(1) Objectives: To discover natural skin-lightening agents, we have evaluated the inhibitory activity of EtOH extracts from 20 medicinal plants against mushroom tyrosinase. (2) Methods: Tyrosinase activity was determined by the dopachrome method using L-tyrosine as the substrates. (3) Results: Of the plant extracts tested, the extracts of 4 plants, Albizzia julibrissin, Curcuma longa, Anethum graveolens and Sophora flavescens, exhibited potent inhibitory activity (> 50%) in mushroom tyrosinase assay. Four plant extract, extracts of Agrimonia pilosa, Paeonia moutan, Magnolia obovata and Eugenia caryophyllata also showed relatively strong inhibitory (> 40%) against mushroom tyrosinase. (4) Conclusion: These active medicinal plants may be useful for the development of skin-whitening agents. Since the active medicinal plants may contain effective tyrosinase inhibitors even more than kojic acid, further study to identify the active constituents from the plants is expected.
The purpose of the present research was to investigate the physiological activities of the thermal treated eggplant on the skin. Five minute of thermal treatment at $100^{\circ}C$ had the highest polyphenol content of eggplant. However, below and over 5 min of thermal treatment time, they did not increase. When water and ethanol extracts were used, the maximum DPPH radical scavenging activities were obtained, 66.3 and 62.8%, respectively. Among various extracts, the acetone extract gave the highest cosmetic activity. Especially, when acetone extract (15.0 mg/mL) was used, the maximum inhibition activities of tyrosinase, elastase, and collagenase were obtained, 83.4, 78.2 and 62.5%, respectively. These results suggest the anti-wrinkle and whitening and effects of acetone extract were excellent. Therefore, it is should be considered as a promising candidate for novel cosmetic agents.
일차 섬모(primary cilia)는 세포에서 안테나처럼 돌출되어 나온 기관인데, 외부 자극에 반응할 수 있는 각종 수용체와 채널, 신호 전달 인자들을 가지고 있다. 피부는 자외선, 온도, 습도, 중력, 장력 등 외부 환경에 반응하여 멜라닌이나 콜라겐을 만들고 피부 장벽을 형성한다. 피부에서는 일차 섬모가 없으면 헤어의 생성이나 각질의 분화가 억제된다는 보고가 있다. 또한 피부 색소 생성과 관련하여서는 일차 섬모가 sonic hedgehog-smoothened-GLI2 신호 전달에 의해 활성화되면 멜라닌 생성이 억제된다는 것이 알려져 있다. 피부가 자외선을 받으면 멜라닌 생성 호르몬의 양이 증가하고 멜라닌 생성 호르몬은 멜라닌 생성 세포 내 cAMP의 양을 증가시켜 멜라닌 생성 효소의 발현을 높인다. 이에 멜라닌 생성 호르몬과 세포 내 cAMP의 양을 증가시키는 물질을 처리하여 멜라닌 생성을 높였을 때 일차 섬모의 변화를 확인한 결과 일차 섬모가 감소하는 것을 확인하였다. 또한 기존 미백 원료인 유용성 감초 추출물(an ethanol extract of Glycyrrhiza glabra (EGG) root)과 Melasolv (3,4,5-trimethoxy cinnamate thymol ester (TCTE))가 일차 섬모의 발현을 증가시키고 멜라닌 생성 효소인 tyrosinase의 발현을 억제함을 확인할 수 있었다. 따라서 일차 섬모를 조절할 수 있다면 피부 색소 침착을 효과적으로 조절할 수 있을 것이다.
