피조개, Scapharca broughtonii (Schrenck) 정자의 냉장보존을 위해 희석액에 따른 보존효과를 비교하였다. 피조개 정액을 채취하여 600 mM NaCl, Stein solution, 300 mM, 600 mM glucose (10 mM Hepes-pH 7.8), Ringer's solution (230 mM NaCl, 8 mM KCl, 2 mM $CaCl_2$, 3.7 mM $MgCl_2$, 0.2 mM $NaHCO_3$, 10 mM Hepes-pH 7.8), 20%, 25% ASW (NaCl 2.7 g + KCl 0.07 g + $CaCl_2$ 0.12 g + $MgCl_2$ 0.46 g + $NaHCO_3$ 0.05 g + distilled water 100 ml)를 각각 사용하여 $4^{\circ}C$에서 보관하였다. 피조개 정자의 보존효과는 정자의 운동성과 생존율로 평가였다. 피조개 정자는 Ringer's solution에서 7일간 냉장 보전하였을 때 운동성과 생존율을 가장 높았으며, 희석액의 적정 pH는 7.5 이었다.
This study was carried out to investigate the characteristics of semen and egg storage period on hatchability of Korean native chicken(KNC, 44-wk old). The body weight, volume of semen, concentration of spermatozoa, total sperm of an ejaculate, motility of sperm and percentage of fertile eggs were 2,555.89g, 0.473$m\ell$, 30.81${\times}$10(sup)8/$m\ell$, 13.14${\times}$10(sup)8 cells, 3.58 and 91.69%, respectively, in KNC. The percentage of fertile eggs were 87.9∼96.0% on storage period in KNC. The viability and hatchability were 80.2%. 74.6%, respectively, in storage period for 22 days in storage temperature of 11∼14$^{\circ}C$. The results of the trial show that viability can be get more than 80% in storage period for 3 weeks in storage temperature of about 13$^{\circ}C$.
본 연구는 인공수정 센터에서 이용되고 있는 종모돈의 인공수정 분만율의 차이를 기준으로 하여 정액의 보존 일에 따른 정자의 생존율, CASA, HOST, IVP 및 SCSA를 조사하여 이들 정자의 분석법들과 인공수정 분만율과의 상관관계를 조사하여 종모돈의 수정 능력을 예측할 수 있는 정액 평가법을 개발하고자 실시하였다. 종모돈의 액상정액을 대상으로 CASA, HOST, IVP 및 SCSA 기법을 적용한 정액의 평가 결과는 다음과 같았다. 정액의 보존 일별 HOST 결과는 보존 일이 경과함에 따라 유의적으로 감소하였고(P<0.05), IVP 결과 난자 당 침투 정자 수는 보존 3일째에 유의적으로 감소하였다(P<0.05). 보존 0일과 6일에 HOST는 분만율이 80% 이상인 종모돈 군이 70% 미만인 종모돈 군 보다 유의적으로 높았고, 3일에서는 80% 이상인 종모돈 군이 다른 종모돈 군에 비하여 높았다(P<0.05). IVP는 보존 0일에 분만율이 80% 이상인 종모돈 군이 70% 미만인 종모돈 군보다 난자당 침투 정자 수가 유의적으로 많았다(P<0.05). %Red는 보존 0일과 3일에는 분만율이 80% 이상과 70% 미만인 종모돈 군 간에 유의적인 차이를 보였으나 보존 6일에서는 모든 종모돈 군간에 유의적인 차이가 있었다(P<0.05). %Red(r=0.79, P<0.01 ; r=0.86, P<0.01 ; r=0.88, P<0.01)는 정액의 보존 일이 증가함에 따라 분만율과의 부의 상관 계수가 증가하였다. 이상의 결과를 종합해 보면 SCSA는 정액의 수정 능력을 평가하는데 있어서 매우 유용한 방법이며, 정액의 보존 일은 여러 가지 정자 기능과 SCSA 결과에 크게 영향을 주는 것으로 나타났다. 정액의 수정 능력을 평가함에 있어서 정액의 보존 일령을 고려하고 정자 기능 검사와 SCSA를 병행하여 실시할 경우 종모돈의 수정 능력 평가 시 정확성을 더욱 높일 수 있는 유용한 방법이 될 수 있을 것으로 사료된다.
