The present study was aimed to determine the effects of green tea extract (GTE) and beta-mercaptoethanol (${\beta}-ME$) supplementation in boar sperm freezing extender on in vitro fertilization (IVF) and reactive oxygen species (ROS) and glutathione (GSH) levels of presumptive zygotes (PZs). Experimental groups were allocated into lactose egg yolk (LEY) without antioxidant (control), GTE (1,000 mg/l in LEY) and ${\beta}-ME$ ($50{\mu}M$ in LEY). In freezing, spermatozoa extended with LEY were cooled to $5^{\circ}C$ for 3 h and then kept at $5^{\circ}C$ for 30 min following dilution with LEY containing 9% glycerol and 1.5% Equex STM. The final sperm concentration was $1{\times}10^8/ml$. Spermatozoa were loaded into straws and frozen in nitrogen vapor for 20 min. For IVF, oocytes were matured in NCSU-23 medium and co-cultured with spermatozoa following thawing at $37^{\circ}C$ for 25 sec. At 12 h following IVF, IVF parameters (sperm penetration and monospermy) were evaluated. In addition, GSH and ROS levels of PZs were determined by Cell Tracker Blue CMF2HC and DCHFDA, respectively. IVF parameters did not show any significant difference among the experimental groups. GSH and ROS levels of PZs were not significantly different between groups. In conclusion, antioxidant supplementation in boar sperm freezing could not influence IVF parameters, ROS and GSH levels of PZs.
Male reproductive function seems to have deteriorated considerably in the past 4 to 5 decades. It was observed a significant decline in mean sperm counts from $113{\times}10^6/ml$ in 1940 to $66{\times}10^6/ml$ in 1990; a fall of $0.94{\times}10^6/ml/year$. We reported that Yacon tuber extracts have spermatogenic effects in rat. In the present study, we tested the spermatogenic effect of Yacon tuber extracts in healthy male volunteers. Subjects were assigned randomly to the control group and the Yacon ethanol extracts administered group (each 12 subjects). And, placebo or Yacon tuber extracts (100 ml) were administered two times daily, by oral for 3 months. Sperm numbers, biochemical parameters and hormone levels were recorded before starting administration, then every month. The Yacon tuber extracts administered group showed significant time dependant increases in according to administration period. Especially, the numbers of sperm increased by 54% after 3 months of administration. And, in Yacon tuber extracts administered group, testosterone and estradiol level were significantly higher than placebo group. On the other hands, Yacon tuber extracts didn't show any toxicity in glucose and lipid metabolism and liver and kidney function. The results of the present study suggest that Yacon tuber extract is a possible therapeutic for the treatment of sperm deficiency.
This paper describes the magnetic orientation of bull sperm separated into the head and the flagellum treated by DTT or heparin in a 5,400G static field. Semen samples collected from four bulls (Japanese Black) were mixed to the same sperm density. One percentage triton X-100 was used to extract the plasma membrane. The intact and demembranated sperm suspensions were treated with 20, 200, 2,000 mM DTT, 100, 1,000 or 10,000 units heparin solutions at $4^{\circ}C$ for 6 days. The decondensation of the sperm nuclei treated by DTT or heparin was examined by measuring the head area at 1, 3 and 6 days. After measuring the area, each sample was exposed to a 5,400G static magnetic field generated by Nd-Fe-B permanent magnets for 24 hours at room temperature. Results showed that the sperms were separated into the head and the flagellum through the DTT treatment. Almost of the separated heads showed that their long axis oriented perpendicularly to the magnetic lines of force, and most of the long axis perpendicularly oriented heads showed that their flat plane oriented perpendicularly in a 5,400G magnetic field. Also, the demembranation of the head tended to increase those perpendicular orientations, while those perpendicular orientations of the head declined with the decondensation of the sperm nuclei. These findings suggest that strong magnetic anisotropy for the perpendicular orientation of the long axis and the flat plane of the head occurs in the sperm nuclei in a 5,400G magnetic field. The separated flagellum showed lower parallel orientation, and the separated and demembranated flagellum showed parallel orientation to the magnetic lines of force in this magnetic field. These findings suggest that weak magnetic anisotropy of the parallel orientation of the flagellum occurs in the inside components in a 5,400G field.