국내외의 각종 피부관련 약재를 중심으로 천연물 data-base를 구축하고, 이로부터 피부 미백에 효과가 있다고 언급된 한방 약재를 추출, 용매 분획하여 얻은 분획물들을 B16 melanoma cell assay를 이용하여 미백 효과를 평가하였다. 이들 중 특히 미백효과가 우수한 여로(藜蘆, Veratrum nigrum L.)의 뿌리를 대상으로 성분연구하여 3개의 미백유효성분인 (3S,20S,25S)-22,26-iminocholesta-5,22(N)-dien-3-ol (verazine), (3S,20R,25S)-22,26-iminocholesta-5,22(N)-dien-3-ol (epi-verazine) and (3R,23R)-14,15,16,17-tetradehydroveratraman-3,23,diol (veratramine)을 분리, 구조분석하였다. 여로로부터 분리된 3종의 미백 유효성분은 흑화 작용의 주요 효소인 tyrosinase에 대한 작용은 확인할수 없었으나, B16 F1 mouse melanoma에 대한 멜라닌 합성 억제능은 $IC_{50}<1\;{\mu}g/ml$로 강하게 나타났다. 또한 이와 같은 강한 멜라닌 합성 저해능을 갖는 이들 물질들의 안전성 확인을 통하여 향후 새로운 미백물질로 이용될 수 있을것으로 사료된다.
Anti-melanogenesis and skin anti-wrinkle effects of methanol (ME) and hot water (HE) extracts from the fruiting bodies of Ganoderma applanatum were investigated in this study. The total phenolic contents of the ME and HE of the mushroom were 11.68 and 3.15 ㎍ GAEs/mg, respectively, whereas the total flavonoid contents of the ME and HE were 21.82 and 2.69 ㎍ QEs/mg, respectively. The survival rate of B16-F10 murine melanoma cells treated with 750 ㎍ ME and HE were 83.46% and 85.54%, respectively, thereby suggesting that mushroom extracts were slightly cytotoxic at the tested concentration. The in vitro tyrosinase inhibition by ME (83.15%) and HE (83.44%) was significantly lower than that of kojic acid (99.61%), the positive control, at 2.0 mg/mL. Although the inhibition of cellular melanin synthesis in B16-F10 melanoma cells by 2.0 mg/mL of ME (50.24%) and HE (51.24%) was lower than that of arbutin (64.84%), the inhibition by both ME and HE was higher than 50%. Collagenase inhibition by HE was comparable to 2.0 mg/mL epigallocatechin (EGCG), the positive control; however, elastase inhibition by ME and HE was lower than that of EGCG at the concentration tested. The results showed that the fruiting bodies of G. applanatum had good anti-tyrosinase, good anti-collagenase, and moderate anti-elastase activities, which might be useful for developing novel skin-whitening and anti-wrinkle agents.
Taurine has been shown to be tissue-protective against oxidant-induced injury and is a powerful regulator of the immune system. However, there is no study on the antimelanogenic effect of taurine. In this study, we investigated the whitening effect of taurine in B16F10 mouse melanoma cells. Cell viability was measured by MTT assay. We examined melanin contents and tyrosinase activity according to time and concentration. Extracellular signal regulated kinase (ERK) is an important regulator of melanogenesis. It has been reported that activated ERK induced microphthalmia associated transcription factor (MITF) phosphorylation and its subsequent degradation and thus reduced melanin synthesis. In our B16F10 cell culture system, taurine led to decrease melanin contents by 21% at 48 hr. We then observed taurine effects on ERK-P, MITF and tyrosinase by Western blot. ERK was activated at 18 hr and 24 hr, whereas MITF reduced. We could not observe any differences in the levels of tyrosinase. These results suggested that taurine inhibited melanogenesis by ERK signal pathway via MITF degradation. We expect that taurine has potential skin whitening agents in cosmetics.
일련의 alkyl-3,4-dihydroxybenzoate (A)와 N-alkyl-3,4-dihydroxybenzamide (B) 유도체들의 치환기(R1 및 R2) 변화에 따른 피부 감작성과의 관계를 HQSTR 방법으로 분석하였다. 유도된 피부 감작성에 관한 HQSTR 모델은 매우 양호한 예측성(cross-validated $r^2_{cv}.,\;q^2=0.744$)과 적합성(non-cross-validated, $r^2_{ncv}$. =0.978)을 나타내었다. 이들 두 화합물은 멜라닌 생성 저해 활성이 클수록 피부 감작성이 낮은 반비례적인 경향을 보였으며 R1-치환기 사슬 중 C1 ${\~}$ C3 원자 부분은 피부 감작성에 기여하지 않는 경향을 나타내었다. 따라서 ester (A)는 amide (B)보다 피부 감작성이 낮으나(AB) 특징을 나타내므로 미백제의 활성 성분으로서 매우 이상적인 화합물임을 알았다.
