• 제목/요약/키워드: Slow-freezing

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유리화 방법에 의한 난자와 수정란의 동결보존 (Cryopreservation of Oocytes and Embryos by Vitrification)

  • 무케쉬 쿠마르 굽타;이훈택
    • Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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    • 제37권4호
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    • pp.267-291
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    • 2010
  • 최근 동결기술이 발달하면서 다양한 목적에 따라 초기 발생단계, 특히 수정 전후의 난자나 수정란의 생명을 연장하는 것이 가능해졌다. 이러한 난자나 수정란의 보존기술은 인간의 수정능력을 배가시키거나 임신조절에서 응용되고 있으며, 동물에서는 우수한 유전자원의 보존과 운영, 저렴한 국제간 운송수단, 그리고 생식보조기술과 유전공학 등의 연구에 필요한 생식세포의 공급하는 데서도 중요하게 활용되고 있다. 최근 개발된 완만동결과 유리화 동결방법은 난자와 수정란을 장기간 동결하여 보존하는데 활용하는 주요 기술이다. 이러한 방법들은 각각 장점과 단점을 가지고 있지만, 상당한 수준의 효율성이 입증되어 실용화되어 있는 실정이다. 무엇보다도 유리화 방법은 완만동결 방법보다 13년이나 늦게 개발되었으나 보다 우수한 기술로 인정을 받고 있다. 비록 유리화 동결은 아직 대한 상반된 의견과 오염문제가 있지만 인간과 동물의 생식보조기술로 활용되는 빈도가 점차 많아지고 있는 실정이다. 따라서 본 원고에서는 먼저 난자와 수정란의 동결보존에 대한 기초적인 기술에 대해서 고찰한 다음, 유리화 동결에 관 한 최근의 연구동향에 대해서 종합적으로 검토하고자 한다.

식육의 동결, 냉동냉장 및 해동시 내부압력 변화 (Changes of Internal Pressure during Freezing, Frozen Storage and Thawing of Meats)

  • 정진웅;김종훈
    • 한국식품과학회지
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    • 제31권3호
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    • pp.682-687
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    • 1999
  • 식품동결에 의한 품질손상에 있어 크게 영향을 미치는 인자중의 하나가 체적변화에 의한 조직 파괴이므로 본 연구에서는 압력변환기를 사용하여 식육의 동결, 냉동냉장 및 해동시에 일어나는 내부압력을 조사하였다. 그 결과, 우육은 $-20^{\circ}C$에서 밀도는 $942.17\;kg/cm^2$으로, 체적은 6.33% 증가하였으며, 급속 및 완만동결시 우육의 내부압력 변화 경향은 동결 직전에 급격히 상승한 후 동결 초기부터 최대빙결정생성대를 통과하는 동안은 급격히 감소하다가 다시 온도가 내려감에 따라 압력변화는 증가와 감소를 반복하여 상승하는 경향을 보여 주었고, 동결시의 내부압력 크기는 약 $8{\sim}10\;psig$ 수준이며, 내부압력의 변화 경향은 정지공기식보다 침지식에서 약 1 psig 정도 크게 나타났다. 냉동냉장시에 일어나는 내부압력의 상하변화는 돈육의 품온차가 ${\pm}1^{\circ}C$일 때, 시료중량에 마라 $1.84{\sim}2.32\;psig$ 정도의 내부압력 차가 반복적으로 발생됨을 알 수 있었다. 또한, 돈육의 해동시 내부압력은 해동 개시 후 급격히 상승하여 5분 이내에 최고압력에 도달한 이후에는 서서히 하강하였으며, 해동시에 발생한 내부압력의 값은 동결시의 내부압력 값보다도 대부분 크게 나타났다. 또한, 균온처리한 우육의 동결시 내부 압력 값은 약 $1{\sim}4\;psig$ 수준으로 균온처리하지 않은 우육에 비하여 매우 적게 나타났으며, 동결소요시간도 약 $10{\sim}20%$ 정도 짧게 나타났다.

