Purpose: Conventional methods for the prenatal detection of fetal RhD status involve invasive procedures such as fetal blood sampling and amniocentesis. The identification of cell-free fetal DNA (cffDNA) in maternal plasma creates the possibility of determining fetal RhD status by analyzing maternal plasma DNA. However, some technical problems still exist, especially the lack of a positive control marker for the presence of fetal DNA. Therefore, we assessed the feasibility and accuracy of fetal RHD genotyping incorporating the RASSF1A epigenetic fetal DNA marker from cffDNA in the maternal plasma of RhD-negative pregnant women in Korea. Materials and Methods: We analyzed maternal plasma from 41 pregnant women identified as RhD-negative by serological testing. Multiplex real-time PCR was performed by amplifying RHD exons 5 and 7 and the SRY gene, with RASSF1A being used as a gender-independent fetal epigenetic marker. The results were compared with those obtained by postnatal serological analysis of cord blood and gender identification. Results: Among the 41 fetuses, 37 were RhD-positive and 4 were RhD-negative according to the serological analysis of cord blood. There was 100% concordance between fetal RHD genotyping and serological cord blood results. Detection of the RASSF1A gene verified the presence of cffDNA, and the fetal SRY status was correctly detected in all 41 cases. Conclusion: Noninvasive fetal RHD genotyping with cffDNA incorporating RASSF1A is a feasible, reliable, and accurate method of determining fetal RhD status. It is an alternative to amniocentesis for the management of RhD-negative women and reduces the need for unnecessary RhIG prophylaxis.
류마티스 관절염은 주로 관절의 활막 세포의 증식, 병리학적 면역 반응과 관절의 진행성 파괴를 특징으로 하는 만성 염증성 질환이다. 이 질환은 중요한 사회적 건강 문제로 대두된다. 이 논문을 통해 분자수준에서 변화와 류마티스 관절염의 진단 또는 질병의 진행에 대한 발병 기전을 새로운 관점에서 발병기전을 제공한다. 또한 조기 진단과 류마티스 관절염의 예후에 도움이 될 것으로 보인다. 새로운 혈청학적 및 면역학적 바이오마커에 초점을 맞추고 있다. 따라서 넓게 질병 진행의 위험 환자를 식별하는 혈청학적, 생체 면역학적 요인 등을 규명하고 적용시키는 것을 도출할 수 있다. 진단 검사 의학을 기반으로 하는 증거는 환자에게 최선의 결과를 제공할 수 있다. 마지막으로. 최근의 연구 데이터는 이 접근을 통해서 치료를 최적화하기 위해 조기 진단 및 치료에 도움이 되는 새로운 접근 방식으로 궁극적인 유용성을 정립하는데 도움이 될 것으로 사료된다.
Purpose: Screening serologic tests are important tools for the diagnosis of celiac disease (CD). Immunoglobulin (Ig)G anti-deamidated gliadin peptide (anti-DGP) is a relatively new autoantibody thought to have good diagnostic accuracy, comparable to that of anti-tissue transglutaminase (anti-tTG) antibody. Methods: Pediatric patients (n=86) with a clinical suspicion of CD were included. Duodenal biopsy, anti-tTG, and IgG anti-DGP antibody tests were performed. The patients were divided into CD and control groups based on the pathological evaluation of duodenal biopsies. The diagnostic accuracy of serological tests was determined. Results: IgA anti-tTG and IgG anti-DGP antibodies were positive in 86.3% and 95.4% of patients, respectively. The sensitivity, specificity, and diagnostic accuracy of the IgA anti-tTG test were 86.3%, 50.0%, and 68.6%, respectively, and those of the IgG anti-DGP test were 95.4%, 85.7%, and 90.7%, respectively. The area under the receiver operating characteristic (ROC) curve was 0.84 (95% confidence interval [CI], 0.74-0.91) for IgA anti-tTG test and 0.93 (95% CI, 0.86-0.97) for IgG anti-DGP test. The comparison of IgA anti-tTG and IgG anti-DGP ROC curves showed a higher sensitivity and specificity of the IgG anti-DGP test. Conclusion: IgG anti-DGP is a reliable serological test for CD diagnosis in children. High tTG and DGP titers in the serum are suggestive of severe duodenal atrophy. The combined use of IgA anti-tTG and IgG anti-DGP tests for the initial screening of CD can improve diagnostic sensitivity.
