감초(Glycyrrhiza inflata)의 뿌리에서 분리된 Licochalcone (LC)은 항염증 및 항종양과 같은 많은 약리학적 효과를 가지고 있다. 현재까지 LCC는 구강암과 방광암에서 연구되었지만 폐암에서의 연구는 밝혀진 바 없다. 또한, 암에서 LCC에 의해 유도된 autophagy에 대한 연구는 없었다. 본 연구는 gefitinib-민감성 또는 내성을 갖는 폐암 세포에 대한 LCC의 효과 및 작용 메커니즘을 조사하기 위해 고안되었다. MTT 분석 데이터는 LCC가 비소세포폐암 세포주인 HCC827 (gefitinib-민감성) 및 HCC827GR (gefitinib-내성)에서 세포생존율을 유의하게 억제함을 보여주었다. 흥미롭게도, Annexin V/7-aminoactinomycin D 이중 염색 및 세포주기 분석에서 가장 높은 농도의 LCC 처리는 apoptosis를 유도하는 비율이 약 10%였다. LCC는 비소세포폐암 세포주에서 세포주기 G2/M 관련 단백질인 cyclin B1 및 cdc2의 발현을 감소시킴으로써 G2/M 정지를 야기하였다. LCC의 처리는 autophagy marker 단백질인 microtubule-associated protein 1 light chain 3 (LC3) 및 autophagy과정에 관여하는 단백질인 autophagy-related gene (Atg)5의 발현을 증가시킴으로써 autophagy를 유도하였다. 또한, LCC는 reactive oxygen species (ROS)의 생성을 증가시켰으며, ROS 억제제인 N-acetyl-L-cysteine (NAC)에 의해 세포생존율이 부분적으로 회복되었다. Western blotting 분석에서, NAC과 LCC의 동시처리에 의해 cdc2의 발현이 증가하고 LC3의 발현은 감소되었다. 이러한 결과는 LCC가 비소세포폐암에서 ROS-의존적 G2/M 정지 및 autophagy를 유도함으로써 항종양 효과에 기여할 수 있음을 나타낸다. 결론적으로, LCC 치료는 비소세포폐암에 대한 잠재적 치료제로서 유용할 수 있다.
Sheep and goats in Pakistan have not been able to produce to the best of their potential. This may primarily be attributed to under feeding and malnutrition. Ranges have been depleted due to overgrazing and mismanagement and are not in position to feed the existing small ruminant population. To overcome the shortage of good quality fodder and balanced feed supply, the alternate means like cereal straws and other crop residues are being commonly used. Sunflower crop residues like stalks and heads provide a good quality forage for livestock. These crop byproducts are rich in crude protein and lower in crude fibre. Their inclusion in the diet of small ruminants at 20, 30 and 40 percent levels in ration has shown significantly (p < 0.05) increased feed intake and weight gain. Daily feed intake was 1,130, 1,180 and 1,750 g for sunflower crop residue, soybean crop residue and wheat straw, respectively, when added at the rate of 20 percent in the ration. The drymatter digestibility of sunflower, soybean crop residues and wheat straw was also comparable. The maximum performance of the animals was observed at the 20 percent level of inclusion of sunflower crop residue in the diet.
Although growth rate is one of the main economic traits of concern in pig production, there is limited knowledge on its epigenetic regulation, such as DNA methylation. In this study, we conducted methyl-CpG binding domain protein-enriched genome sequencing (MBD-seq) to compare genome-wide DNA methylation profile of small intestine and liver tissue between fast- and slow-growing weaning piglets. The genome-wide methylation pattern between the two different growing groups showed similar proportion of CpG (regions of DNA where a cytosine nucleotide occurs next to a guanine nucleotide in the linear sequence) coverage, genomic regions, and gene regions. Differentially methylated regions and genes were also identified for downstream analysis. In canonical pathway analysis using differentially methylated genes, pathways (triacylglycerol pathway, some cell cycle related pathways, and insulin receptor signaling pathway) expected to be related to growth rate were enriched in the two organ tissues. Differentially methylated genes were also organized in gene networks related to the cellular development, growth, and carbohydrate metabolism. Even though further study is required, the result of this study may contribute to the understanding of epigenetic regulation in pig growth.