Goo, In Bon;Park, In-Seok;Gil, Hyun Woo;Im, Jae Hyun
한국발생생물학회지:발생과생식
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제19권4호
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pp.253-258
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2015
Spermiation was stimulated in the mature grass puffer, Takifugu niphobles, with an injection of human chorionic gonadotropin (HCG) or carp pituitary extract (CPE). Spermatocrit and sperm density were reduced, but milt production was increased in both the HCG and CPE treatment groups relative to those in the control group (P < 0.05). These results should be useful for increasing the fertilization efficiency in grass puffer breeding programs.
Wijerathne, Tharaka Darshana;Kim, Ji Hyun;Kim, Min Ji;Kim, Chul Young;Chae, Mee Ree;Lee, Sung Won;Lee, Kyu Pil
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제23권5호
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pp.381-392
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2019
Sperm function and male fertility are closely related to pH dependent $K^+$ current (KSper) in human sperm, which is most likely composed of Slo3 and its auxiliary subunit leucine-rich repeat-containing protein 52 (LRRC52). Onion peel extract (OPE) and its major active ingredient quercetin are widely used as fertility enhancers; however, the effect of OPE and quercetin on Slo3 has not been elucidated. The purpose of this study is to investigate the effect of quercetin on human Slo3 channels. Human Slo3 and LRRC52 were co-transfected into HEK293 cells and pharmacological properties were studied with the whole cell patch clamp technique. We successfully expressed and measured pH sensitive and calcium insensitive Slo3 currents in HEK293 cells. We found that OPE and its key ingredient quercetin inhibit Slo3 currents. Inhibition by quercetin is dose dependent and this degree of inhibition decreases with elevating internal alkalization and internal free calcium concentrations. Functional moieties in the quercetin polyphenolic ring govern the degree of inhibition of Slo3 by quercetin, and the composition of such functional moieties are sensitive to the pH of the medium. These results suggest that quercetin inhibits Slo3 in a pH and calcium dependent manner. Therefore, we surmise that quercetin induced depolarization in spermatozoa may enhance the voltage gated proton channel (Hv1), and activate non-selective cation channels of sperm (CatSper) dependent calcium influx to trigger sperm capacitation and acrosome reaction.
Humulus japonicus is an ornamental plant in the Cannabaceae family. Although the mode of action of Humulus japonicus is not fully understood, a strong relationship was observed between anti-inflammatory and anticancer in some types of cells. Recent studies also have shown that Humulus japonicus possesses anti-inflammatory activities and may significantly improve antioxidant potential in Raw 264.7 macrophage cells. Thus, the aim of this study was evaluated the effect of Humulus japonicus extract on sperm motility and subsequent preimplantation developmental competence of the bovine embryos. After in vitro maturation, the oocytes with sperms were exposed in in vitro fertilization (IVF) medium supplemented with Humulus japonicus extract (0.01, 0.05, $0.1{\mu}g/mL$, respectively) for 1 day. In our results, exposure of IVF medium to Humulus japonicus extract did not affect sperm motility and percentage of penetrated oocytes but ROS intensity was significantly decreased by $0.01{\mu}g/mL$ compared with other groups (p< 0.05). Moreover, treatment with $0.01{\mu}g/mL$ of Humulus japonicus extract was higher the frequency of blastocyst formation than the any other groups (p<0.05). Otherwise, treatment with $0.01{\mu}g/mL$ of Humulus japonicus extract not increased the total cell number but reduced apoptotic-positive nuclei number. In conclusion, our results indicate that supplementation of Humulus japonicus extract in IVF medium may have important implications for improving early embryonic development in bovine embryos.
The study aim is to investigate the free radicals scavenging and spermatogenic potentials, as well as to analyze any reproductive toxicity of ethanolic extract of Mucuna prureins (M. pruriens) Linn. in spermatozoa, under different dosages in normal male rat. Normal rats were randomly selected and suspension of the extract was administered orally at the dosages of 150, 200 and 250 mg/kg body weight of the different groups of male rats (n=6) once in a day for 60 days and grouped as group II, III and IV respectively. Saline treated rats served as control -group I. On the $60^{th}$ day the animals were sacrificed and the epididymal sperm were subjected to various analyses like level of ROS production, LPO, enzymatic and non enzymatic antioxidant, morphology, morphometry, chromosomal integrity and DNA damage. Results showed significant reduction in ROS production and peroxidation and significant increase in both enzymic and non-enzymic antioxidants in all concentration treated groups when compared with control. Results from all the drug treated groups showed good sperm morphology, increased sperm count and motility. There was no DNA damage and showed normal chromosomal integrity even in 250 mg/kg dose. When compared with control all the three extract treated groups showed increased ROS scavenging activity. However, group II (200 mg/kg) showed significant changes in all the parameters. From the present study it was confirmed that the M. pruriens has potential to improve the sperm qualitatively and quantitatively through scavenging the excess ROS with any adverse side effects. These observations suggest that ethanolic seed extract of M. pruriens may serve as anti-oxidant that can exploit to treat the oxidative stress mediated male factor infertility.