In order to develop new skin whitening agents, we prepared the $CH_2Cl_2$ layer (NGC) and BuOH layer (NGB) of 75% EtOH extract of the Nelumbinis nucifera Gaertner. We measured their tyrosinase inhibitory activity in vitro and melanin synthesis inhibitory activity in B16-F1 melanoma cells. They did not show inhibitory activity against mushroom tyrosinase but showed melanin synthesis inhibitory activity in a dose-dependent manner. In a melanin synthesis inhibition assay, NGC and NGB suppressed melanin production up to 52% and 46% at a concentration of $100{\mu}g/mL$, respectively. To elucidate the mechanism of the inhibitory effects of NGC and NGB on melanogenesis, we measured the expression of melanogenesis-related proteins by western blot assay. As a result, NGC suppressed the expression of tyrosinase, tyrosinase related protein 1 (TRP-1), tyrosinase related protein 2 (TRP-2), phosphorylated cAMP responsive element binding (p-CREB) protein, and microphthalmia associated transcription factor (MITF). And NGB inhibited the protein expression of tyrosinase and MITF, but had no significant effect on TRP-1, TRP-2, and p-CREB expression. Moreover, NGB increased the expression of phosphorylated extracellular signal-regulated kinase (p-ERK). In addition, we examined the inhibitory effect on the glycosylation of tyrosinase. As a result, NGC and NGB inhibited the activity of ${\alpha}$-glucosidase in vitro and the glycosylation of tyrosinase in B16-F1 melanoma cells. From these results, we concluded that NGC and NGB could be used as active ingredients for skin whitening.
To develop effective skin whitening agents, we tested natural herbal extracts for their melanogenic inhibitory activities. Sedum samentosum was selected for its inhibitory effect on melanogenesis in B16 melanoma cells. Ethanolic extract of S. samentosum (SSE) was evaluated for antioxidative effect and tyrosinase inhibitory activity of melanogenesis. We investigated the changes in protein level and mRNA level of tyrosinase, tyrosinase related protein (TRP)-1 and TRP-2 by using western blotting and RT-PCR, respectively. SSE showed scavenging activities of free radicals and reactive oxygen species (ROS) with the $IC_{50}$ of 342.7 $\mug/ml$ against 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical and 64.69 $\mug/ml$ against superoxide radicals in the xanthine/xanthine oxidase system, respectively. SSE treatment suppressed the biosynthesis of melanin up to 46% and reduced tyrosinase activity up to 51% at 100 $\mug/ml$ in B16 melanoma cells. The tyrosinase activity and tyrosinase expression in B16 melanoma cells were reduced in a dose-dependent manner by SSE. Also, SSE was able to significantly inhibit tyrosinase and TRP-1 expression in mRNA level. These results suggest that SSE inhibited melanin production which may be dependent on tyrosinase activity and expression in B16 melanoma cells, and an effective whitening agent for the skin.
Tyrosinase is known to accelerate the melanin polymer biosynthesis in melanocyte, so tyrosinase inhibitors hinder the melanin polymer biosynthesis and are useful not only for th e material used in cosmetics as skin-whitening agents but also as the remedy for disturbances in pigmentation. During our search for new melanin biosynthesis inhibitors from natural sources, 130 higher plants were tested for the inhibitory effect against tyrosinase activity by the mushroom tyrosinase assay. Among them, Carex humilis ($IC_{50}$, 10vg/ml), Sophora flavescence ($IC_{50},\;20{\sim}50{mu}g/ml$) and Styrax japonica ($IC_{50},\;10{\mu}g/ml$) inhibited the tyrosinase activity strongly.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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