L Proliferative effect of mouse splenocytes stimulated by phytohemagglutinin (PHA) was the highest when Fraction II was supplemented Proliferative effect of the colostral whey fractions on mouse splenocytes by stimulation of lipopolysaccharide (LPS) was markedly enhanced by supplementation of Fraction II and Fraction m compared with whole whey and Fraction L It was estimated that colostral whey fraction containing IGF-I positively affected proliferation of mouse splenocyte.
Red sea cucumber Stichopus japonicus is an invertebrate animal inhabiting in coasts of Korea, China, and Japan. They are traditionally used for food and medicine and well known for their distinctive biologically and pharmacologically important compounds. We investigated the effect of amyloglucosidase (AMG) enzymatic extracts of S. japonicus (AESJ) on the proliferation and cytokine secretion of murine splenocytes stimulated with concanavalin A (Con A). AESJ enhanced the proliferation of splenocytes and the production of IL-2 (Th1 cytokine), IL-1β (Th1 promoting cytokine), and IL-4, IL-10 (Th2 type cytokines) when treated alone. However, under Con A stimulation, AESJ suppressed the proliferation of splenocytes, attenuated the secretion of IL-2, IL-4, IL-10, and enhanced IL-1β secretion. These results suggest that AESJ exhibits immunomodulatory effect by moderating the proliferation of splenocytes and the secretion of IL-2, IL-1β, IL-4, and IL-10 differently depending on the absence and presence of Con A stimulation. These data evidence the immunomodulatory potential of AESJ, which can be further developed into a functional food mediating homeostasis.
Ginger (Zingiber officinale Roscoe) has been used as a raw material in many traditional preparations since the ancient time. As a component of traditional health products, Ginger is known to be effective as appetite enhancer, anticold and anti-inflammation. This study was performed to investigate the immunomodulative effects of Ginger in mouse, using in vitro and ex vivo experiments. In vitro experiment, the mice splenocytes proliferation and three kinds of cytokines (IL-1 $\beta$, IL-6, and TNF-$\alpha$) prodution by peritoneal macrophages cultured with ethanol and water extracts of Ginger were used to indicate the immunomodulative effect. In order to elucidate the immunomodulative effects of Ginger ex vivo, water extract of Ginger was orally administrated into mice, and isolated splencytes and macrophages were used as experimental model. Ex vivo experiment, six to seven week old mice were fed ad libitum on a chow diet, and water extract of finger was orally administrated every other day for four weeks at two different concentractions (50 and 500 mg/kg B.W./day). In vitro study, the splenocytes proliferation was increased when water extract was supplemented in the range of 50-500 $\mu$l/ml concentration. In case of cytokines production, IL-1 $\beta$, IL-6 and TNF-$\alpha$ released by activated peritoneal macrophages were augmented by the supplementation of water extract of the Ginger. Ex vivo experiment, the highest proliferation of splenocytes and production of cytokines by activated peritoneal macrophages were seen in the mice orally administrated at the concentration of 500 mg/kg B.W./day. In conclusion, this study suggests that Ginger extracts may enhance the immune function by regulating the splenocytes proliferation and enhancing the cytokine prodution capacity by activated macrophages in mice.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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