Cadmium (Cd) is well known as a spermatotoxic and gonadotoxic heavy metal ion. This study was performed to assess the possible protective effect of Enerbalance on Cd-induced spermiotoxicity and testicular damage. The control group received isotonic saline; Cd group received Cd (2 mg/kg BW per day) orally; extract-treated groups were orally administrated with Enerbalance (50 mg and 100 mg/kg BW per day) and Cd for 10 days. Morphological changes of testicular tissue, sperm characteristics, oxidative/antioxidative parameters from testis, and serum sexual hormone level were determined. Enerbalance was significantely increased sperm amount in cauda epididymis without changes of ratio of epididymis/body weight and testis/body weight. Cd caused a marked decrease in epididymal sperm concentration and chemotactic sperm motility, testicular superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), Enerbalance was significantly ameliorated loss of epididymal sperm concentration, sperm chemotactic motility, antioxidative parameters, and male hormone whereas decreased abnormal architecture by testis damage. Enerbalance was successfully attenuated these adverse effects of Cd and offers a dose-dependent protection. Our study demonstrated that Enerbalance could proffer a measure of protection against Cd-induced testicular damage and spermiotoxicity by possibly reducing oxidative stress and increasing the antioxidant defense mechanism in mice.
Objective: Oxidative stress has been suggested as a possible mechanism for the adverse effects of heavy metal toxicity on male reproduction. Cichorium intybus L. is used in Iranian folk medicine as a hepatoprotective agent as well as for its supposed fertility-enhancing properties. The present study was performed to investigate whether the ethanolic extract of C. intybus leaves could protect male rats against lead-induced testicular oxidative stress. Methods: In this experimental study, adult Wistar rats were treated with 0.1% lead acetate in drinking water alone or with 50, 100, or 200 mg/kg body weight of C. intybus extract via gavage once daily for 70 days. The weight of their reproductive organs, levels of serum hormones, histometric parameters of the seminiferous tubules, epidydimal sperm quality, and oxidative stress status were evaluated. Results: The testis weight, seminiferous tubule diameter, epididymal sperm count, serum testosterone level, and testicular levels of superoxide dismutase and glutathione peroxidase were significantly reduced (p< 0.05) in the lead-treated rats. Moreover, significantly (p< 0.05) higher levels of malondialdehyde were observed in the lead-exposed group compared to the control. However, the co-administration of C. intybus ethanolic extract in lead-treated rats was associated with a significant improvement in reproductive parameters. Conclusion: We conclude that C. intybus leaf extract has the potential to prevent lead-induced testicular toxicity and to suppress the adverse effects of lead on male reproductive health.
남성의 클라이맥스 증후군, 남성갱년기, 또는 테스토스테론 결핍 증후군은 고령화시대 남성노인들의 건강에 새로운 문제 중 하나이다. 이 현상은 나이가 들수록 남성에게서 나타나는 자연현상으로 혈중 테스토스테론 수치의 감소와 신체적 및 정신적 활동의 현저한 감소를 특징으로 한다. 이 연구의 목적은 해면체내 일산화질소(NO)와 혈액 내 남성호르몬의 수준을 비교하여 포공영(Taraxacum coreanum) 열수 추출물의 효과를 조사하였다. 포공영 추출물은 생체외 및 생체내에서 NO 생산량을 용량 의존적으로 증가시켰다. 포고영 추출물을 4 주간 섭취 한 나이든 쥐(22주)에서 다이하이드로 테스토스테론과 17-하이드록시 스테로이드 탈수소효소의 수준과 신경 인산화 질소 합성효소와 cGMP의 양은 유의하게 증가했다. 그러나 프로스타글란딘$E_2$, 테스토스테론 및 성 호르몬 결합 글로불린 수치는 모든 군에서 차이가 없었다. 또한, 총 정자 수 및 운동성 정자 수 또한 유의한 차이가 없었다. 전반적으로, 이러한 결과는 NO, cGMP 및 유리 테스토스테론을 향상시키기 위한 안전하고 효과적인 천연물질로서 Taraxacum coreanum 추출물의 가능성을 시사한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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