Development of efficient plant regeneration and genetic transformation protocols (using the Particle Inflow micro-projectile Gun and the shoot-tips as target tissue) of Sorghum bicolor (L.) Moench in terms of expression of the reporter gene, $\beta$-glucuronidase(uidA) is reported here. Two Indian cultivars of sorghum were used in the study, viz. M-35-1 and CSV-15. Plant regeneration was achieved from one-week-old seedling shoot-tip explants via multiple-shoot-clumps and also somatic embryos. The multiple-shoot-clumps were produced on MS medium containing BA (0.5, 1.0 or 2.0 mg/$L^{-1}$), with biweekly subculture. Somatic embryos were directly produced on the enlarged dome shaped expansive structures that developed from shoot-tip explants (without any callus formation) when cultured on MS medium supplemented both with BA (0.5, 1.0 or 2.0 mg/$L^{-1}$) and 2,4-D (0.5 mg/$L^{-1}$). Whereas each multiple-shoot-clump was capable of regenerating more than 80 shoots via an intensive differentiation of both axillary and adventitious shoot buds, the somatic embryos were capable of 90% germination, plant conversion and regeneration. The regenerated shoots could be efficiently rooted on MS medium containing 1.0mg/$L^{-1}$ IBA and successfully transplanted to the glasshouse and grown to maturity with a survival rate of 92%. The plant regeneration efficiency of both the genotypes were similar. After the micro-projectile bombardment, expression of uidA gene was determined by scoring blue transformed cell sectors in the bombarded tissue by an in situ enzyme assay. The optimal conditions comprising a helium pressure of 2200 K Pa, the target distance of 11 cm with helium inlet fully opened and the use of osmoticum have been defined to aid our future strategies of genetic engineering in sorghum with genes for tolerance to biotic and abiotic stresses.
Kim, Kiyoon;Kwak, Chaemin;Lee, Youngwook;Sa, Tongmin
한국토양비료학회지
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제47권1호
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pp.1-7
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2014
The objective of this study was to determine the effect of single and co-inoculation of plant growth promoting bacteria (PGPB) on early plant growth in Saemangeum reclaimed soil. Plant growth promoting Brevibacterium iodinum RS16 and Methylobacterium oryzae CBMB20 were inoculated on maize (Zea mays L.) and sorghum-sudangrass hybrid (Sorghum bicolor L.) grown in Saemangeum reclaimed soil. Single and co-inoculation of B. iodinum RS16 and M. oryzae CBMB20 increased plant height, dry biomass accumulation and macro-nutrient accumulation of maize and sorghum-sudangrass hybrid. M. oryzae CBMB20 treatment increased plant height in maize by 41.2% at 30 days after sowing (DAS), shoot dry weight and total dry weight compared to non-inoculated treatment. Macro-nutrient accumulation (N and P) in maize roots was significantly increased with co-inoculation treatment, K and Ca content was significantly increased at B. iodinum RS16 treatment compared to non-inoculated treatment. Macro-nutrient accumulation (P, K, Ca and Mg) in shoot was higher with M. oryzae CBMB20 treatment compared to non-inoculated treatment. In case of sorghum-sudangrass hybrid, co-inoculation treatment showed 33.7% increase in plant height compared to non-inoculated treatment at 30 DAS. M. oryzae CBMB20 treatment increased root dry weight and total dry weight, macro-nutrient accumulation in roots and N, Ca and Mg accumulation in shoot compared to non-inoculated treatment. P and K accumulation in shoot was significantly increased at co-inoculation treatment compared to non-inoculated treatment. This pot culture experiment demonstrated that single and co-inoculation of B. iodinum RS16 and M. oryzae CBMB20 increased the early growth and nutrient accumulation of maize and sorghum-sudangrass hybrid.
본 연구는 수수 지상부 부산물을 이용하여 제초활성을 검정하며 생물제초제로서의 개발 가능성을 알아보고자 수행되었다. 수수 지상부 분말을 토양과 혼합하여 처리했을 때 피, 바랭이, 어저귀, 털비름의 발아 억제율은 최대 40% 정도였으며 발아한 개체들의 지상부 생육억제율은 광엽잡초인 어저귀와 털비름에서 최대 30%, 화본과잡초인 피와 바랭이에서는 30% 이하로 낮게 나타났다. 수수 지상부 추출물의 발아억제 효과는 피를 제외한 바랭이, 어저귀, 털비름에서는 $25mg\;ml^{-1}$ 이상의 농도에서 크게 나타났으며, 50%의 발아를 저해하는 농도가 피에서는 $60mg\;ml^{-1}$였으나 나머지 세 초종에서는 $1060mg\;ml^{-1}$ 이하로 작게 나타났다. 경엽처리활성을 높이기 위해 선발한 11개 전착제 중 DOS70, TM15, TDE7이 가장 효과적인 것으로 나타났으며, 그 중 DOS70는 주요 잡초종을 60%까지 방제할 수 있었다. 비록 수수 지상부 부산물의 잡초방제효과가 크지는 않은 것으로 나타났지만 장기적인 처리에 의한 잡초종자 및 개체밀도의 점진적인 경감이 기대된다.