A serological diagnosis for swine anisakiasis was trid out. An antigen (hemoglobin) of Anisakis larvae from Scomber japonicus was extracted and purified by means of DEAE cellulose and Sephadex G-200 column chromatography. The antigen was tested its specif
본 연구는 장티푸스 환자에 대한 혈청학적 시험법인 Vi-PHA, $SD^{(R)}$ kit, Widal 시험(O & H)에 대하여 평가를 위해 수행하였다. 2005년부터 2006년까지 수집된 36건의 혈청검체를 대상으로 하였으며, 9건은 배양검사를 통하여 장티푸스균이 검출된 확진환자의(Typhoid fever) 검체이며, 27건은 비장티푸스성 열성환자의(Non-typhoid fever) 검체이다. 시험결과 Vi-PHA는 환자 혈청 9건 중 양성 8건으로 민감도 88.9% (P<0.001; Fisher's exact test), 비장티푸스성 열성환자 27건 중 1건이 양성을 보여 특이도 96.3%로 나타났다. $SD^{(R)}$ kit는 민감도 100% (P<0.001), 특이도 92.6%로 나타났다. Widal (O & H) 시험의 민감도는 각각 88.9% (P=0.001), 100% (P<0.001), 특이도는 77.8%, 70.4%로 나타났다. 민감도는 $SD^{(R)}$ kit와 Widal H 검사법이 가장 높은 것으로 확인되었으며, 특이도는 Vi-PHA가 가장 높게 나타났다. 장티푸스의 효과적인 혈청학적 진단을 위하여 급성 또는 유행지역에서는 특이도가 높은 Vi-PHA로 검사를 수행하고, 장티푸스 비 유행지역과 고위험군에 대하여는 민감도가 높은 Widal H와 $SD^{(R)}$ kit를 적용하는 것이 진단의 유의수준을 높일 수 있을 것으로 판단된다.
벼 흰빛잎마름병균주 Q7472와 Q7502의 항혈청을 사용하여 우리나라에서 수집한 벼 흰빛잎마름병균의 혈청형을 한천gel내 확산법에 의해 분류한 결과, 71균주중 65균주가 혈정형 A형, 5균주가 B-I, 1균주가 B-II형에 속하였다. 혈청형A에 속하는 균주는 $0.1-1\%$의 $CaCl_2$용액에서 자기의집이 거의 일어나지 않았으나 혈청형 B-I과 B-II에 속하는 균주는 심한 자기의집이 일어나 혈청형과 자기의집 사이에는 밀접한 관계가 있었다. 흰빛잎마름병균은 혈청학적 방법에 의해 쉽게 검색될 뿐만 아니라 한천gel내 확산법에 의해 벼 세균성줄무늬병균인 X.campestris pv. olyzicola의 부생세균인 E. herbicola와도 쉽게 구별되었다. 흰빛잎마름병균 검출은 병반을 NaCl용액에 넣은 후에 착압하거나 $100^{\circ}C$에서 1시간 열처리 후 착압한 즙액을 한천gel내 확산법에 의해 항혈청과 반응시킴으로써 가능하였으며, 병반이 적을때는 PSA배지에서 배양한 후 사용하면 효과적이었다.
In the diagnosis of parasitic helminthic diseases, the value of examining and identifying the parasitic eggs and/or adult parasites from patient's urine or stool are well appreciated. However, these methods have a limited value in the diagnosis of tissue or intracellular parasitism, and we have to rely on supplementary methods such as immune-serological test. The author tested the value of gel precipitation reactions as a diagnostic method of clonorchiasis by observing the appearance of bands in rats experimentally infected with Clonorchis sinensis, And the therapeutic effect of CIBA 35'058-Ba was evaluated by this serological method. The antigen was prepared from the adult worms infected in rabbits by Tsuji method. Rats infected with 40 metacercariae each were bled on 7,14,21,26,28,39,42(43),49(53) days after infection to observe the appearance of precipitin bands by both Oucterlony method and immunoelectrophoresis. Fifteen rats were separately infected and treated with CIBA 35'058-Ba in dose of 15mg/kg of body weight. The following results were obtained: 1. It was observed that there exist individual variations in the appearance of the first precipitin band with the range of 2-4 weeks after infection. 2. The number of precipitin bands was increased until 6-7 weeks after infection. In all cases, 3 precipitin bands were appeared by Oucterlony method and 6-7 bands were appeared by immunoelectrophoresis after 6-7 weeks of infecion. 3. It was hardly possible to notice any change in the number of bands after the administration of CIBA 35'058-Ba. This result suggested that the drug has no effect on clonorchiasis which was confirmed by the autopsy of the experimental rats.