In this study the effect of extenders and temperatures on sperm viability and fertilizing capacity of boar sperm during long-term storage was investigated. Acrosomal integrity, membrane integrity, motility and hypo-osmotic resistance were evaluated by fluorescence and light microscopy. An in vitro fertilization test was performed to assess the fertilizing capacity of stored spermatozoa. The five diluents tested were ranked according to their ability to maintain sperm functional parameters and Zorlesco (ZO) extender with BSA or with PVA instead of BSA produced the best results. Zorlesco extender substituted with PVA (ZO+PVA) was found to maintain motility both at 15 and 20$^{\circ}C$. within 5 days of storage, but the quality of semen stored at 15$^{\circ}C$ decreased thereafter as compared to semen stored at 20$^{\circ}C$ Semen stored at 5$^{\circ}C$ demonstrated rapid loss of motility already within 24 h. Both fertilization and cleavage of semen stored at 20$^{\circ}C$ in ZO substituted with PVA instead of BSA did not change significantly until day 8 of storage. It is therefore concluded that PVA can be used to substitute for BSA and 20$^{\circ}C$ was more suitable than 15$^{\circ}C$ for boar semen storage, and in vitro fertilizing capacity of spermatozoa was maintained for at least 8 days in ZO+PVA at 20$^{\circ}C$.
Objective: This study was conducted to examine influence of skimmed milk-based extender (SM), INRA 96 extender and BotuSemen Gold extender on parameters of stallions' ejaculate during storage. Methods: In this study, 14 stallions between 4 and 20 years of age were monitored. Total and progressive motility, viability and morphology of sperm were evaluated at time intervals of 24, 48, and 72 hours after collection. Results: The total motility, progressive motility, and values of sperm with normal morphology were significantly higher in the INRA 96 and BotuSemen Gold extenders than in the SM (p<0.01). The sperm viability differed significantly in all extenders (p<0.01). The highest value of sperm viability was in INRA 96 (64.69%±0.67%) and lowest in SM (59.70%±0.81%). The highest differences occurred at 72 hours of storage. Values of total motility, progressive motility and sperm viability decreased over time (p<0.01). In case of sperm morphology there was no statistically significant decrease between 48- and 72-hour time intervals. Conclusion: It can be concluded that the extenders with a chemically defined composition have shown better indicators of insemination capabilities in ejaculates than the SM. The BotuSemen Gold extender is a suitable alternative to the INRA 96, when used within 48 hours; after 72 hours of storage, however, the INRA 96 showed a higher share of viable spermatozoa.
본 연구는 독자 개발한 돼지인공수정용 희석액 KpA를 실용화하기 위하여 온도와 pH 변화가 KpA의 정자보존능력에 미치는 영향을 알아보고자 실시하였다. 요크셔 계통의 종웅돈에서 채취한 신선정액을 KpA와 BTS으로 희석한 다음 17$^{\circ}C$에 1주일간 보존하면서 생존율과 pH 변화폭을 조사한 결과 KpA 희석정액은 BTS 희석정액보다 보존기간 동안에 높은 생존성을 나타내었으며, 5일까지 60% 이상의 생존율을 유지하였다. 또한 두 희석액과 희석정액 모두 보존 중 생리적인 pH 범위내에서 안정하였다. 희석액 KpA의 pH를 산성 (pH 6.3~6.8), 중성 (pH 6.8~7.3), 염기성화 (pH 7.8~8.0) 으로 조정한 다음 신선정액과 희석하여 4$^{\circ}C$, 17$^{\circ}C$ 및 37$^{\circ}C$에서 보존한 결과 희석정액의 pH 는 급격한 변화 없이 안정하였으나 중성에서 보다 산성과 염기성의 환경에서 더 완만한 변화를 보였다. 또한 희석액을 산성화 또는 염기성화 하였을 때 정자가 받는 스트레스는 17$^{\circ}C$보다 4$^{\circ}C$와 37$^{\circ}C$에서 더욱 현저히 나타났다. 따라서 KpA 는 17$^{\circ}C$ 보존에 적합한 희석액이며, 보존 중 정자의 생존율을 높게 유지하기 위해서는 희석정액의 pH 와 보존온도의 조화가 중요한 역할을 한다는 사실을 알 수 있었다.