Maleic anhydride와 4-chloroaniline에 의한 amination 반응(反應)을 통하여 CPMA를 회수(回收)하고, 다시 acetic anhydride 및 sodium acetate에 의한 CPMA의 dehydration 반응(反應)을 거쳐 CPMI를 합성(合成)하였다. 생성물(生成物)의 녹는점(CPMA $200-202^{\circ}C$, CPMI $116-118^{\circ}C$) 비교(比較)와 NMR 분석(分析)을 통하여 화합물의 순도(純度)(95% 이상)를 결정(決定)하였다. 생육(生育) 초기단계(初期段階)의 수수에서 metolachlor에 의한 생육억제(生育抑制)는 근부(根部)에 비하여 지상부(地上部)에서 더욱 크게 나타났으며, 이러한 지상부(地上部)의 생육저해(生育沮害)는 종자(種子)에 CPMI를 피복처리(被覆處理)한 경우에 뚜렷한 감소(減少)를 보였다. CPMI를 수수 종자(種子) 1kg당 1.2g의 수준(水準)으로 종자(種子)에 피복처리(被覆處理)한 경우에 가장 높은 약해경감(藥害輕減) 활성(活性)을 나타내었으며, 지상부(地上部)의 50% 생육억제(生育抑制)를 나타내는 metolachlor의 농도(濃度)($GR_{50}$치(値))로 표시한 약해경감지수(藥害輕減指數)는 무처리종자(無處理種子)($15\;{\mu}M$)에 비하여 피복처리(被覆處理) 종자(種子) ($53\;{\mu}M$) 에서 약 3배 정도 증대(增大)되었다. CPMI의 처리(處理) 여부에 관계없이 [$^{14}C$]metolachlor의 흡수(吸收)에는 차이(差異)가 인정(認定)되지 않았다. CPMI를 피복처리(被覆處理)한 수수에서 metolachlor의 부활성화(不活性化)가 촉진되어 수수내의 흡수(吸收)된 metolachlor의 대부분이 빠른 시간내에 glutathione과의 결합(結合)을 통하여 대사(代謝) 또는 해독(解毒)되었다.
An efficient, rapid and large-scale in vitro clonal propagation of agronomically important Indian cereal crop genotypes (NSH27 & K5) of Sorghum bicolor (L.) Moench. by enhanced shoot proliferation in shoot tip segments was designed. MS medium fortified with plant growth regulators and coconut water markedly influenced in vitro propagation of Sorghum bicolor. In vitro plantlet production system has been investigated on Murashige and Skoog (MS) medium with the synergistic combination of 6-benzyladenine ($22.2\;{\mu}M$), kinetin ($4.6\;{\mu}M$), adenine sulphate ($2.8\;{\mu}M$), 5% coconut water and 3% sucrose which promoted the maximum number of shoots as well as beneficial shoot length. Subculturing of shoot tip segments on a similar medium enabled continuous production of more than 100 healthy shoots with similar frequency. When the healthy shoot clumps were cultured on MS medium fortified with 6-benzyladenine ($22.2\;{\mu}M$), kinetin ($4.6\;{\mu}M$), adenine sulphate ($2.8\;{\mu}M$), ${\alpha}$-naphthaleneacetic acid ($2.7\;{\mu}M$), ascorbic acid ($30.0\;{\mu}M$) and 5% coconut water, a rapid production of axillary and adventitious buds was developed after 8 wk culture. More than 300 shoots were produced 10 wk after culture. Rooting was highest (100%) on half strength MS medium containing 22.8 mM IAA. Micropropagated plants established in garden soil, farmyard soil and sand (2:1:1) were uniform and identical to the donor plant with respect to growth characteristics. These plants grew normally without showing any traits.
Herbicidal effects and crop selectivity of aqueous leaf extracts of sorghum (Sorghum bicolor L.) were evaluated against several weed species for developing sustainable weed management in organic farming. Aqueous sorghum leaf extracts were highly phytotoxic to different weed species. No broadleaf weeds were germinated in the concentration of 5 fold or higher concentrated sorghum leaf extracts and 90% of seed germination was inhibited within that range in grass species. Sorghum leaf extracts strongly inhibited the growth of different weeds by pre-emergence and foliar applications in greenhouse condition. Foliar application of sorghum leaf extracts had a higher inhibitory effect than the pre-emergence application. Broadleaf weed species were more susceptible than grasses to the application of sorghum leaf extract in foliar applications than grasses. Galium spurium, Erigeron candensis, and Rumex japonicus were completely killed at the highest concentrated sorghum leaf extract both in pre-emergence and foliar application. Most broadleaf weed species were inhibited more than 80% at pre-emergence application at 50 fold concentrated sorghum leaf extract. G. spurium, E. candensis, R. japonicus, Eclipta alba, Plantago asiatica and Portulaca oleraeea were most susceptible to sorghum leaf extract in foliar application. Growth of most broad leaf weed species was suppressed by greater than 90% at 50 fold concentrated sorghum leaf extract. Most crop species were tolerant to sorghum leaf extract but shoot growth was slightly reduced by the application of 40~50 fold concentrated extracts, Sorghum leaf extract may used to control weeds in organic fanning without affecting the growth of crop.
