Effects of divalent cations such as $Mg^{2+}$, $Mn^{2+}$, $Ca^{2+}$, and $Zn^2$ on splicing activity of phage T4 thymidylate synthase intron RNA have been investigated. At the concentration of 0.5 mM, $Mn^{2+}$ in the absence of $Mg^{2+}$, a very small amount of pre-RNA was cleaved into ligation products (El-E2) but no circular or linear intron was produced. As the concentration of $Mn^{2+}$ was increased from 1 to 5 mM the pre-RNA was completely hydrolyzed. In the presence of 5 mM $Mg^{2+}$, both the linear intron and circular intron were produced but no El-E2 ligation product was produced. At both 3 and 5 mM $Mn^{2+}$ the RNA was hydrolyzed completely as observed with no $Mg^2+$ being present. In the case of $Zn^{2+}$, even at 0.5 mM concentration, the pre-RNA was completely hydrolyzed. This observation suggested that $Zn^{2+}$ facilitates RNA hydrolysis more rapidly than $Mn^{2+}$ does. at 5mM $Ca^{2+}$, the RNA was not hydrolyzed and remained intact as a primary transcript.
The purpose of this study was to explain the pathology of Alzheimer's disease (AD) and to investigate the correlation between AD and microRNA. AD is the most common type of dementia, accounting for about 80% of all types of dementia, causing dysfunction in various daily activities such as memory loss, cognitive impairment, and behavioral impairment. The typical pathology of AD is explained by the accumulation of beta-amyloid peptide plaques and neurofibrillary tangles containing hyperphosphorylated tau protein. On the other hand, microRNA is small non-coding RNA 22~23 nucleotides in length that binds to the 3' untranslated region of messenger RNA to inhibit gene expression. Many reports explain that microRNAs found in circulating biofluids are abundant in the central nervous system, are involved in the pathogenic mechanism of AD, and act as important factors for early diagnosis and therapeutic agents of AD. Therefore, this paper aims to clarify the correlation between AD and microRNA. In this review, the basic mechanism of miRNAs is described, and the regulation of miRNAs in the pathological processes of AD are highlighted. Furthermore, we suggest that miRNA-based system in development of therapeutic and diagnostic agents of AD can be a promising tool.
Plant viruses are responsible for worldwide production losses of numerous economically important crops. The most common plant RNA viruses are positivesense single-stranded RNA viruses [(+)ss RNA viruses]. These viruses have small genomes that encode a limited number of proteins. The viruses depend on their host's machinery for the replication of their RNA genome, assembly, movement, and attraction to the vectors for dispersal. Recently researchers have reported that chloroplast proteins are crucial for replicating (+)ss plant RNA viruses. Some chloroplast proteins, including translation initiation factor [eIF(iso)4E] and 75 DEAD-box RNA helicase RH8, help viruses fulfill their infection cycle in plants. In contrast, other chloroplast proteins such as PAP2.1, PSaC, and ATPsyn-α play active roles in plant defense against viruses. This is also consistent with the idea that reactive oxygen species, salicylic acid, jasmonic acid, and abscisic acid are produced in chloroplast. However, knowledge of molecular mechanisms and functions underlying these chloroplast host factors during the virus infection is still scarce and remains largely unknown. Our review briefly summarizes the latest knowledge regarding the possible role of chloroplast in plant virus replication, emphasizing chloroplast-related proteins. We have highlighted current advances regarding chloroplast-related proteins' role in replicating plant (+)ss RNA viruses.
In this study, we determined the cause of a disease outbreak in small yellow croaker(Larimichthys polyactis) in Jeju island. The major external signs in the dead fish were hemorrhage of the skin. Vibrio harveyi were isolated from a few fishes and viruses were not detected from the diseased fish. However, flukes were confirmed on the skin and we conducted molecular identification and phylogenetic analysis of the isolated parasites. The obtained 28S rRNA sequence of our specimen(Accession No. OM333244) showed the highest homology with Neobenedenia girellae, while the COI sequence of our specimen showed the highest homology with N. melleni. Further sequence analysis with other genes and morphological observation are necessary for accurate identification.
The effects of K$^{+}$ ion on the activity of RNA splicing of T4 phage thymidylate synthase gene have been investigated. The splicing activity was stimulated within the range of 5 to 20 mM concentration of KCI. When the concentration of KCI in the splicing reaction was brought to 100 or 200 mM a small amount of the exonl-intron product (1, 4 kb) was formed with large proportion of primary RNA transcript not undergoing splicing. This observation strongly suggests that there may exist come kinds of interferences with transesterification at the first step of splicing. Overall it can be concluded that K$^{+}$ ion exhibits very unique roles in RNA splicing of tdd gene depending on its concentration.ion.
Escherichia coli RNase P is composed of a large RNA subunit (M1 RNA) and a small protein subunit (C5 protein). Since both subunits are assembled in a 1:1 ratio, expression of M1 RNA and C5 protein should be coordinately regulated for RNase P to be efficiently synthesized in the cell. However, it is not known yet how the coordination occurs. In this study, we investigated how overexpression of C5 protein affects expression of the rnpB gene encoding M1 RNA, using a lysogenic strain, which carries an rnpB-lacZ transcription fusion. Primer extension analysis of rnpB-lacZ fusion transcripts showed that the overexpression of C5 protein increased the amount of the fusion transcripts, suggesting that rnpB expression increases with the increase of intracellular level of C5 protein.