Cysticercosis, a parasitic disease caused by Taenia solium metacestode (TsM), has a major global public health impact in terms of disability-adjusted life years. The parasite preferentially infects subcutaneous tissue, but may invade the central nervous system, resulting in neurocysticercosis (NC). NC is an important neglected tropical disease and an emerging disease in industrialized countries due to immigration from endemic areas. The prevalence of taeniasis in Korea declined from 0.3%-12.7% during the 1970s to below 0.02% since the 2000s. A survey conducted from 1993 to 2006 revealed that the percentage of tested samples with high levels of specific anti-TsM antibody declined from 8.3% to 2.2%, suggesting the continuing occurrence of NC in Korea. Modern imaging modalities have substantially improved the diagnostic accuracy of NC, and recent advances in the molecular biochemical characterization of the TsM cyst fluid proteome also significantly strengthened NC serodiagnosis. Two glycoproteins of 150 and 120 kDa that induce strong antibody responses against sera from patients with active-stage NC have been elucidated. The 150 kDa protein showed hydrophobic-ligand binding activities and might be critically involved in the acquisition of host-derived lipid molecules. Fasciclin and endophilin B1, both of which play roles in the homeostatic functions of TsM, showed fairly high antibody responses against calcified NC cases. NC is now controllable and manageable. Further studies should focus on controlling late-onset intractable seizures and serological diagnosis of NC patients infected with few worms. This article briefly overviews diagnostic approaches and discusses current issues relating to NC serodiagnosis.
Alveolar echinococcosis (AE) caused by infection with E. multilocularis metacestode, represents one of the most fatal helminthic diseases. AE is principally manifested with infiltrative, proliferating hepatic mass, resembling primary hepatocellular carcinoma. Sometimes metastatic lesions are found in nearby or remote tissue. AE diagnosis largely depends on imaging studies, but atypical findings of imaging features frequently require differential diagnosis from other hepatic lesions. Serological tests may provide further evidence, while obtaining reliable AE materials is not easy. In this study, alternative antigens, specific to AE were identified by analyzing E. granulosus protoscolex proteins. An immunoblot analysis of E. granulosus protoscolex showed that a group of low-molecular-weight proteins in the range from 14 kDa to 16 kDa exhibited a sensitive and specific immune response to AE patient sera. Partial purification and proteomic analysis indicated that this protein group contained myosin, tubulin polymerization promoting protein, fatty-acid binding protein, uncharacterized DM9, heat shock protein 90 cochaperone tebp P-23, and antigen S. When the serological applicability of recombinant forms of these proteins was assessed using enzyme-linked immunosorbent assay, DM9 protein (rEgDM9) showed 90.1% sensitivity (73/81 sera tested) and 94.5% specificity (172/181 sera tested), respectively. rEgDM9 showed weak cross-reactions with patient sera from the transitional and chronic stages of cystic echinococcosis (3 to 5 stages). rEgDM9 would serve as a useful alternative antigen for serodiagnosis of both early- and advanced-stage AE cases.
The studies were performed for the PRRS antigen and antibody detection from breeding farms, artificial insemination(AI) center and growing farms in Jeonbuk province. 1. Specific PRRS primers were successfully amplified ORF6 617bp and ORF7 448 bp on agarose gel. 2. RT-PCR method has been establish by commercial kit and the thermal cycler program consisted of 30 cycles: $95^{\circ}C$ for 30 sec, $45^{\circ}C$ for 30 sec, and $72^{\circ}C$ for 45 sec. 3. The results of PRRS antibody test by ELISA method in AI centers were $6.6\%,\;53.3\%$ and breeding farms $65\%,\;65\%\;and\;38.7\%$, respectively. The serological positive of the antibody in gilt higher than sow. 4. The sero-positive of the PRRS antibody showed average $21\%$ in domestic farms, $56.2\%$ in breeding farms, and $29.9\%$ in AI center.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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