L-Carnitine is an antioxidant for the transport of fatty acids in mitochondria and breakdown of lipids for metabolic energy. Some studies have suggested that carnitine improves sperm motility in mammals. The objective of this study was to investigate the effect of L-carnitine on the characteristics in fresh semen of miniature pigs. The collected fresh semen was stored in modena B medium with L-carnitine (0, 1.0, 2.0, and 4.0 mg/ml) for 10 days at $18^{\circ}C$. The semen quality of viability, acrosome reaction and mitochondria integrity was analyzed on 0, 3, 7, and 10 day of semen storage. The percentages of live and dying sperm were not different among treatment groups with different concentrations of L-carnitine during the storage period. In acrosome reaction analysis, when the sperm stored for 7 day, the percentages of live sperm with acrosome reaction were significantly (p<0.05) lower in 1 ($9.0{\pm}0.9%$), 2 ($7.6{\pm}0.2%$) or 4 mg/ml ($7.9{\pm}0.8%$) L-carnitine-treated groups than the control group (0 mg/ml L-carnitine) ($11.12{\pm}0.2%$). However, there were no difference in percentages of live sperm with acrosome reaction for 3 and 10 days of storage with each concentrations of L-carnitine. When sperm was stored for 3 and 10 days, the percentages of live sperm with mitochondria integrity were significantly higher in 2 mg/ml of L-carnitine-treated group than control group (p<0.05). In conclusion, the L-carnitine has a positive effect on acrosome reaction and mitochondria integrity in liquid state of fresh semen in miniature pigs.
본 연구는 정액의 보존 기간 동안 정액의 질적 변화를 알아보고자 시행하였다. 돼지 정액을 Beltsville Thawing Solution (BTS)에 희석한 후 $17^{\circ}C$에서 5일 동안 보존하였다. 보존 기간 동안 정자의 운동성(%)과 linearity는 3일째부터 유의하게 감소하였으나, 다른 운동 역학 변수에서는 유의적 변화를 나타내지 않았다. 또한, 5일 동안 정액을 보존할 경우 첨체의 온전성에도 변화가 없었다. 그러나 제 4일째부터 첨체 변화가 야기된 정자는 유의적으로 증가하였으나, 수정능 획득이 일어난 정자는 유의적으로 감소하였다. 정액의 보존 기간 동안 첨체의 온전성의 유의적 변화가 없었다. 즉, 보존 기간 3일동안 정자의 질적 운동성 및 첨체 온전성에는 유의적인 변화가 없었으므로 상업용 돼지 액상정액은 $17^{\circ}C$에서 적어도 3일간 수정능력을 만족스럽게 유지함을 보여준다.
The purpose of this study was to investigate the effect of taurine on sperm characteristics and gene expressions(bax and Gpx) in fresh boar semen during in vitro storage. The motility of spermatozoa in Modena, Modana plus taurine 25 mM, Modana plus taurine 50 mM, Modana plus taurine 75 mM and Modana plus taurine 100 mM were 63.1%, 65.1%, 65.3%, 82.5% and 80.8%, respectively. (omitted)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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