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한우 체외수정란의 체외배양, 동결보존 및 이식에 관한 연구 II. 한우 체외수정란의 동결 및 융해 후 생존율에 영향을 미치는 요인 (Studies on In Vitro Culture, Freezing and Transfer of Korean Native Cattle Embryos Fertilized In Vitro H. Factors Affecting on Survival Rate of Frozen-Thawed Korean Native Cattle Embryos Fertilized In Vitro)

  • 김일화;손동수;이호준;최선호;양병철;이광원;장인호
    • 한국수정란이식학회지
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    • 제11권2호
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    • pp.125-135
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    • 1996
  • The present study was carried out to investigate the effects of cryoprotectants, equilibration step, freezing rate, culture condition following in vitro fertilization, and age and development stage of embryo by freezing with conventional slow freezing and vitrification on survival of frozen-thawed Korean native cattle(KNC) blastocysts produced in vitro. The KNC blastocysts produced in vitro were equilibrated in 1.8M ethylene glycol or 1.4M glycerol and cooled from -6$^{\circ}C$ to -35$^{\circ}C$ at -0.3$^{\circ}C$ or -O.6$^{\circ}C$ /minute. When equilibrated in 1.8M ethylene glycol, survival rate of fiozen4hawed blastocysts was sarne in both -0. 3$^{\circ}C$ /min and -0.6$^{\circ}C$ /min cooling rate(71.4%). With the equilibration in 1.4M glycerol, survival rate was higher in -0.3$^{\circ}C$ /min(63.6%) than in -0.6$^{\circ}C$ /min cooling rate(53.8%). For vitrification of the KNC blastocysts produced in vitro, they were equilibrated in 2-step or 3-step exposure to vitrification solution(25% ethylene glycol + 25% glycerol). Survival rate was sirilar in both 2-step(45.0%) and 3-step exposure(47.4%). According to culture condition following in vitro fertilization, higher survival rate was obtained for blastocysts co-cultured with bovine oviductal epithelial cell(BOEC, 77.3%) than for those cultured with epidermal growth factor(EGF, 65.7%) or for those co-cultured with BOEG + EGF (54.8%). According to embryo age and development stage, higher survival rate was obtained for 7-day ernbryos(70.0%) than 8-day(56.8%) or 9-day(20.0%) for blastocyst stage and obtained for 8-day embryos(74.3%) than 7-day(62.5%) or 9-day(42.9%) for exponded blastocyst. In surnmary, higher survival rate of frozen4hawed KNC blastocysts produced in vitro were obtained by using ethylene glycol for cryoprotectant and -0.3$^{\circ}C$ /min for cooling rate. And higher survival rate were obtained with co-culture with BOEC for culture condition following in vitro fertilization and with 7-day blastocyst or 8-day expanded blasto cyst for embryo age and development stage.

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정자와 수정란의 동결이 ICSI 시술에서 수정, 발생 및 임신에 미치는 영향 (Effects of Cryopreservation of Sperm and Embryos on fertilization, Development and Pregnancy in Int Application)

  • 민성훈;박용수;박영식
    • Reproductive and Developmental Biology
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    • 제29권3호
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    • pp.193-199
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    • 2005
  • 인간의 불임을 극복하기 위한 번식공학 기술의 효율성을 증가시키기 위해 성세포의 동결이 널리 수행되고 있으나 동결 기술의 효율성에 있어서 논란의 여지가 있다. 본 연구에서는 체외수정란을 생산하기 위한 난자세포질내 정자미세주입(ICSI) 시술에 사용되는 정자와 이들 기술을 이용 생산한 체외수정란의 동결이 배 발생 및 임신에 미치는 효과를 조사하였다. ICSI방법으로 체외수정란을 생산하는 경우 정자의 동결이 체외수정, 발생 및 임신에 영향을 미치지 않았으며, 특히 동결융해한 사출 및 정소정자에 의한 체외수정율과 발생율 및 임신율도 차이가 없었다. 한편 체외수정란을 동결하는 경우 완만동결과 초자화동결에 의한 체외수정란의 생존율과 임신율은 차이가 없었으나, 동결수정란은 신선수정란에 비하여 임신율이 유의하게 낮았다(p<0.05). 결론적으로 ICSI에 사용되는 정자와 달리 ICSI에 의해 생산된 수정란을 동결하는 경우 임신율을 저하시킬 수 있다.