Chrysanthemum boreale Makino is widely distributed in Korea, China, Japan and Southeast Asian countries. C. boreale is one of the herbs used for treating various inflammatory diseases in oriental medicine. The present study was conducted to identify biologically active compounds from the leaves and stems of C. boreale. We isolated two sesquiterpene sactones from the leaves and stems of C. boreale using silica gel column chromatography and recyclic high perfomance liquid chromatography. The lactones were characterized by their spectroscopic data (NMR, IR, MASS). These compounds were subjected to Farnesyl Protein Transferase (FPTase) inhibition, Nitric Oxide (NO) release inhibition and apoptosis inhibition. The structur of the following isolated compound were elucidated 8,10-${\small{O}$-Acetyl-2-methoxy-10-hydroxy-3,11(13)-guaiadiene-12,6-olide and 4,10-dihydroxy-8-${\small{O}$-Acetyl-2,11(13)-guaiadiene-12,6-olide. In the NO release inhibition assay, compound 2 showed strong activities, with an $IC_{50}$ value of $7{\mu}g/mL$, whereas compound 1 did not exhibit significant activity with an $IC_{50}$ value of over $14{\mu}g/mL$ against murine macrophage.
We studied the modulation of pacemaker activities by Samchulkunbi-tang (SCKB) in cultured interstitial cells of Cajal (ICC) from murine small intestine with the whole-cell patch-clamp technique. Externally applied SCKB produced membrane depolarization in the current-clamp mode. The pretreatment with $Ca^{2+}$-free solution and thapsigargin, a $Ca^{2+}$-ATPase inhibitor in endoplasmic reticulum, abolished the generation of pacemaker potentials and suppressed the SCKB-induced action. The application of flufenamic acid (a nonselective cation channel blocker) abolished the generation of pacemaker potentials by SCKB. However, the application of niflumic acid (a chloride channel blocker) did not inhibit the generation of pacemaker potentials by SCKB. In addition, the membrane depolarizations were inhibited by not only GDP-${\beta}$-S, which permanently binds G-binding proteins, but also U-73122, an active phospholipase C inhibitor. These results suggest that SCKB modulates the pacemaker activities by nonselective cation channels and external $Ca^{2+}$ influx and internal $Ca^{2+}$ release via G-protein and phospholipase C-dependent mechanism. Therefore, the ICC are targets for SCKB and their interaction can affect intestinal motility.
Mulberry leaves(Mori folium) and silkworm(Bombyx mori) are potnet inhibiters of intestinal $\alpha$-glycosidase, and inhibit the digestion of starch and sucrose in the small intestine. They are able to prevent postprandial hyperglycemia and decrease blood insulin levels. In this study , a high-carbohydrate diet(CHO ; 67.5%, protein ; 20.8%, fat : 11.7%) was received by the control group. In contrast, the experimental groups received a high-carbohydrate diet with extracts of mulberry leaves and silkwork(50mg.100g diet), and acarbose(6.7mg/100g diet). after a 10 week study period , the experimental groups had lower blood glucose and triglyceride levels. The experimental groups tended to have lwer Hb Alc levels. Also, blood insulin levels were lower than the control groups in accordance with blood glucose levels. The activities of intestinal $\alpha$-glucosidase in the middle and distal parts of small intestine were induced by the extracts of mulberry leaves and silkworm in the experimental groups. However, the activities of liver lysosomal glucosidase and the contents of glycogen in the liver were not affected by the mulberry leave and silkworm extracts nor by acarbose. Mulberry leaves and silkworm were able to prevent sudden postprandial peaks in blood glucose as a result of $\alpha$-glycosidase, inhibition, there by decreasing unnecessary insulin secretion.
Heat shock protein 90 (Hsp90) is a ubiquitous molecular chaperone, which is associated with stabilization of many oncogenic proteins for cancer cell survival. Hsp90 is overexpressed 2-10 fold higher in cancer cells than normal cells. Due to its potential to simultaneously disable multiple signaling pathway, Hsp90 has been identified as a validated target for cancer therapy. Accordingly, we designed and synthesized 2',4'-dimethoxychalcone derivatives to inhibit Hsp90 chaperone function. Among 2',4'-dimethoxychalcone derivatives, we found that compound 1g disrupted Hsp90 chaperoning function and impaired the growth of cancer cells. These findings indicated that 1g could serve a potential lead compound to target Hsp90 in cancer chemotherapy.