Appropriate water level is the primary factor for the optimal yield of crop plants. The required water level varies according to the variety of the crops. In the present study, we investigated the optimum requirement of groundwater level(GWL) to grow sorghum and adzuki bean under paddy field soil. Here, we cultivated sorghum and adzuki bean using lysimeter filled with paddy soil under GWL 0 cm(NT) and GWL(20, 40 cm) where GWL 20 cm is maintained as a waterlogging condition. The plant growth promoting attributes were measured on the first day after treatment(0 DAT), 10 DAT and 20 DAT. The results showed that the growth parameter such as shoot length, leaf length, leaf width, and stem thickness of both sorghum and adzuki bean were constantly increased and were found higher at GWL 40 cm(except stem thickness and leaf width in sorghum at 20 DAT). The physiological parameters such as chlorophyll content and stomatal conductance were also found higher at GWL 40 cm in all DAT. In addition, the elements like P and K contents in adzuki bean, and Ca content in sorghum were constantly increased and was found higher in GWL 40 cm at all DAT. These results suggest that the GWL of 40 cm is appropriate for production of sorghum and adzuki bean especially in case of paddy soil.
To define the relations between endogenous GA levels and growth and flowering in short-day plant sorghum, growth retardant BX-112 was applied to two sorghum genotypes, wild-type and phytochrome B mutant (phyB-1), which grows faster and flowers earlier than the wild-type. BX-112 and $GA_3$ were applied as a soil drench, and plant height, culm length, and date to floral initiation were investigated. Endogenous GAs contents were measured with GC-MS-SIM. BX-112 treatments inhibited shoot growth in both genotypes and drastically reduced $GA_1$ and $GA_8$ levels. With increasing BX-112 concentrations, $GA_1$ concentrations declined linearly, but caused the accumulation of intermediates from $GA_12$ to $GA_20$. This result implies that $GA_1$ is the major active endogenous GA in shoot elongation in a short day plant sorghum. The inhibition of plant growth in both of wild type and phyB-1 by BX-112 was very similar, while BX-112 effects on floral initiation in two types of plants differed significantly. Floral initiation of phyB-1 was not affected by BX-1l2, but that of wild-type was delayed as BX-1l2 concentration increased. Because BX-112 treatment causes accumulation of biosynthetic intermediates between synthetic pathway from $GA_12$ to $GA_20$ and because phyB-1 is altered in GA metabolism in this same region of the early C13-hydroxylation pathway, BX-112 may fail to block flowering of phyB-1.
본 시험은 사료용 수수${\times}$수단그라스 교잡종의 파종방법 및 제초제 종류에 따른 약해 및 생산성을 비교하여 안전 재배기술을 개발하고자 국립축산과학원 초지사료과 시험포장에서 수행하였다. 제초제 종류별 수수${\times}$수단그라스 교잡종의 in vitro 조건에서 발아율 분석결과 control > simazine > methaventhiazuron > alachlor 순으로 나타났으며 alachlor 처리시 shoot의 길이는 1~1.3 cm 범위로 무처리 4.37 cm와 비교했을 때 약 1/4배 정도로 짧은 것으로 나타났으며 root는 발생되지 않은 것으로 보아 alachlor는 shoot 보다 root에 약해를 더 심하게 주는 것을 확인할 수 있었다. 포장시험에서 제초제 종류에 따른 약해는 in vitro 시험과 마찬가지로 alachlor에서 가장 심하게 나타났으며 파종방법에서는 조파가 약해를 더 적게 받는 것으로 나타났다. 잔주수의 경우 alachlor와 simazine + alachlor에서 적었으며 제초제 처리시 파종방법에 따라 조파의 경우보다 산파에서 alachlor와 simazine + alachlor 처리에 따른 잔주수 감소가 더 크게 나타났다. 건물수량의 경우 제초제 종류별로 보면 조파의 경우 simazine과 methabenzthiazuron에서 각각 무처리 대비 101%와 99%의 수량을 보였고 alachlor와 simazine + alachlor에서는 각각 무처리 대비 32%와 56%였다. 산파의 경우 simazine과 methabenzthiazuron에서 각각 무처리 대비 89%와 84%의 수량을 보였고 alachlor와 simazine + alachlor에서는 각각 무처리 대비 13%와 29%로 나타났으며, alachlor 보다 simazine과 methabenzthiazuron이 건물수량 감소가 적었으며 제초제 처리시 산파보다 조파가 alachlor에 대한 약해를 덜 받는 것으로 나타났다. TDN 수량 역시 건물수량과 비슷한 경향을 보였으며 alachlor와 simazine + alachlor 모두에서 TDN 수량이 가장 낮게 나왔으며 제초제 처리시 산파보다는 조파의 경우가 제초제 시용에 따른 수량감소가 적은 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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