동결건조 쌀죽의 재수화 특성에 미치는 동결온도의 영향 (Effect of Freezing Temperature on the Rehydration Properties of Freeze-Dried Rice Porridge)

  • 고소미;임종환;김정목
    • 한국식품과학회지
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    • 제43권4호
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    • pp.509-512
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    • 2011
  • 동결건조 쌀죽의 품질특성에 미치는 동결속도의 영향을 조사하기 위하여 쌀죽을 -20, -40, -70$^{\circ}C$의 동결 온도에서 동결시킨 후 동결건조시킨 제품을 제조하여 이들 제품의 미세구조, 물리적 강도, 조직감 및 재수화율을 조사하였다. 전자주사현미경을 통한 이들 제품의 미세구조를 관찰한 결과 완만동결(-20$^{\circ}C$)시킨 것이 급속동결(-70$^{\circ}C$)에 비해 공극의 크기가 크고 그 수가 적었다. 반면에 급속동결시킨 제품은 보다 조직이 치밀하고 물리적인 강도가 유의적(p<0.05)으로 큰 값을 나타냈다. 수화복원율은 -20$^{\circ}C$에서 동결시킨 제품이 -40, -70$^{\circ}C$에서 동결시킨 제품보다 높았다. 따라서 품질이 우수하고 사용이 간편한 동결건조 쌀죽을 제조하기 위해서는 최적의 동결 온도의 선택이 필수적임을 알 수 있었다.

절임 배추 및 김치의 동결 저장에 따른 품질변화 (Quality Changes of Salted Chinese Cabbage and Kimchi during Freezing Storage)

  • 고하영;이현;양희천
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제22권1호
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    • pp.62-67
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    • 1993
  • 절임 배추와 숙성된 김치의 동결저장 가능성을 조사하였다. 생배추의 조직은 급속침지동결이나 예비건조하면 완만공기동결이나 건조하지 않은 것에 비해 우수하였다. 절임 배추는 생배추에 비해 동결손상이 적었고 급속동결이나 예비건조에 의해 조직이 개선되지 않아 조직특성은 숙성된 김치와 비슷하였다. 김치는 동결시 동결하지 않은 것에 비해 약간 질겼으나 전체적인 품질에서는 유의적인 차이를 보이지 않았다. 동결저장시 절임배추는 3개월후 약간의 핑크색을 띄었으나 김치는 6개월 저장동안 이런 현상이 나타나지 않았고 품질도 거의 변화가 없었다.

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Production of Lyopilized Culture of Lactobacillus acidophilus with Preserving Cell Viability

  • Kang, Moo-Heon;Vibhor Saraswat;Lee, Jeewon;Park, Young-Hoon
    • Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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    • 제4권1호
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    • pp.36-40
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    • 1999
  • Optimal lyophilization process was developed for manufacturing the dried product of Lactobacillus acidophilus with high cell viability. Three major factors, freezing rate, specific surface area of samples, and stabilizer type and their synergy were shown to play a crucial role in the development of an effective lyophilization process. Finally we found an optimal combination among three process parameters mentioned above; an exceptionally high cell survival percentage of 90% was achieved using the 8.28 cm-1 specific surface area of samples, slow freezing rate, and a stabilizer composition of 4% skim milk +1% glycerol +0.1% calcium chloride.

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하드 디스크 드라이브와 플래시 메모리 드라이브를 활용한 레이드-1 저장장치의 설계 (A Design of RAID-1 Storage using Hard Disk Drive and Flash Memory Drive)

  • 변시우
    • 정보저장시스템학회논문집
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    • 제6권2호
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    • pp.41-46
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    • 2010
  • Recently, Flash Memory Drives are one of the best media to support portable and desktop computers' storage devices. Their features include non-volatility, low power consumption, and fast access time for read operations, which are sufficient to present flash memories as major database storage components for desktop and server computers. However, we need to improve traditional storage management schemes based on HDD(Hard Disk Drive) and RAID(Redundant Array of Independent Disks) due to the relatively slow or freezing characteristics of write operations of SSDs, as compared to fast read operations. In order to achieve this goal, we propose a new storage management scheme called Hetero-Mirroring based on traditional HDD mirroring scheme. Hetero-Mirroring-based storage management improves RAID-1 operation performance by balancing write-workloads and delaying write operations to avoid SSD freezing.