Soybean plants infected with Bean pod mottle virus (BPMV) develop acute symptoms that usually decrease in severity over time. In other plant-virus interactions, this type of symptom recovery has been associated with degradation of viral RNAs by RNA silencing, which is accompanied by the accumulation of virus-derived small interfering RNAs (siRNAs). In this study, changes in the accumulation of BPMV siRNAs were investigated in soybean plants infected with BPMV alone, or infected with both BPMV and Soybean mosaic virus (SMV) and in transgenic soybean plants expressing SMV helper component-protease (HC-Pro). In many potyviruses, HC-Pro is a potent suppressor of RNA silencing. In plants infected with BPMV alone, accumulation of siRNAs was positively correlated with symptom severity and accumulation of BPMV genomic RNAs. Plants infected with both BPMV and SMV and BPMV-infected transgenic soybean plants expressing SMV HC-Pro exhibited severe symptoms characteristic of BPMVSMV synergism, and showed enhanced accumulation of BPMV RNAs and siRNAs compared to plants infected with BPMV alone and nontransgenic plants. Likewise, SMV HC-Pro enhanced the accumulation of siRNAs produced from a silenced green fluorescent protein gene in transient expression assays, while the P19 silencing suppressor of Tomato bushy stunt virus did not. Consistent with the modes of action of HC-Pro in other systems, which have shown that HC-Pro suppresses RNA silencing by preventing the unwinding of duplex siRNAs and inhibiting siRNA methylation, these studies showed that SMV HC-Pro interfered with the activities of RNA-induced silencing complexes, but not the activities of Dicer-like enzymes in antiviral defenses.
순천만 갯벌의 세균 군집의 다양성을 조사하기 위해 16S rDNA의 다양성을 조사하였다. 갯벌로부터 전체 핵산을 분리한 후, 세균에 상보적인 universal primer로 증폭된 16S rDNA로부터 클론 라이브러리를 만들었다. 총 111개의 클론으로부터 HaeIII를 이용하여 amplified rDNA restriction analysis (ARDRA)를 수행하고, Gelcompar II 프로그램을 이용하여 pattern을 clustering하였다. 111개의 클론 중 100가지의 서로 다른 RFLP type이 조사되었고, 이들 중 전체 클론 라이브러리를 대표할 수 있는 20개의 클론을 선별하여 부분적인 염기서열을 분석하여 세균 다양성을 분석하였다. 20개의 클론중에는 RDP와 GenBank에서 제공하는 small subunit RNA database와 동일한 클론은 존재하지 않았으며, 이미 알려진 배양 가능한 세균의 16S rRNA 염기서열과 비교 하였을때 77∼96.8%의 유사도를 보였다. 또한 이들 20개의 클론은 alpha-, delta-, gamma-Proteobacteria, low G+C Gram positive bacteria, high G+C Gram positive bacteria, Sphingobacteria (Cytophaga); Cyanobacteria (Chloroplast)등 주요한 7개 lineage에 속했으며, 클론들 중 Proteobacteria가 우점종을 차지하고 있었다.
Lim, Hyun-Joo;Kim, Hyun Jong;Lee, Ji Hwan;Lim, Dong Hyun;Son, Jun Kyu;Kim, Eun-Tae;Jang, Gulwon;Kim, Dong-Hyeon
한국동물생명공학회지
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제36권1호
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pp.35-44
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2021
A pregnancy diagnosis is an important standard for control of livestock's reproduction in paricular dairy cattle. High reproductive performance in dairy animals is a essential condition to realize of high life-time production. Pregnancy diagnosis is crucial to shortening the calving interval by enabling the farmer to identify open animals so as to treat or re-breed them at the earliest opportunity. MicroRNAs are short RNA molecules which are critically involved in regulating gene expression during both health and disease. This study is sought to establish the feasible of circulating miRNAs as biomarkers of early pregnancy in cattle. We applied Illumina small-RNA sequencing to profile miRNAs in plasma samples collected from 12 non-pregnant cows ("open" cows: samples were collected before insemination (non-pregnant state) and after pregnancy check at the indicated time points) on weeks 0, 4, 8, 12 and 16. Using small RNA sequencing we identified a total of 115 miRNAs that were differentially expressed weeks 16 relative to non-pregnancy ("open" cows). Weeks 8, 12 and 16 of pregnancy commonly showed a distinct increase in circulating levels of miR-221 and miR-320a. Through genome-wide analyses we have successfully profiled plasma miRNA populations associated with pregnancy in cattle. Their application in the field of reproductive biology has opened up opportunities for research communities to look for pregnancy biomarker molecules in dairy cattle.
Aim: Connexin 43 (Cx43) and E-cadherin are important biomarkers related with cancer. Their expression at protein and mRNA levels was here investigated in 50 primary lung carcinoma tissues and 20 samples of adjacent normal tissue of Chinese patients with non-small cell lung cancer (NSCLC). Methods: Protein and mRNA expression were evaluated by ABC immunohistochemistry and RT-PCR. Results: (1) The positive expression rates of Cx43 and E-cadherin protein were higher in the adjacent normal tissues than those in the primary lung carcinoma tissues; (2) the positive expression rates of Cx43 and E-cadherin protein decreased with NSCLC progression; (3) the expression of E-cadherin protein was not related with the pathological type of NSCLC; and (4) the relative quantity of the Cx43 or E-cadherin mRNA expression was correlated with the the histological type, clinical stage, cancer cell differentiation and the lymph node metastasis. Conclusion: The data suggested that the Cx43 and E-cadherin are reduced with NSCLC progression, and might be important biomarkers for judging the metastasis and prognosis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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