Stress granules (SGs) are cytoplasmic aggregates of RNA-protein complexes that form in response to various cellular stresses and are known to restrict viral access to host translational machinery. However, the underlying molecular mechanisms of SGs during viral infections require further exploration. In this study, we evaluated the effect of SG formation on cellular responses to coxsackievirus B3 (CVB3) infection. Sodium arsenite (AS)-mediated SG formation suppressed cell death induced by tumor necrosis factor-alpha (TNF-a)/cycloheximide (CHX) treatment in HeLa cells, during which G3BP1, an essential SG component, contributed to the modulation of apoptosis pathways. SG formation in response to AS treatment blocked CVB3-mediated cell death, possibly via the reduction of mitochondrial reactive oxygen species. Furthermore, we examined whether AS treatment would affect small extracellular vesicle (sEV) formation and secretion during CVB3 infection and modulate human monocytic cell (THP-1) response. CVB3-enriched sEVs isolated from HeLa cells were able to infect and replicate THP-1 cells without causing cytotoxicity. Interestingly, sEVs from AS-treated HeLa cells inhibited CVB3 replication in THP-1 cells. These findings suggest that SG formation during CVB3 infection modulates cellular response by inhibiting the release of CVB3-enriched sEVs.
신선한 젓새우(Acetes japonicus)를 재료로 하여 상법에 의해 젓갈을 담근후 실온에서 3개월간 숙성시켰다. 숙성 도중 어육단백질의 특성 변화를 검토해 본 결과, 가용성 단백질의 추출율은 숙성 초기보다 1개월 숙성품이 다소 떨어지나 그 이후는 점차 증가되었다. 10% TCA 가용성 획분은 숙성 1개월 이후 서서히 증가되며 총 가용성단백질에 대한 백분율도 점차 증대되었다. Sephadex G-100에 의한 gel 여과 pattern은 숙성 초기의 것은 6개의 크고 작은 peak를 나타내고 있으나 숙성 1개월 이후에는 뒷쪽의 peak 4개는 사라지고 다시 숙성기간이 흐름에 따라 남은 두 peak중 앞쪽의 것은 점차 편만해지는 경향을, 그리고 뒤의 것은 다시 두개의 peak로 분해되면서 유출속도가 늦어지는 경향을 나타내었다. Polyacrylamide gel 전기영동의 pattern은 숙성 초기의 것은 2개의 뚜렷한 band와 4개의 희미한 band를 나타내었으나 숙성 1개월 이후부터는 뚜렷했던 band들이 가느다란 band들로 포개어져 분산되는 현상을 나타내었다. 이들 band들은 숙성기간이 흐름에 따라 더욱 희미해지는 경향을 나타내었다. 총 유리아미노산의 함량은 숙성 1개월에는 감소되었다가 그 이후에는 다시 증가되었으며 유리아미노산/가용성 단백질의 비는 숙성 도중 계속 증대되다가 숙성 8개월에 다소 감소되는 경향을 나타내었으나 유리아미노산/10% TCA 가용성 획분의 비는 숙성기간중 계속 감소되는 경향을 나타내었다. 숙성기간중 대부분의 유리아미노산 함량은 숙성 1개월에 급격히 증가되어 2배 정도에 이르렀으나 histidine과 arginine은 숙성 1개월에 급격히 감소되었다. 새우젓에 많은 함량을 가지고 있는 glycine과 arginine은 숙성기간중 조성 변화가 일정하지 않았다. 암모니아 함량은 숙성 1개월 이후에 현저히 증가되었다. 젓갈의 pH도 숙성기간중 서서히 증가되었다.
The genesis of methods for defining the nutritional value of feeds and the nutrient requirements of animals, and their development in the late 19th and early 20th centuries in Europe and the USA are outlined. Current energy and protein feeding systems for ruminants are described. Particular reference is made to the Australian systems which are applicable to grazing animals as well as to those given prepared feeds, and enable the effective nutritional management of a imals at pasture by means of the decision support tool GrazFeed. The scheme for predicting intakes by cattle and sheep from pastures allows for the effects of selective grazing on the composition of the feed eaten, and for reduction in herbage intake when a supplementary feed is consumed. For herbage of any given concentration of metabolizable energy (ME) in the feed dry matter the changes with season of year in the net efficiency of use of the ME for growth and fattening and in the yield of microbial crude protein, g/MJ ME, which both vary with latitude, are defined. An equation to predict the energy requirements for maintenance (MEm) of both cattle and sheep includes predictions of the additional energy costs incurred by grazing compared with housed animals and the cost, if any, of cold stress. The equation allows for the change in MEm with feed intake. A flexible procedure predicts the composition of liveweight gain made by any given breed or sex of cattle and sheep at any stage of growth, and the variation with rate of gain. Protein requirements for maintenance, production including wool growth, and reproduction, are related to the quantities of microbial true protein and undegraded dietary protein truly digested in the small intestine.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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