한우 체내.외 유래 소 수정란의 생존성 비교 (Comparison of Viability on In Vivo and In Vitro-derived Bovine Embryos in Korean Native Cattle (Hanwoo))

  • 조상래;최선호;최창용;손준규;고응규;이풍연;조인철;한상현;고문석;김현종
    • 한국수정란이식학회지
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    • 제26권3호
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    • pp.195-199
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    • 2011
  • 포유동물 수정란의 동결보존기술은 최근 기후 변화에 따른 생물종 다양성을 보존하기 위해서 중요하게 여겨지는 연구 분야이다. 따라서 멸실 위험에 처한 동물의 개량과 증식, 보존과 복원 및 생명공학의 분야에 이르기까지 응용 기술은 다양하게 이용되어진다. 본 연구에서는 한우 수정란의 동결 후 생존성 향상을 위해서 동결 방법에 따른 체내 외수정한의 내동성을 조사하였다. 완만동결에 따른 체내 외수정란의 동결 융해 후 수정란의 재확장률은 89.6%와 81.5% 그리고 72시간 배양하였을 때 부화된 수정란은 76.9%와 43.4%, 생존수정란의 총세포수는 136${\pm}$3.6개와 107${\pm}$3.8개의 결과를 보여 동결 융해 후 생존율에서는 차이를 보이지 않았으나, 수정란의 부화율과 세포수 조사에서는 체내수정란이 유의적으로(p<0.05) 높은 결과를 보였다. 체내수정란의 완만동결 후 배반포 회복률은 91.3% 그리고 12시간 이상 배양하였을 때 확장배반포까지의 발달률은 71.4%의 결과를 보였으며, 초자화 동경에서는 85.7%와 75.0%의 결과를 보였다. 결과적으로 본 연구에서 수행된 체내 외 수정란의 동결기술을 이용한다면 수정란이식 현장에서도 효과적인 활용이 가능할 것으로 사료된다.

한우 수정란의 Biopsy 후 배발달율과 동결-융해후 생존성 및 성비 (Survival Rate, Developmental Competence and Sex Ratio of Post-thawed Hanwoo Embryo Following Biopsy)

  • 조상래;최선호;김현종;최창용;진현주;조창연;손동수
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • 제49권2호
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    • pp.287-294
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    • 2007
  • 성판별을 위한 biopsy 후 수정란의 발달율 및 동결-융해 후의 생존율 조사는 다음과 같다. 한우 체내 및 체외 수정란의 성판별을 위해서 영양막 세포의 일부를 채취하기 위해서 수정란을 biopsy 하였다. biopsy된 수정란의 생존율 조사의 결과는 체내 수정란이 100% 그리고 체외수정란이 90.0%의 결과를 나타내어 체내 수정란이 체외 수정란 보다 biopsy 후의 생존율이 높게 나타났음을 알 수 있었다. 수정란의 성판별 비율은 체내 수정란에서는 암컷과 수컷의 비율이 46.3%와 53.7%로 각각 나타나 수컷의 비율이 암컷 보다 다소 높은 경향을 보였으며, 체외 수정란에 있어서는 암컷과 수컷의 비율은 40.0% 와 60.0%로 수컷의 비율이 높게 나타났으나 유의적인 차이는 보이지 않았다. 성판별된 수정란의 동결-융해 후 생존성은 완만동결 방법에 의한 수정란의 생존율은 체내 수정란에서 58.8 %, 체외 수정란에서는 41.7% 그리고 초자화동결 방법에서는 체내 수정란의 생존율이 77.8%, 체외 수정란은 57.1%로의 결과를 보여 체내 수정란을 이용한 초자화동결 방법에서 상대적으로 더 높은 생존율을 보였다.